長(zhǎng)鏈非編碼RNA AGAP2-AS1在膠質(zhì)瘤增殖過(guò)程中作用機(jī)制的研究

曹艷菲 陳剛 周曉娜 寇筱囡 賈凌筱 張麗娜

作者單位：1 大慶油田總醫(yī)院檢驗(yàn)科，黑龍江 大慶 163000；2 神經(jīng)外科

膠質(zhì)瘤在臨床多見(jiàn)，其相關(guān)研究眾多，涉及面較廣。長(zhǎng)鏈非編碼RNA在腫瘤患者中的研究不斷增多的同時(shí)，其相關(guān)方面在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)研究仍相對(duì)匱乏。關(guān)于長(zhǎng)鏈非編碼RNA AGAP2-AS1對(duì)ERK/MAPK信號(hào)通路的影響研究可見(jiàn)[1]，但是其通過(guò)影響ERK/MAPK信號(hào)通路來(lái)達(dá)到促進(jìn)膠質(zhì)瘤增殖的研究有待深入探究[2]，其對(duì)于膠質(zhì)瘤細(xì)胞的克隆形成能力的針對(duì)性研究意義較高。因此本研究就長(zhǎng)鏈非編碼RNA AGAP2-AS1在膠質(zhì)瘤增殖過(guò)程中的作用機(jī)制進(jìn)行細(xì)致探究，現(xiàn)報(bào)道如下。

逆變器轉(zhuǎn)化效率通常會(huì)受以下兩種因素影響：①把直流電流快速轉(zhuǎn)換成交流正弦波，在一定程度上會(huì)給功率半導(dǎo)體整體發(fā)熱產(chǎn)生很大損失。②逆變器MPPT中的控制算法會(huì)嚴(yán)重影響整個(gè)轉(zhuǎn)換效率[3]。光伏電池陣列中的輸出電流與電壓會(huì)隨日照的溫度變化發(fā)生巨大變化，且隨用電設(shè)備負(fù)載率的變化發(fā)生較大波動(dòng)。逆變器的MPPT算法在一定程度上可以對(duì)電流與電壓進(jìn)行有效控制，使光伏系統(tǒng)能夠快速達(dá)到最大輸出功率，并且能夠在短時(shí)間內(nèi)跟蹤到最大電力點(diǎn)，轉(zhuǎn)化效率也將得到進(jìn)一步提高。當(dāng)負(fù)載率在63%左右時(shí)，在此條件下的逆變器電氣效轉(zhuǎn)換效率呈現(xiàn)的是一種最高狀態(tài)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

（1）選取2018年12月—2019年11月期間的30例腦膠質(zhì)瘤患者標(biāo)本為觀察組，同時(shí)期的30例腦外傷患者標(biāo)本為對(duì)照組。對(duì)照組中包括男性20例，女性10例，年齡為20～63歲，平均年齡（38.7±7.0）歲。觀察組中包括男性19例，女性11例，年齡為21～62歲，平均年齡（38.9±7.1）歲；分級(jí)：Ⅰ～Ⅱ級(jí)者15例，Ⅲ～Ⅳ級(jí)者15例。兩組的年齡與性別比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（2）中科院細(xì)胞庫(kù)人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87及人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞U251細(xì)胞。

1.2 方法

將兩組的組織標(biāo)本采用實(shí)時(shí)定量PCR法進(jìn)行組織AGAP2-AS1表達(dá)的檢測(cè)，嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)操作，同時(shí)采用免疫組化法檢測(cè)組織Ras及ERK1/2蛋白表達(dá)情況，根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)及著色強(qiáng)度計(jì)分，最終分值0～5分，0～1分為-，2～3分為+，4分為++，5分為+++；將U87及U251細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染，按照轉(zhuǎn)染試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行轉(zhuǎn)染混合液的配置，以完全培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，轉(zhuǎn)染后進(jìn)行siRNA AGAP2-AS1相對(duì)表達(dá)量的檢測(cè)；于轉(zhuǎn)染完成后48 h采用克隆形成實(shí)驗(yàn)克隆形成能力的檢測(cè)，以5×103個(gè)細(xì)胞于培養(yǎng)皿中進(jìn)行培養(yǎng)，至肉眼可見(jiàn)克隆集落，固定染色，進(jìn)行克隆形成能力的檢測(cè)。然后比較兩組的組織RNA AGAP2-AS1 mRNA表達(dá)量、Ras及ERK1/2蛋白表達(dá)情況，并比較觀察組中不同分級(jí)膠質(zhì)瘤的RNA AGAP2-AS1 mRNA表達(dá)量、Ras及ERK1/2蛋白表達(dá)情況，比較轉(zhuǎn)染siRNA AGAP2-AS1與siRNA-NC的U87及U251細(xì)胞克隆數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用軟件SPSS 23.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料表示為（±s），進(jìn)行t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料表示為（n，%），進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組的組織AGAP2-AS1 mRNA表達(dá)量、Ras及ERK1/2蛋白表達(dá)情況比較

觀察組的AGAP2-AS1 mRNA表達(dá)量為（0.013±0.002），對(duì)照組為（0.005±0.001），觀察組顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=19.595，P=0.000）；觀察組的Ras及ERK1/2蛋白表達(dá)顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

