硫酸沙丁胺醇吸入氣霧劑與藥用氣霧劑鋁瓶相容性研究

肖海文，黃潔瑕，雷春華，王明巧，林文輝，2△

（1. 廣東同德藥業有限公司，廣東 湛江 524018； 2. 國家中藥現代化工程技術研究中心嶺南藥用芳香油分中心，廣東 湛江 524018； 3. 湛江市明德醫藥科技有限公司，廣東 湛江 524018）

直接接觸藥品的包裝材料、容器也是藥品的一部分，尤其是在藥物制劑中，一些劑型本身就依附包裝而存在，如氣霧劑［1］。《中華人民共和國藥品管理法》［2］第四十六條規定：直接接觸藥品的包裝材料和容器，必須符合藥用要求，符合保障人體健康、安全的標準。藥品包裝材料的選擇對于確保藥品質量有重要作用，不適宜的包裝材料會引發藥物活性成分的遷移、吸附，甚至使其發生化學反應，導致藥物失效，有的還會導致嚴重不良反應。硫酸沙丁胺醇吸入氣霧劑臨床主要用于緩解哮喘或慢性阻塞性肺疾病（可逆性氣道阻塞疾病）支氣管痙攣，以及急性預防運動誘發的哮喘，或其他過敏原誘發的支氣管痙攣。其由硫酸沙丁胺醇、無水乙醇、四氟乙烷、鋁瓶、定量閥門系統和噴射裝置組成，使用時借助拋射劑的壓力使內容物成霧狀噴出，吸入后發揮治療作用。本研究中通過提取和遷移規律研究［3－5］，考察了硫酸沙丁胺醇吸入氣霧劑與藥用氣霧劑鋁瓶的相容性。現報道如下。

1 儀器、試藥與藥品包裝材料

1.1 儀器

LC－20A 型高效液相色譜儀，配有AA－7000 型原子吸收分光光度計（日本島津公司）；JZ－401A 型精密烘箱（蘇州德瑞普烘箱制造有限公司）；F－1 型安全智能型反應高溫蒸煮鍋（杭州惠合機械設備有限公司）；LHH－150GSP 型藥品綜合穩定性試驗箱（上海一恒科學儀器有限公司）；MDS－6G 型微波消解罐（上海新儀微波化學科技有限公司）。

1.2 試藥

異丙醇、磷酸、三乙胺、30%雙氧水、甲醇、二氯甲烷均為分析純，四氫呋喃、乙腈均為色譜純；超純水由Milli－Q 超純水系統制備；濃硝酸（含量為65%，MP級）；乙炔（含量為99.9%）；氬氣（含量為99.999%）；抗氧劑168 對照品（批號為MKBVO020V，含量為98%），抗氧劑168 氧化物對照品（批號為7－YKZ－65－2，含量為100%），抗氧劑330 對照品（批號為C10028968，含量為99% ），抗氧劑1010 對照品（批號為MKBV3769V，含量為98%），抗氧劑1076 對照品（批號為MKBT6389V，含量為99%），抗氧劑2，6－二叔丁基對甲酚（BHT）對照品（批號為BCBK4892V，含量為99%），均購自Sigma－Aldrich 公司；鋁標準液（質量濃度為1 000 μg／mL，批號為16070483），鉛標準液（質量濃度為1 000 μg／mL，批號為16071112），鋅標準液（質量濃度為1 000 μg／mL，批號為16062373），鋇標準液（質量濃度為1 000 μg／mL，批號為16060613），鉻標準液（質量濃度為1 000 μg／mL，批號為16072572），銅標準液（質量濃度為1 000 μg／mL，批號為16070173），鎘標準液（質量濃度為1 000 μg／mL，批號為16071912），錳標準液（質量濃度為1 000 μg／mL，批號為15110672），錫標準液（質量濃度為500 μg／mL，批號為16053013），鎳標準液（質量濃度為1 000 μg／mL，批號為201707003），均購自國家鋼鐵材料測試中心；硫酸沙丁胺醇吸入氣霧劑（廣東同德藥業有限公司，批號分別為20160201，20160202，20160301）。

1.3 藥品包裝材料

定量閥門（上海華瑞氣霧劑有限公司，批號為141107）；鋁 瓶（Presspart Manufacturing Ltd.，批 號 為PPB0009855）。

2 方法與結果

2.1 提取試驗

2.1.1 抗氧劑含量測定［6－9］

色譜條件：色譜柱為Symmetry C18柱（250 mm ×4.6 mm，5 μm）；流動相為水－四氫呋喃－乙腈（1 ∶3 ∶6，V／ V／ V）；流速為1.5 mL／min；檢測波長為280 nm（抗氧劑1010，1076，168，330，BHT），266 nm（抗氧劑168 氧化物）；進樣量為20 μL。

