刺萆薢石油醚部化學成分研究

黨小琳

(陜西國際商貿學院醫(yī)藥學院，咸陽，712000)

中藥研究

刺萆薢石油醚部化學成分研究

黨小琳

(陜西國際商貿學院醫(yī)藥學院，咸陽，712000)

目的：研究刺萆薢根莖石油醚部化學成分。方法：運用色譜法進行分離純化，利用理化性質和波普技術鑒定化合物結構。結果：從刺萆薢根莖石油醚萃取物中分離得到7個化合物，分別為β-谷甾醇(1)，24-乙基-4-膽甾烯-3，6-二酮(2)，多花二醌C(3)，胡蘿卜苷(4)，原兒茶酸甲酯(5)，O-對香豆酰基甘油酯(6)，丁香酸(7)。結論：化合物1～7均為首次從該植物中分離得到。

刺萆薢；化學成分；結構鑒定

刺萆薢(SmilaxferoxWall. Ex Kunth)為百合科菝葜屬植物刺萆薢的干燥根莖，又名長托菝葜[1]，主要產于四川、湖北、廣東、廣西、貴州和云南等地，其味澀、微苦，性平，具有祛風利濕，解瘡毒等功效，臨床上主要用于風濕筋骨疼痛、淋濁、梅毒、皮膚過敏、濕疹等疾病[2]。刺萆薢根莖的外形與菝葜藥材非常相似，且功效比較接近，常作為菝葜藥材的一個重要習用品種。對于菝葜藥材的化學成分和藥理作用研究已經非常廣泛和透徹，而對于刺萆薢的研究鮮有報道，目前國內僅報道有落新婦苷、黃杞苷、二氫山柰酚、山柰酚、反式白藜蘆醇、β-谷甾醇等幾種成分[3]。為了進一步尋找刺萆薢中有效成分，更好地保護和合理利用藥用資源，本文對刺萆薢石油醚部的化學成分進行了研究，從中分離鑒定出7種化合物，均為首次從刺萆薢中得到。

1 材料

1.1 藥材 刺萆薢根莖于2015年10月采自秦嶺太白山，陰干，粉碎后過篩(20目)。

1.2 試劑 GF254硅膠薄層色譜板(煙臺江友硅膠開發(fā)有限公司)；80～100目、100～200目、200～300目柱層析硅膠(青島海洋化工廠)；Sephadex LH-20羥丙基葡聚糖凝膠(sigma公司)；MCI Gel(75～150 μm)(三菱化學商貿有限公司：中國)。所用試劑均為分析純。

1.3 儀器 LCQ DECA XP質譜儀(美國Thremo公司)；SHB-IIIA循環(huán)水真空泵(莫吉娜儀器制造有限公司)；R206D旋轉蒸發(fā)儀(上海申生科技有限公司)；DRX-400、500型超導核磁共振儀(美國Bruker公司，TMS內標)；ZF-7三用紫外分析儀(鄭州市煜城儀器有限公司)；AUW320電子天平(日本島津)。

2 提取與分離

2.1 提取 取刺萆薢根莖干粉10 kg，用60%乙醇連續(xù)熱回流提取，提取液減壓濃縮得到乙醇浸膏，將乙醇浸膏懸浮于水，用石油醚萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮得到刺萆薢根莖石油醚浸膏545.7 g。

