阿托伐他汀治療頸動脈粥樣硬化療效與基質金屬蛋白酶－3基因多態性的相關性*

吳仕平，劉 青

（四川省遂寧市中心醫院老年醫學科，四川 遂寧 629000）

動脈粥樣硬化斑塊穩定性的降低及破裂出血風險的增加與基質金屬蛋白酶3（MMP－3）水平關系密切［1－2］。WILSON 等［3］的研究表明，他汀類藥物可降低患者的MMP－3 水平。MMP－3 基因位點呈多態性，目前他汀類藥物對不同MMP－3 基因型患者的作用有無差異、不同MMP－3 基因型動脈粥樣硬化患者經他汀類藥物治療后療效是否存在差異鮮有報道。本研究中探討了MMP－3 基因多態性與他汀類藥物治療動脈粥樣硬化療效的相關性，為動脈粥樣硬化性心血管疾病臨床治療策略的選擇提供參考。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

納入標準：隨機選取我院2018 年1 月至12 月就診并經彩色多普勒超聲檢查發現頸動脈斑塊的患者54例，男28 例，女26 例；平均年齡（65.32±8.04）歲。本研究通過四川省遂寧市中心醫院醫學倫理委員會審批，患者或家屬均知曉研究方案并簽署知情同意書。

排除標準：嚴重肝、腎功能不全；甲狀腺疾病；惡性腫瘤；既往他汀類藥物使用史。

1.2 方法

所有患者在改善生活方式的基礎上，均口服阿托伐他汀鈣片［商品名立普妥，輝瑞制藥有限公司，國藥準字H20051408，規格為每片20 mg（按C33H35FNO2O5計）］20 mg，每晚1 次。治療期間密切監測肝功能、肌酶學等指標，若出現達到停藥標準的藥品不良反應，則停藥并退出研究。所有患者均隨訪1 年。

1.3 觀察指標

于初診時、治療6 個月后、治療12 個月后，檢測血脂和頸動脈斑塊積分。采集空腹靜脈血，檢測血脂［總膽固 醇（TC）、三 酰 甘 油（TG）、低 密 度 脂 蛋 白 膽 固 醇（LDL－C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL－C）］。采用Philips IU22 型彩色多普勒超聲診斷儀，檢查雙側頸動脈內中膜厚度（IMT），將IMT≥1.1 mm 處定義為斑塊形成，同側頸動脈孤立性斑塊的最大厚度相加得到該側頸動脈斑塊積分，兩側斑塊積分相加得到斑塊總積分［4］。

1.4 MMP－3 啟動子區域－1612 位點5A16A（MMP－3 1612 5A16A）基因多態性檢測

初診時采集靜脈血，采用聚合酶鏈反應（PCR）－限制性片段長度多態性（RFLP）分析進行基因多態性檢測。使用MassARRAY Assay Design 3.0 軟件設計基因特異性PCR 和檢測引物。樣品DNA 通過位于目標序列旁的引物進行擴增，然后進行去磷酸化和等位基因特異性引物延伸。純化延伸產物，裝入384 格式的Spectro－Chip中，并進行基質輔助激光電離飛行時間質譜（MALDITOF－MS）分析。采用Sequenom Mass－ARRAY TYPER軟件（Sequenom）分析所得數據。

1.5 MMP－3 檢測

采集初診時、治療6 個月后、治療12 個月后的靜脈血，以酶聯免疫吸附（ELISA）法測定MMP－3 含量，MMP－3 活性分析試劑盒購于Biovison 公司。

1.6 統計學處理

2 結果

2.1 MMP－3 1612 5A／6A 基因型分布特點

54 例患者中，6A／6A 20 例（37.04%），5A／6A 21 例（38.89%），5A／5A 13 例（24.07%），基因型分布比較，差異無統計學意義（χ2＝0.573，P ＝0.946）。

2.2 一般資料

3 組基因型患者一般資料比較，均無顯著差異（P ＞0.05）。詳見表1。

表1 3 組基因型患者一般資料比較Tab.1 Comparison of the general data of patients with different genotypes among the three groups

2.3 血脂、MMP－3 水平及頸動脈斑塊積分變化

結果見表2 至表4。

3 討論

不穩定動脈粥樣硬化斑塊會增加不良心血管事件發生的風險［5－6］。他汀類藥物通過調脂、抗炎、抗凋亡等機制抑制動脈粥樣硬化斑塊的形成，穩定易損斑塊，從而減少心血管事件的發生［7－8］。既往研究提示，MMP－3 可加速動脈粥樣硬化進展、促進動脈粥樣硬化相關心血管疾病發生［9－10］。阿托伐他汀可降低急性腦梗死患者的血清MMP－3 水平、改善其生活質量［11］。降低MMP－3 水平或許是他汀類藥物治療動脈粥樣硬化及相關心血管疾病的新靶點，但他汀類藥物對不同MMP－3 基因型動脈粥樣硬化患者MMP－3 水平的影響是否一致，目前的研究較少。如果動脈粥樣硬化患者MMP－3 的基因型會影響他汀類藥物的作用，則對需要長期他汀類藥物治療的動脈粥樣硬化及相關心血管疾病患者進行MMP－3 1612 5A／6A 基因多態性檢測就非常必要，其檢測結果可以預測他汀類藥物的療效，以及指導臨床醫師及時調整治療方案。

表2 治療前后各組血脂水平比較（ ± s，mmol／L）Tab.2 Comparison of blood lipid levels in each group before and after treatment（ ± s，mmol／L）

表2 治療前后各組血脂水平比較（ ± s，mmol／L）Tab.2 Comparison of blood lipid levels in each group before and after treatment（ ± s，mmol／L）

注：與初診時比較，a P ＜0.05，b P ＜0.01；與治療6 個月后比較，c P ＜0.05，d P ＜0.01。Note：Compared with those at the time of initial diagnosis，a P ＜0.05，b P ＜0.01；compared with that after six months of the treatment，c P ＜0.05，d P ＜0.01.