內墊圈、閥體、罩杯提取液制備：分別取內墊圈、閥體、罩杯各40 個，洗凈，用濾紙吸干，放入干燥錐形瓶中，分別加入20 mL 異丙醇，密封，置50 ℃烘箱中3 h，取出，放冷至室溫，作為內墊圈、閥體、罩杯提取液。

含量測定：取內墊圈、閥體、罩杯提取液，經0.45 μm微孔濾膜濾過，注入高效液相色譜儀，采用標準曲線法定量測定。結果見表1。美國產品質量研究學會（PQRI）推薦吸入制劑的界定閾值（QT）為5 μg／d。本品標示量為200 撳，每日最大使用劑量為8 撳，1 個閥體的質量為471.9 mg，1 個內墊圈的質量為79.3 mg，1 個罩杯的質量為448.7 mg。閥體的分析評價閾值（AET）估值為5（μg／d）÷8（撳／d）×200（撳／瓶）÷0.471 9（g／瓶）＝264.89 μg／g，提取試驗中采用20 mL 異丙醇提取40 個閥體，最終換算出閥體提取液中的AET 為250 μg／mL，按上述方法換算，內墊圈和罩杯提取液中的AET 均為250 μg／mL。閥體、罩杯和內墊圈提取液中的抗氧劑1010、1076、168、168 氧化物、330 和BHT 的檢出量均低于相應AET，未產生安全性風險。

表1 內墊圈、閥體、罩杯提取液中抗氧劑含量測定結果（μg／mL）Tab.1 Content determination of antioxidant in the extracts of inner gasket，valve body and cup（μg／mL）

2.1.2 金屬元素含量測定

1）金屬元素測定溶液制備

閥體、罩杯材料金屬元素含量測定供試品溶液：取閥體和罩杯各0.2 g，置消解罐中，加入適量硝酸與過氧化氫（4 ∶1，V／ V）的混合溶液，預消解后蓋緊消解罐上蓋，置微波消解儀中，程序升溫至195 ℃保持60 min，降溫冷卻后，開蓋趕酸至消解液剩1 mL，冷卻后轉移定容至50 mL 容量瓶中，用超純水沖洗消解罐，一并轉移入容量瓶中，用超純水稀釋至刻度，即得。

鋁瓶提取液：取鋁瓶，加入磷酸－三乙胺緩沖液（pH 3.5）13 mL，密封，置50 ℃烘箱中3 h，取出，放冷至室溫，即得。

閥芯、彈簧、內墊圈、閥體、罩杯提取液：分別取閥芯、彈簧、內墊圈、閥體、罩杯各40 個，洗凈，用濾紙吸干，放入干燥錐形瓶中，分別加入磷酸－三乙胺緩沖液（pH 3.5）20 mL，密封，置50 ℃烘箱中3 h，取出，放冷至室溫，即得。

2）含量測定

取上述提取液，照原子吸收分光光度法［10］41，［11］測定鋁、鉛、鋅、鋇、鉻、銅、鎘、錳、錫、鎳元素的含量。結果見表2至表4。ICH Q3D Guideline for Elemental Impurities［12］規定，吸入途徑下，鉛的人每日允許最大暴露量（PDE）為5 μg／d，鋇的PDE 為300 μg ／ d，鉻的PDE 為3 μg ／ d，銅的PDE 為30 μg／d，鎘的PDE 為2 μg／d，錫的PDE為60 μg／d，鎳的PDE 為5 μg／d。最終換算出的閥體提取液中鉛的AET 為250 μg／mL，1 個閥芯的質量約為137.2 mg，按2.1.1 項下方法進行換算，最終換算結果見表3。1 個鋁瓶的質量為5 058.6 mg，鋁瓶提取液中鉛的AET 估值 為5（μg／d）÷8（撳／d）×200（撳／瓶）÷5.058 6（g／瓶）＝24.71 μg／g，提取試驗中采用13 mL酸性緩沖液提取1 個鋁瓶，最終換算出鋁瓶提取液中鉛的AET 為9.6 μg／mL。按上述方法進行換算，最終換算結果見表4。可見，閥體、罩杯、彈簧、閥芯、內墊圈、鋁瓶提取液中的鉛、鋇、鉻、銅、鎘、錫、鎳元素的檢出量均低于相應AET，未產生安全性風險。

