宜春市2194 例婦女人乳頭瘤病毒感染情況分析

朱小燕，劉夢(mèng)姮，徐文群

（宜春市婦幼保健院檢驗(yàn)科，江西 宜春 336000）

宮頸癌位于女性惡性腫瘤發(fā)病和死亡率的第二位，每年大約有50 多萬(wàn)的新發(fā)癌癥患者，死亡數(shù)高達(dá)266000 例，且有年輕化趨勢(shì)，嚴(yán)重威脅女性健康受到廣泛的關(guān)注。大量研究證明人乳頭瘤病毒（HPV）的持續(xù)感染是引起女性宮頸癌的主要誘因[1,2]，目前分離鑒定的HPV-DNA 有100 多種，能感染女性生殖道的有40 多種。由于宗教信仰、風(fēng)俗文化、職業(yè)分布、人群自身免疫力等原因致使HPV 的流行在各地有所差別，感染率也有差異[3,4]。因此了解本地的HPV 流行現(xiàn)狀, 分析其型別特征及年齡分布特點(diǎn),對(duì)于降低本地區(qū)宮頸癌的發(fā)病率及對(duì)HPV 感染預(yù)防； 疫苗研發(fā)臨床指導(dǎo)有重要意義。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 收集 2017 年 11 月-2019 年 3 月在宜春市婦幼保健院婦科就診和常規(guī)體檢的共計(jì)2194 例女性宮頸脫落細(xì)胞標(biāo)本進(jìn)行基因分型檢測(cè)。年齡 17~76 歲，平均年齡 38±2.52 歲。取樣前要求條件：⑴檢查前3d 不做陰道沖洗，不要用避孕藥膏等陰道內(nèi)用藥物： ⑵檢查前24h 內(nèi)不應(yīng)有性行為：⑶檢查前不進(jìn)行醋酸或碘液涂抹。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 以專用宮頸脫落細(xì)胞采集器進(jìn)行采樣，醫(yī)護(hù)人員先以窺陰器暴露宮頸，用棉拭子將宮頸過(guò)多的分泌物擦去，取出宮頸刷置于宮頸口，單方向旋轉(zhuǎn)4~5 周以獲得足量的上皮細(xì)胞樣本，然后將宮頸刷頭部放入洗脫管中，沿刷柄折痕處將宮頸刷柄折斷，旋緊洗脫管蓋，做好樣本標(biāo)識(shí)，并保持洗脫管直立放置，盡快送檢。

1.2.2 檢測(cè)方法 采用北京博暉新生物技術(shù)股份有限公司的人乳頭瘤病毒核酸檢測(cè)試劑盒 （生物芯片法）和博暉BHF-VI 核酸芯片檢測(cè)儀，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書的操作步驟提取DNA，針對(duì)目的的DNA 進(jìn)行PCR 擴(kuò)增和反向斑點(diǎn)雜交,根據(jù)HPV 特定基因設(shè)計(jì)的特異性引物，可以擴(kuò)增出24 種HPV基因型的目的片段，分為18 種高危型和6 種低危型。高危型包括 HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83： 低 危 型 包 括HPV6、11、42、43、44、81。儀器將擴(kuò)增產(chǎn)物轉(zhuǎn)移到芯片的檢測(cè)區(qū)。在檢測(cè)區(qū)雜交膜上包被有HPV24 種亞型的檢測(cè)探針。如果擴(kuò)增產(chǎn)物中含有目的基因則能夠被芯片上的探針捕獲,再加入酶液和顯色液后在雜交膜的特定位置出現(xiàn)藍(lán)色的斑點(diǎn),可判斷出感染人乳頭瘤病毒核酸及感染的亞型。如果不含目的基因，則在特定的位置不會(huì)出現(xiàn)藍(lán)色斑點(diǎn)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS22.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)數(shù)資料采用 χ2檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn) α=0.05，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HPV 感染基因型分布情況 2194 例女性共檢出HPV 感染者621 例，感染率為 28.30%，各 HPV亞型之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=600.000，P＜0.05 )。單一感染、 雙重感染和多重感染分別占72.30%（449/621）、20.45%（127/621）和 7.25%（45/621），各種感染型別之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=486.521，P＜0.05），HPV 單一感染共 449 例，以高危亞型為主，占80.85%（363/449），感染率最高的 3 種亞型分別是52 型（25.60%）、16 型（16.43%）和 58 型（10.95%），見表1 和表2。

表1 HPV感染的各型別分布占比

2.2 不同年齡階段HPV 陽(yáng)性感染率比較 2194 例女性的年齡范圍在17~76 歲，年齡區(qū)間分為≤20歲、21~30 歲、31~40 歲、41~50 歲、50~60 歲和≥61歲年齡組,例數(shù)分別是 43、528、787、579、208 和 49例。HPV 陽(yáng)性率分別為 34.88%、30.87%、27.95%、24.01%、28.85%和48.98 %。各年齡組間感染率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=18.300，P＜0.05)。感染率最高的是≥61 歲年齡段，其次為≤20 歲年齡段,分別為48.98%和34.88%。各年齡組之間感染高危型、低危型和混合感染之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （χ2=7.090，P=0.717，P＞0.05）。見表3。

表2 HPV感染類型和陽(yáng)性構(gòu)成比

2.3 不同年齡段 HPV 基因型 52、16 和 58 的檢出情況，≤20 歲年齡段以16 型為主,感染率為11.63%，其他年齡段以52 型為主，感染率依次為8.52%、6.48%、5.70%、9.13%、14.29%，不同年齡組感染52、16 和 58 亞型之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （χ2=8.188，P=0.610，P＞0.05 ）。見表4。