2.2 不同分級(jí)膠質(zhì)瘤的AGAP2-AS1 mRNA表達(dá)量、Ras及ERK1/2蛋白表達(dá)情況

經(jīng)實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)顯示，轉(zhuǎn)染siRNA AGAP2-AS1的U87及U251 AGAP2-AS1表達(dá)量下調(diào)80%；轉(zhuǎn)染siRNA AGAP2-AS1的U87及U251細(xì)胞克隆數(shù)顯著低于siRNA-NC，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表3。

一直以來(lái)，無(wú)論是市場(chǎng)營(yíng)銷學(xué)理論界還是教科書(shū)，都把市場(chǎng)營(yíng)銷分為傳統(tǒng)和現(xiàn)代兩大觀念，作為市場(chǎng)營(yíng)銷學(xué)的經(jīng)典理論被廣泛應(yīng)用。

表2 不同分級(jí)膠質(zhì)瘤的AGAP2-AS1 mRNA表達(dá)量、Ras及ERK1/2蛋白表達(dá)情況比較 [例（%）]

表3 轉(zhuǎn)染siRNA AGAP2-AS1與siRNA-NC的U87及U251細(xì)胞克隆數(shù)比較

2.3 轉(zhuǎn)染siRNA AGAP2-AS1與siRNA-NC的U87及U251細(xì)胞克隆數(shù)比較

Ⅲ～Ⅳ級(jí)者的AGAP2-AS1 mRNA表達(dá)量為（0.019±0.003），Ⅰ～Ⅱ級(jí)為（0.008±0.002），Ⅲ～Ⅳ級(jí)顯著高于Ⅰ～Ⅱ級(jí)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=11.858，P=0.000）；Ⅲ～Ⅳ級(jí)者的Ras及ERK1/2蛋白表達(dá)顯著高于Ⅰ～Ⅱ級(jí)者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。

電力系統(tǒng)的靜態(tài)電壓穩(wěn)定裕度是指在臨界狀態(tài)下系統(tǒng)有功功率與正常狀態(tài)下系統(tǒng)有功功率的差值，用于衡量系統(tǒng)電壓穩(wěn)定性。當(dāng)系統(tǒng)靜態(tài)電壓穩(wěn)定裕度越大，表示系統(tǒng)具有越強(qiáng)的承載極限負(fù)荷的能力。這里采用的配電網(wǎng)靜態(tài)電壓穩(wěn)定指標(biāo)為

3 討論

膠質(zhì)瘤在臨床并不少見(jiàn)，而關(guān)于本病發(fā)生發(fā)展的研究是熱點(diǎn)。近年來(lái)關(guān)于長(zhǎng)鏈非編碼RNA在各類種類中的作用機(jī)制研究不斷增多[3-5]，各類長(zhǎng)鏈非編碼RNA在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)變化研究雖可見(jiàn)，但是長(zhǎng)鏈非編碼RNA AGAP2-AS1在膠質(zhì)瘤增殖過(guò)程中的作用機(jī)制研究極為不足。Ras及ERK1/2蛋白作為ERK/MAPK信號(hào)通路的關(guān)鍵性蛋白指標(biāo)，其在依賴蛋白的腫瘤細(xì)胞增殖及血管生成方面具有影響作用，其中ERK1/2被磷酸化為p- ERK1/2后可進(jìn)入胞核，并可啟動(dòng)細(xì)胞增殖相關(guān)的基因，因此對(duì)其表達(dá)的變化研究有助于了解膠質(zhì)瘤增殖相關(guān)方面的變化[6]。另外，siRNA AGAP2-AS1的U87及U251細(xì)胞克隆數(shù)也有助于了解膠質(zhì)瘤的增殖情況[7]，對(duì)其檢測(cè)價(jià)值較高。

本研究就長(zhǎng)鏈非編碼RNA AGAP2-AS1在膠質(zhì)瘤增殖過(guò)程中的作用機(jī)制進(jìn)行探究，結(jié)果顯示，膠質(zhì)瘤患者的RNA AGAP2-AS1 mRNA表達(dá)量、Ras及ERK1/2蛋白表達(dá)顯著升高，分級(jí)較高的膠質(zhì)瘤患者的RNA AGAP2-AS1 mRNA表達(dá)量、Ras及ERK1/2蛋白表達(dá)高于分級(jí)較高者，同時(shí)轉(zhuǎn)染siRNA AGAP2-AS1的U87及U251細(xì)胞克隆數(shù)顯著低于siRNA-NC，因此認(rèn)為長(zhǎng)鏈非編碼RNA AGAP2-AS1在膠質(zhì)瘤增殖過(guò)程中的作用突出，Ras及ERK1/2蛋白作為膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展的重要蛋白，RNA AGAP2-AS1可能通過(guò)調(diào)控了Ras及ERK1/2蛋白的表達(dá)情況來(lái)影響細(xì)胞的增殖情況[8-12]。綜上所述，筆者認(rèn)為長(zhǎng)鏈非編碼RNA AGAP2-AS1可通過(guò)調(diào)控ERK/MAPK信號(hào)通路影響膠質(zhì)瘤的增殖，下調(diào)AGAP2-AS1可顯著影響膠質(zhì)瘤細(xì)胞的克隆形成能力。