高效液相色譜法測定面膜中熒光增白劑CXT

張春芳，李子謙，汪 寧

（黑龍江工業學院 資源工程學院，黑龍江雞西 158100）

熒光增白劑是一種熒光染料，又稱為白色染料，也是一種復雜的有機化合物。它的特性是能激發入射光線產生熒光，使所染物質獲得類似螢石的閃閃發光的效應，即熒光增白劑將不可見的紫外光轉換為可見的熒光從而使肉眼看到的物質變白[1]。目前有諸多學者對于熒光增白劑的危害性毒理性進行實驗研究，如熒光增白劑致倉鼠卵巢細胞微核形成與基因突變研究[2]等。熒光增白劑使用較廣，適用在洗滌劑、紡織、紙張、塑料及防偽印刷、熒光探測等領域。

面膜是護膚品的一個類別，常用于皮膚補水，也具有保濕、滋潤、營養、改善外觀、深層清潔等多種功能。面膜可按其對面部皮膚的功效、適用面部皮膚類型、面膜的形式等進行分類，有些種類面膜有效使用后，可清潔美白提亮面部皮膚顏色，正因為這種清潔美白的功效，使得部分消費者對美白面膜青睞有加，市場需求量大，一些不法商家向面膜中添加熒光增白劑達到美白效果。

目前，紙張、蘑菇、面粉、洗滌用品等各類樣品中熒光增白劑的檢測方法有分光光度法、紫外燈照射法、高效液相色譜法等。如高效液相色譜法測定棉織物中種熒光增白劑[3]、反向毛細管電泳-激光誘導熒光快速分析面粉中的熒光增白 劑[4]、微波萃取高效液相色譜法測定塑料中熒光增白劑[5]。本文通過Agilent 1200液相色譜儀，以面膜中可能違禁添加的熒光增白劑CXT為檢測對象，建立分析測定方法，該方法操作簡單，可行性高。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

Agilent 1200液相色譜儀，Agilent Zorbax Eclipse 300SBC18色譜柱，G1321A熒光檢測器，KQ-700DB型超聲波清洗器，0.22μm濾膜；超純水，乙醇，乙腈；熒光增白劑CXT，化學式C40H38N12O8S2Na2，使用過程中較少量就可達到顯著的著色力及增白提亮效果，在產品中不容易遷移穩定性高，色調為微青色；實驗用面膜通過網絡平臺統一采購。

1.2 色譜條件

本實驗需要確定的高效液相色譜條件包括流動相種類、流動相比例、流速、熒光增白劑CXT激發波長與發射波長、色譜柱類型、實驗色譜柱溫度等。其中，流動相選擇包括水、乙腈、甲醇，實驗確定最佳流動相為乙腈/水；乙腈與水的比例滿足100%條件下，調整乙腈溶液比例由5%至90%過程中，當乙腈溶液配比為60%時目標分離效果佳峰形尖銳，流動相流速0.8mL/min滿足實驗要求；熒光增白劑CXT用150mm和250mm兩種類型色譜柱進行分離實驗，參數為（150×4.6mm，5μm）柱子溫度設置為25℃可在1.4min內將熒光增白劑CXT很好分離；過程中Em=430nm，Ex=350nm，進樣量10μL。

1.3 陽性樣品制備

黑暗條件下，熒光增白劑CXT在紫外光燈照射下會產生可見熒光，實驗過程中所需要的陽性面膜樣品均參照此方法制得。陽性樣品制備過程中嚴格控制黑暗條件，確保無光以防影響熒光判斷，保證室內溫度和濕度恒定。用于制備陽性面膜樣品的大小統一，每份陽性面膜樣品制備時，為排除其他實驗干擾因素，均需要同時制備3份相同樣品。

2 結果與討論

2.1 熒光增白劑CXT色譜圖

根據高效液相色譜條件繪制熒光增白劑CXT色譜圖如圖1所示，此圖是被測面膜樣品中是否含有熒光增白劑CXT定性分析的依據，應用此方法檢測面膜樣品，若得到的色譜圖中在保留時間為1.4min處有色譜峰出現，則所檢測面膜樣品中含有熒光增白劑CXT。配制多個標準CXT濃度，確定標準曲線為Y=111.9X-25.8，R2=0.998符合面膜分析實驗 要求。

圖1 熒光增白劑CXT高效液相色譜圖

2.2 固-液比

面膜樣品質量與熒光增白劑CXT提取溶劑用量關系即為本實驗固-液比，固相以1g面膜為標準質量，液相乙醇/水（體積比為1∶2）溶液變化由15mL至30mL，固相與液相不同配比下得到的熒光增白劑CXT回收量如圖2所示。圖中A為液相15mL、B為液相20mL、C為液相25mL、D為液相30mL，從圖中可直觀看出當液相為25mL和30mL時，回收率最大，所以固液比為面膜1g-乙醇水溶液25mL。

圖2 提取效果對比

2.3 超聲溫度

對于熒光增白劑CXT的分析，既要考慮色譜分離時的溫度，又要考慮面膜樣品前處理過程時的溫度，超聲條件下得到回收量如圖3所示，可知溫度的高低對面膜樣品中CXT的提取影響較大，當超聲溫度為30℃時效果最好。

圖3 不同溫度的提取效果對比

圖4 不同時間的提取效果對比

2.4 超聲時間

設置時間為10～40min，超聲條件下時間變化量得到回收量如圖4所示，可知時間也是影響面膜樣品中CXT提取率的重要因素，當時間為20min時效果最好。

2.5 加標回收率及精密度

在0.50～10.0μg/mL濃度范圍內按實驗要求選3個水平進行添加熒光增白劑實驗，得加標回收率和精密度數見表1。精密度2.9%～4.3%，回收率81.0%～88.3%，兩相指標的實驗數據均滿足樣品分析要求，該方法有較好的重現性和準確性。

表1 加標回收率及精密度

3 結論

本方法前處理采用乙醇水溶液為提取劑，超聲提取熒光增白劑，操作簡單，試劑易得，方法學數據合理，在檢測面膜樣品中可能添加的熒光增白劑CXT應用上有參考性。