表3 HPV感染各年齡組分布情況（n=2194)

表4 不同年齡組HPV基因型52,16 和58 的檢出情況

3 討論

HPV 是一種嗜上皮性DNA 病毒，主要感染區(qū)域有人類表皮的粘膜鱗狀上皮，該病毒只侵犯人類，對(duì)其他動(dòng)物無(wú)致病性。HPV 以通過(guò)性活動(dòng)傳播為主[5]。在全球性病傳播疾病中，HPV 的感染占15%~20%，75%的性活躍成人一生中皆感染過(guò)此病毒[6]。HPV 感染可引起人類惡性腫瘤和疣，生長(zhǎng)在生殖器官附近皮膚和黏膜上的尋常疣、 尖銳濕疣及生長(zhǎng)在黏膜上的乳頭狀瘤,并可發(fā)展為癌前病變及浸潤(rùn)性癌。

HPV 感染具有很強(qiáng)的地域性，我國(guó)地域遼闊，而各地經(jīng)濟(jì)發(fā)展水平和文化等各方面差異顯著。HPV 感染情況也不盡相同，據(jù)報(bào)道，我國(guó)女性人群宮頸HPV 感染率為25.0%, 不同地理區(qū)域的感染率差異較大（20%~34.6%），其中華東地區(qū)為25.2%[7]。本研究中，江西省宜春市婦女HPV 感染率為28.3%，略高于華東地區(qū)的平均水平，接近于孔令和等[8]報(bào)告的九江地區(qū)HPV 感染率為29.4%，明顯高于曾選[9]報(bào)告的南昌地區(qū)的20.94%。

本次調(diào)查結(jié)果顯示, 宜春地區(qū)HPV 感染以單一感染為主,占72.30%,排前三名的是52 型、16 型、58 型,與曾選[9]報(bào)導(dǎo)的南昌地區(qū)HPV 感染前三亞型一樣,以單一高危型感染為主。但與有些報(bào)道的結(jié)論以16 型感染為最常見的感染類型[10]不一致,但與報(bào)道中52 型、58 型近年來(lái)有上升趨勢(shì)[11]的情況一致。因此可以認(rèn)為52 型成為本地最新的流行亞型。說(shuō)明不同地區(qū)HPV 亞型的流行性存在一定的差異，可為流行病學(xué)研究提供基礎(chǔ)資料，也可根據(jù)地區(qū)差異，研發(fā)和選擇性的接種疫苗，降低宮頸癌的發(fā)病率。

本次研究HPV 感染各年齡段分布與大多數(shù)報(bào)道相似[12,13]，呈“U”型分布，主要表現(xiàn)為 20 歲以下和61 歲以上兩個(gè)年齡段女性相較于其他年齡段感染率較高，感染率最高的是≥61 歲，感染率為48.98%。≥61 歲年齡段患者由于機(jī)體免疫系統(tǒng)功能和體內(nèi)激素水平降低，陰道微環(huán)境的改變導(dǎo)致清潔能力下降，使病毒不利于自然清除[14]，還可能就是因?yàn)楸灸挲g段患者大多出現(xiàn)臨床癥狀，進(jìn)行針對(duì)性檢測(cè)，致使感染率偏高。筆者認(rèn)為年齡小而感染率高的可能原因是：性生活過(guò)早、過(guò)頻增加了女性生殖道黏膜機(jī)械性損傷和接觸HPV 的機(jī)會(huì)，為感染創(chuàng)造條件。

目前我國(guó)上市的HPV 疫苗有三種，分別為二價(jià)、四價(jià)和九價(jià)，分別對(duì)不同型別起到預(yù)防。二價(jià)疫苗預(yù)防HPV16、18 型感染；四價(jià)在二價(jià)的基礎(chǔ)上增加了HPV6、11 型抗原； 而九價(jià)在四價(jià)的基礎(chǔ)上增加了 HPV31、33、45、52、58 型抗原。我國(guó)高危型HPV 流行比較廣泛，據(jù)報(bào)道主要包括HPV16、58、52、18、33 幾種型別[15]，但本研究顯示，宜春地區(qū)高危型 HPV 感染前 6 位分別為 HPV52、HPV16、HPV58、HPV51、HPV53 和 HPV39，因此選擇九價(jià)疫苗對(duì)宮頸癌的一級(jí)預(yù)防較好,但九價(jià)疫苗也沒有包含本地區(qū)高感染率亞型前幾位，因此，對(duì)于HPV疫苗接種者依然推薦定期進(jìn)行宮頸癌篩查。

HPV 感染最常見的的結(jié)局是沒有明顯的臨床表現(xiàn)，絕大部分會(huì)被機(jī)體免疫力自動(dòng)清除。一般平均8~24 月可發(fā)生輕度、中度和重度的宮頸癌前病變，再平均5~10 年才可發(fā)生浸潤(rùn)癌，只有早查早治，是完全可以避免死于宮頸癌的。因此，對(duì)區(qū)域性HPV 分型和感染情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，明確地區(qū)性HPV 亞型分布特點(diǎn)，有利于制定具有針對(duì)性的篩查和防治措施，有利于推進(jìn)適用HPV 疫苗的研發(fā)和應(yīng)用，對(duì)預(yù)防和控制HPV 感染和宮頸癌的發(fā)生具有重要的指導(dǎo)意義。