2.2 分離 取石油醚浸膏干法上樣，經硅膠柱層析(石油醚-丙酮 10∶1-1∶1)粗分級，TLC檢測合并得到10個組分Fr.1～Fr.10。Fr.2(5.6 g)經Sephadex LH-20柱色譜(甲醇)純化得到化合物1(14.1 mg)。Fr.5(13.6 g)經硅膠柱色譜層析(石油醚-乙酸乙酯 8∶1-3∶1)純化得到Fr.5-1～Fr.5-6共6個組分，F(xiàn)r.5-3放置后析出白色結晶，過濾后得到化合物2(20.3 mg)。Fr.5-5經MCI柱層析(甲醇)后，利用Sephadex LH-20柱色譜(甲醇)和硅膠柱層析(石油醚-乙酸乙酯 7∶1)反復純化得到化合物3(15.7 mg)。Fr.7(27.4 g)放置后出現(xiàn)大量沉淀，過濾后經乙酸乙酯反復洗滌得到化合物4(83.8 mg)。Fr.5-6經Sephadex LH-20柱色譜(甲醇)純化，利用制備薄層色譜制備得到化合物5(12.5 mg)。Fr.7(16.3 g)依次經MCI柱層析(甲醇)、硅膠柱層析(氯仿-丙酮 50∶1)和Sephadex LH-20柱色譜(甲醇)純化得到化合物6(17.5 mg)。Fr.9(12.0 g)依次經MCI柱層析(甲醇)和Sephadex LH-20柱色譜(甲醇)純化得到化合物7(23.3 mg)。

3 結構鑒定

化合物1：白色粉末或白色的鱗片狀結晶，可溶于氯仿。經TLC檢測，在254 nm處無紫外吸收，5%的硫酸-乙醇加熱顯色穩(wěn)定后呈紫色，以β-谷甾醇標準品作為對照，經TLC多次檢測，其Rf值與顯色反應均與樣品一致[4]，確定化合物1為β-谷甾醇，分子式C29H50O。

化合物2：黃綠色片狀結晶，可溶于丙酮和氯仿，C29H46O2;ESI-MS：m/z=426.9[M+H]+;1H-NMR(CDCl3，500 MHz)δ：6.16(1H，s，H-4)，2.67(2H，dd，J=3.5，16.0 Hz，H-7)，2.5(2H，m，H-2)，1.16(3H，s，H-1)，0.93(3H，d，J=6.5 Hz，H-21)，0.85(3H,d,J=8.5 Hz，H-26)，0.83(3H,d，J=6.0 Hz，H-29)，0.81(3H，d，J=7.0 Hz，H-27)，0.72(3H，s，H-18).13C-NMR數(shù)據(jù)見表1。經與文獻[5]對照，化合物2的結構鑒定為24-乙基-4-膽甾烯-3，6-二酮。

化合物3：棕黃色油狀物，易溶于丙酮和氯仿，C31H24O9;ESI-MS：m/z=539.4[M-H]-;1H-NMR(CDCl3，500 MHz)δ：13.42(1H，s，5-OH)，12.39(1H，s，8′-OH)，12.00(1H，s，1′-OH)，7.96(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′)，7.72(1H，d，J=1.5 Hz，H-4′)，7.44(1H，d，J=8.0 Hz，H-6′)，7.14(1H，brs，H-2′)，6.10(1H，s，H-3)，5.19(1H，q，J=6.5 Hz，H-11)，3.86(3H，s，2-OCH3)，3.65(1H，m，H-14)，2.52(3H，s，3′-CH3)，2.35(1H，dd，J=17.0，10.5 Hz，H-13a)，2.15(1H，d，J=17.0 Hz，H-13b)，1.71(3H，d，J=6.5 Hz，H-12)，1.26(3H，d，J=6.5 Hz，H-15).13C-NMR數(shù)據(jù)見表2。經與文獻[6]對照，化合物3的結構鑒定為多花二醌C。

化合物4：白色粉末，微溶于氯仿。TLC檢測在254 nm處無紫外吸收，5%的硫酸-乙醇加熱顯色穩(wěn)定后呈紫色，以胡蘿卜苷標準品作為對照，經TLC多次檢測，其Rf值與顯色反應均與樣品一致，確定化合物4為胡蘿卜苷，分子式C35H60O6。

化合物5：黃色粉末，易溶于丙酮，C8H8O4;EIS-MS：m/z=167.2[M-H]-，335.1[2M-H]-;1H-NMR[(CD3)2CO-d6400 MHz]δ：7.64(1H，dd，J=8.2 Hz，H-6)，7.58(1H，d，J=2 Hz，H-2)，6.93(1H,d，J=8 Hz，H-5)，3.94(3H，s，OCH3)。經與文獻[7]對照，化合物5的結構鑒定為原兒茶酸甲酯。