表2 閥體、罩杯材料中金屬元素含量測定結果（μg／g）Tab.2 Content determination of metal elements in materials of valve body and cup（μg／g）

表3 提取液金屬元素含量測定結果Tab.3 Content determination of metal elements in the extracts

2.2 遷移試驗

2.2.1 抗氧劑含量測定

色譜條件：同2.1.1 項下。

硫酸沙丁胺醇吸入氣霧劑供試液制備：取硫酸沙丁胺醇吸入氣霧劑樣品，棄去拋射劑，將藥液倒出，用超純水將鋁瓶內、鋁蓋和閥門等部件上殘留藥液洗出，合并藥液，置25 mL 容量瓶中，用超純水定容至刻度，即得。

抗氧劑固相萃取程序：固相萃取柱使用前分別用3 mL 甲醇和3 mL 水活化，取上述經前處理過的硫酸沙丁胺醇吸入氣霧劑供試液25 mL，以1.5 ～2.0 mL／min的流速通過固相萃取柱，隨后用5 mL 超純水淋洗，揮干，分別用5 mL 甲醇、3 mL 二氯甲烷依次洗脫，收集洗液，用甲醇稀釋至10 mL。

含量測定：取3 批（批號分別為20160201，20160202，20160301）硫酸沙丁胺醇吸入氣霧劑樣品，按不同試驗條件（0 個月、加速試驗［10］354－3563 個月、加速試驗6 個月）進行測定，按供試品前處理方法處理樣品，再按抗氧劑固相萃取程序進行操作，將抗氧劑1010、330、1076、168、168 氧化物及BHT 對照液及供試液進樣測定。結果見表5。抗氧劑遷移物的AET ＝5（μg／d）÷8（撳／d）×200（撳／瓶）＝125 μg／瓶。在遷移階段，硫酸沙丁胺醇吸入氣霧劑0 個月、加速試驗3 個月、加速試驗6 個月樣品的浸出物抗氧劑1010、1076、168、168 氧化物、330、BHT 的濃度均低于相應AET，未產生安全性風險。

表5 抗氧劑在硫酸沙丁胺醇吸入氣霧劑中遷移試驗含量測定結果（μg／瓶）Tab.5 Content determination of antioxidant in salbutamol sulfate inhalation aerosol in the migration test（μg／bottle）

表6 金屬元素在硫酸沙丁胺醇吸入氣霧劑不同試驗條件下遷移試驗含量測定結果（μg／瓶）Tab.6 Content determination of metal elements in salbutamol sulfate inhalation aerosol in the migration test with different test conditions（μg／bottle）

2.2.2 金屬元素在藥液中的遷移試驗

供試液制備：硫酸沙丁胺醇吸入氣霧劑棄去拋射劑，將藥液倒出，用超純水將鋁瓶內、鋁蓋和閥門等部件上殘留藥液洗出，合并藥液，用水定容至25 mL 容量瓶中，即得。

含量測定：照原子吸收分光光度法［4］，［10］41，［13－14］測定鋁、鉛、鋇、鉻、銅、鎘、錳、錫、鋅、鎳元素的含量。結果見表6。金屬元素遷移物的AET ＝PDE（μg／d）÷8（撳／d）×200（撳／瓶）。硫酸沙丁胺醇吸入氣霧劑0 個月、加速試驗3 個月、加速試驗6 個月樣品的浸出物中鉛、鋇、鉻、銅、鎘、錫、鎳元素的含量均低于相應AET，未產生安全性風險。

3 討論

提取試驗針對藥用氣霧劑鋁瓶和閥門部件的實際包裝、生產工藝條件和貯存條件等，以盡可能模擬生產、運輸、貯存和使用最差條件，考察了抗氧劑和金屬元素在3 批硫酸沙丁胺醇吸入氣霧劑中的遷移情況。藥用氣霧劑鋁瓶由閥門部件和鋁瓶組成，其中，閥門部件由閥芯（聚甲醛）、閥體（聚乙烯）、彈簧、內墊圈（氯化丁基橡膠）和罩杯（聚乙烯）組成。本研究僅針對直接接觸藥液的包裝組件材料即鋁罐、閥芯、閥體、彈簧、內墊圈和罩杯進行研究。抗氧劑168 結構為亞磷酸鹽，易被氧化，在樣品處理過程中會被氧化，故本試驗中對磷酸鹽和亞磷酸鹽分別進行定量。