指標TC TG LDL－C HDL－C基因型6A／6A 5A／6A 5A／5A 6A／6A 5A／6A 5A／5A 6A／6A 5A／6A 5A／5A 6A／6A 5A／6A 5A／5A初診時5.91±0.70 5.92±0.45 5.93±0.12 1.92±0.63 1.89±0.42 1.94±0.65 3.68±0.36 3.95±0.72 3.82±0.46 1.32±0.47 1.25±0.62 1.21±0.72治療6 個月后4.88±0.29a 4.93±0.20a 4.95±0.25a 1.64±0.73 1.62±0.33 1.63±0.26 3.26±0.43 3.31±0.46 3.36±0.82 1.59±0.36 1.56±0.72 1.58±0.84治療12 個月后3.79±0.36bc 3.92±0.41bc 3.89±0.83bc 1.37±0.73a 1.42±0.33a 1.33±0.26a 2.36±0.43bd 2.56±0.46bd 2.42±0.82bd 1.60±0.36a 1.63±0.72a 1.64±0.84a

表3 治療前后各組MMP－3 水平比較（ ± s，ng／mL）Tab.3 Comparison of MMP－3 levels in each group before and after treatment（ ± s，ng／mL）

表3 治療前后各組MMP－3 水平比較（ ± s，ng／mL）Tab.3 Comparison of MMP－3 levels in each group before and after treatment（ ± s，ng／mL）

注：與初診時比較，a P ＜0.05，b P ＜0.01；與5A／5A 基因型比較，e P ＜0.05。表4 同。Note：Compared with those at the time of initial diagnosis，a P ＜ 0.05，b P ＜ 0.01；compared with those in patients with 5A／5A genotype，e P ＜0.05；as well as Tab.4.

基因型6A／6A（n ＝20）5A／6A（n ＝21）5A／5A（n ＝13）初診時250.89±40.66 251.23±40.63 250.73±40.92治療6 個月后233.27±53.41a 227.38±46.98a 233.01±48.62a治療12 個月后194.39±51.27be 179.62±36.45be 148.29±19.58b

表4 治療前后各組頸動脈斑塊積分比較（ ± s，分）Tab.4 Comparison of carotid plaque scores in each group before and after treatment（ ± s，point）

表4 治療前后各組頸動脈斑塊積分比較（ ± s，分）Tab.4 Comparison of carotid plaque scores in each group before and after treatment（ ± s，point）

治療12 個月后2.79±0.61be 2.85±0.70be 2.39±0.47b基因型6A／6A（n ＝20）5A／6A（n ＝21）5A／5A（n ＝13）初診時3.89±1.16 3.75±1.09 3.80±1.11治療6 個月后3.09±0.95a 3.20±0.83a 2.94±0.58a

頸動脈粥樣硬化程度可以反映個體全身動脈粥樣硬化的狀況，頸動脈彩超是臨床頸動脈病變檢查、評估的常用手段。本研究結果顯示，不同類型MMP－3 基因型患者的頸動脈粥樣硬化經阿托伐他汀治療6 個月、12個月后，頸動脈斑塊積分均顯著降低，且隨著治療時間的延長，斑塊積分降低趨勢更明顯；治療12 個月后，5A／5A 基因型患者頸動脈斑塊積分低于6A／6A 及5A／6A 基因型患者。結果表明，阿托伐他汀治療不同類型MMP－3 基因型頸動脈粥樣硬化均可取得明顯療效，治療時間越長，療效越好，MMP－3 1612 5A／5A 基因型頸動脈粥樣硬化患者對阿托伐他汀治療可能更敏感。

血脂異常與動脈粥樣硬化間存在因果關系。他汀類藥物通過抑制體內膽固醇合成，促進細胞表面的低密度脂蛋白受體合成而調節體內血脂水平［12］。他汀類藥物主要通過降低TC 和LDL－C，抑制動脈粥樣硬化的進展［13］，降低心血管惡性事件的發生。本研究結果顯示，不同MMP－3 基因型患者經阿托伐他汀治療后，血清TC，TG，LDL－C 均下降，HDL－C 升高，且隨治療時間的延長，這種下降或上升趨勢更明顯，表明阿托伐他汀可調節不同MMP－3 基因型頸動脈粥樣硬化患者的血脂水平，且調脂作用強弱與服藥時間成正相關。治療12 個月后，5A／5A 基因型患者頸動脈斑塊積分低于6A／6A及5A ／6A 基因型患者，提示其除有改善動脈粥樣硬化的作用外，還有調脂的其他效應。治療12 個月后，5A／5A 基因型患者MMP－3 的水平明顯低于6A／6A 及5A／6A 基因型患者，提示阿托伐他汀除了能通過調脂作用抑制動脈粥樣硬化外，還可進一步降低5A／5A 基因型患者的MMP－3 水平，改善動脈粥樣硬化。

但本研究中樣本量偏少，觀察時間較短，有待多中心、延長隨訪時間進一步研究證實。