風疹IgM 抗體檢測中即刻法和雙質控法的應用

劉斌

風疹是一種傳染性疾病，因風疹病毒感染所致，臨床癥狀以發熱、出診子、淋巴結腫大等為主，主要通過飛沫經呼吸道進行傳播[1-2]。IgM 抗體檢測是臨床診斷風疹的主要參考依據，目前常用的檢測方法是酶聯免疫吸附試驗，該試驗方法具有敏感度高、操作簡易、成本低等優勢，在臨床中得到了廣泛運用[3-4]。但是，已有的文獻報道指出，酶聯免疫吸附試驗會受到溫度、洗板、顯色等諸多因素的影響，導致其檢測結果存在一定的誤差，因此必須加強檢測過程中的室內質量控制[5]。鑒于此，本研究為了進一步探討風疹IgM 抗體檢測中的有效室內質量控制方法，就62 例疑似風疹患者酶聯免疫吸附試驗中即刻法和雙質控法的應用效果進行對照分析，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

篩選出本科室2018 年4 月—2020 年4 月的62 例疑似風疹患者，均出現一定程度的皮疹、黏膜疹、淋巴結腫大、發熱等癥狀。對所有進行IgM 抗體檢測，根據不同室內質量控制方法將其分為A 組與B 組，每組31 例。A 組：男21 例，女20 例；年齡8 ～53歲，平均（31.69±10.91）歲。B 組：男20 例，女21 例；年齡8 ～54歲，平均（31.74±11.00）歲。兩組基本資料對比，差異無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 采集患者的血液標本，3 000 r/min 離心10min，提取上層血清，于2 ～10℃的冰箱中冷藏保存待測。

1.2.2 IgM 抗體檢測 參照衛生部發布的風疹診斷標準（WS297-2008）[6]，運用酶聯免疫吸附試驗進行檢測，試劑盒源于深圳市科潤達生物工程有限公司，均與有效期內使用，嚴格按照說明書操作。

1.2.3 室內質量控制 內部對照質控血清根據麻疹網絡實驗室SOP（麻疹風疹IgM 抗體檢測的內部質控標準化操作規程），利用陽性病例血清自行配制，分裝100 μL 一管，不反復凍融。儀器包括運用Thermo MUITISKAN MK3 酶標儀與Thermo WELLWASH酶標洗板機；HWS-28 電熱恒溫水浴鍋，源于上海合恒儀器設備有限公司。

A 組應用即刻法，按照公式計算出定值血清的密光度值（OD）/試劑盒臨界值（CO）的比值（S/CO）的上限與下限，再查離散指數值表判定質控結果，若結果為“告警”或“失控”，則舍棄并重新測定，其他測定值可繼續使用[7]。

B 組應用雙質控法。替換質控血清時，將新質控血清在舊質控血清用完前與其一起檢測≥3 次，即于同一個酶標板上各加新舊質控血清1 ～2 孔。舊質控血清的OD 值參照原數據組繼續進行“即刻法”分析。替換試劑批號時，于舊試劑用完前將新試劑2 排（18 孔）與舊試劑于同一個酶標板上進行3 次檢測，兩種批號的試劑皆加入到同一質控血清與部分相同樣本中；舊試劑質控的OD 值參照原數據組繼續進行“即刻法”分析。新試劑質控的OD 值劑同時進行原數據組的“即刻法”分析與新一組數據的“即刻法”分析。從第3 次檢測開始應用新試劑進行標本檢測，質控的OD 值也只進行新一組數據的“即刻法”分析。若新試劑質控的OD 值在原始數據的“即刻法”分析中出現負值偏移至警報與失控，且同一個酶標板舊試劑的質控結果為可控狀態，則新試劑棄用。

1.3 觀察指標

對比兩組的室內質控效果，分析舊試劑與新試劑試驗結果的可控情況。

2 結果

舊試劑第5 ～7 次與新試劑第1 ～2 次對應的同一個酶標板試驗結果以及舊試劑的第7 次與新試劑的4 次試驗結果均處于可控狀態。見表1。

表1 兩組的室內質控效果對比

3 討論

酶聯免疫吸附試驗是免疫學診斷的主要方法之一，其檢測結果較為穩定，適用于大規模的檢測。但臨床實踐表明，酶聯免疫吸附試驗的影響因素較多，要確保檢測結果的準確性，就必須讓每次檢測均保持可控，因此就需要進行室內質量控制[8]。此前較為常用的室內質控方法是即刻法和常規質控圖相結合的方式，具有簡單、實用、易操作的特點[9]。但實際操作過程中發現，即刻法的前幾次試驗存在可控性無法判定的不足，特別是對于異常不常檢測的指標以及有效期較短的試劑盒，其可控狀態存在較為明顯的不穩定性[10-11]。所以，需要探討一種更為有效、能夠準確反映檢測過程可控狀態的室內質量控制方法。

雙質控法采取雙重質控，有效解決了新舊試劑替換時檢測結果不可控的情況[12]。本研究對比即刻法與雙質控法的應用效果，結果顯示，新舊試劑的各次檢測結果均處于可控狀態，提示兩種方法在風疹IgM 抗體檢測的室內質量控制中均有效，由此進一步證實了酶聯免疫吸附試驗在風疹IgM 抗體檢測中的應用價值。另外，分析即刻法有效的原因，主要在于：風疹IgM 檢測的樣本數量少、時間短，因此采用即刻法進行室內質量控制也能獲得較為滿意的效果。

必須一提的是，進行室內質量控制的最終目的是確保試驗結果的準確性。而酶聯免疫吸附試驗的試劑盒與質控血清的有效期較短，所以應盡量選擇更具有效性的雙質控法進行室內質量控制，以提高檢測結果的準確性與可靠性。同時應保證在試劑盒與質控血清的有效期內進行風疹IgM 抗體檢測，以確保檢測結果的準確率，為患者的臨床診斷與治療提供科學、有價值的參考依據。

綜上所述，風疹IgM抗體檢測中雙質控法的應用效果優于即刻法，有助于提高檢測結果的準確率，對風疹的臨床診斷具有重要意義。