表1 化合物2的13C-NMR數(shù)據(jù)(溶劑：CDCl3，TMS內標)

表2 化合物3的13C-NMR數(shù)據(jù)(溶劑：CDCl3，TMS內標)

化合物6：淡黃色油狀物，溶于甲醇，C12H14O5;ESI-MSm/z=237.3[M-H]-;1H-NMR(CD3OD-d4，400 MHz)δ：4.25(1H，dd，J=11.5，4.0 Hz，H-1a)，4.15(1H，dd，J=11.5，4.0 Hz，H-1b)，3.88(1H，m，H-2)，3.59(2H，dd，J=5.0，3.5 Hz，H-3)，7.64(1H，d，J=15.5 Hz，H-7′)，6.3 5(1H，d，J=16.0 Hz，H-8′)。經與文獻[8]對照，化合物6的結構鑒定為1-O-對香豆酰基甘油酯。

化合物7：白色晶體，易溶于甲醇，C9H10O5;ESI-MS：m/z=199.4[M+H]+，221.2[M+Na]+;1H-NMR(CD3OD-d4，400 MHz)δ：7.32(2H，s，H-2，6)，3.88(6H，s，3，5-OCH3)。經與文獻[9]對照，化合物7結構鑒定為丁香酸。

圖1 化合物結構式

4 討論

本文通過對刺萆薢石油醚部化學成分進行分離鑒定，獲得7種化合物，分別為β-谷甾醇，24-乙基-4-膽甾烯-3，6-二酮，多花二醌C，胡蘿卜苷，原兒茶酸甲酯，O-對香豆酰基甘油酯，丁香酸，均為首次從該植物中分離得到。

中藥的化學成分是其藥理作用的物質基礎，楊安金[3]從刺萆薢中分離出落新婦苷，落新婦苷具有抗炎作用，能夠抑制iNOS、TNF-α mRNA炎性基因表達和炎性反應因子NO分泌[10]，這與刺萆薢具有祛風利濕功效可能存在聯(lián)系。刺萆薢臨床上主要適用于風濕筋骨疼痛、淋濁、梅毒、皮膚過敏、濕疹等疾病，現(xiàn)代藥理研究表明治療這些疾病的藥物多具有抗炎、抗菌、抗病毒和抗氧化功效。本研究所發(fā)現(xiàn)的7種化合物多具有抗菌和抗氧化作用。如原兒茶酸甲酯具有較強的抗氧化活性和抗菌作用[11-12]，O-對香豆酰基甘油酯具有顯著的抗氧化和抗衰老活性[13]，丁香酸具有抗菌抗病毒作用，其對內毒素的破壞率可達到83.16%，并能降低內毒素引起的發(fā)熱反應[14]以及對枯草芽孢桿菌具有較強的抑制作用[15]。對于刺萆薢化學成分和藥理作用的研究目前還不多，可供參考的文獻也甚少，因而本文所獲得的研究成果為進一步了解刺萆薢化學成分奠定了基礎，也為研究其藥理作用提供了依據(jù)。

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(2016-05-24收稿 責任編輯：白樺)

Chemical Constituents of Smilax ferox Extracted from petroleum ether

Dang Xiaolin

(SchoolofPharmacy，ShaanxiInstituteofInternationalTrade&Commerce，Xianyang712000，China)

Objective:To study the chemical constituents of Smilax ferox Wall.Ex Kunth extracted from petroleum ether.Methods:Chromatographic technique was used to isolate and purify the compounds.And the structures were identified on the basis of the analyses of spectral data.Results:Seven compounds were identified：β-sitosterol (1)，stigmast-4-ene-3,6-dione (2)，floribundi quinones C(3)，daucosterol (4)，protocatechuic acid methyl ester (5)，1-O-p-coumaroylglycerol (6) and syringic acid (7)，respectively.Conclusion:All compounds were separated from this plant for the first time.

Smilaxferox; Chemical constituents; Structural identification

黨小琳(1988.07—)，女，碩士研究生，講師，專職教師，主要從事中藥學和藥用植物資源開發(fā)與利用研究，E-mail：dangxl2008@126.com

R284.2

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2017.03.042