尿液NGAL，Kim-1及CTGF水平與糖尿病早期腎損傷的相關性研究

何曉一,劉彥君,龐曉寧,梁君蓉

(中國人民解放軍聯勤保障部隊第九八七醫院 a.內分泌科;b.消化內科,陜西寶雞 721000)

糖尿病是中老年常見病，調查發現糖尿病發病率呈加速增長趨勢[1]。隨著糖尿病進展，可累及心血管、腎臟等其他組織器官，糖尿病早期腎損傷多因微血管病變引起，可造成終末期腎病等嚴重后果。保守治療對延緩病情具有重要價值，但對于已發生腎小球硬化或腎小管間質纖維化的患者，藥物治療已不能扭轉上述病變[2-3]。因而，如何早期預防糖尿病腎損傷成為臨床關注焦點。目前，尿清蛋白/肌酐比率（urinary microalbumin/creatinine ratio，UACR）是判斷早期腎損傷的依據[4]，但報道發現UACR 存在一定的假陰性結果[5]。有學者提出聯合檢測血清標記物可能有助于糖尿病早期腎損傷的篩查[6]，但有關聯合檢測的應用尚未形成規范性意見。本研究收集糖尿病患者尿液作為實驗標本，分析尿結締組織生長因子（connective tissue growth factor，CTGF）、尿中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白（urine neutrophil gelatinase-associated lipocalin,u-NGAL）和尿腎損傷分子1（kidney injury molecule-1，Kim-1）在判斷糖尿病早期腎損傷中的價值。報道如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象 收集2019年10月～2020年10月我院84 例糖尿病患者作為研究對象，根據UACR水平將84 例患者分為三組。其中UACR＜30mg/g者28 例，為糖尿病組。UACR 30～300mg/g 者30 例，為糖尿病早期腎損傷組。UACR ＞300mg/g 者26 例，為臨床糖尿病腎病組[7]。

納入標準：①糖尿病診斷參照2017 版指南標準[8]；②均在本院接受規范診療；③均簽署知情同意書。

排除標準：①并發有腎小球腎炎、腎病綜合性或其他可引起尿蛋白水平異常疾病；②并發泌尿系腫瘤者；③正在接受其他研究項目者。

1.2 儀器與試劑 采用艾美捷科技有限公司提供的u-NGAL，Kim-1 及CTGF 試劑盒進行試驗。

1.3 方法 在患者入院后1 周內連續3 天收集三組患者尿液，高速離心15min 后取上清液，冷凍保存送檢。u-NGAL，Kim-1 及CTGF 均采用酶聯免疫吸附法進行檢測，具體操作步驟按試劑盒說明進行。

1.4 統計學分析 選用SPSS 22.0 軟件，符合正態分布時，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，多組間比較行F 檢驗，兩組間比較行t檢驗，計數資料以頻數（頻率）表示，組間行χ2檢驗，采用Pearson 相關性分析，以受試者工作曲線（receiver operating characteristic，ROC）分析預測價值，以曲線下面積（area under curve，AUC）＞0.75 為預測價值高，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組u-NGAL，Kim-1 及CTGF 比較 見表1。糖尿病組、糖尿病早期腎損傷組及臨床糖尿病組患者u-NGAL，Kim-1 及CTGF 水平比較,差異有統計學意義（P＜0.05）。u-NGAL 和CTGF 兩兩比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。糖尿病早期腎損傷組與臨床糖尿病腎病組Kim-1 無顯著性差異（P＞0.05）。

表1 三組u-NGAL，Kim-1 及CTGF 比較（x±s）

2.2 u-NGAL，Kim-1 及CTGF 與UACR 相關性分析 見表2。Pearson 相關系數分析顯示，UACR 與u-NGAL 及CTGF 呈顯著正相關性（r=0.39，0.41；均P＜0.01），UACR 與Kim-1 無顯著相關性（r=0.13，P=0.21）。

表2 u-NGAL，Kim-1 及CTGF 判斷糖尿病早期腎損傷價值

2.3 u-NGAL，Kim-1 及CTGF 判斷早期腎損傷價值分析 以u-NGAL，Kim-1 及CTGF 作為檢驗變量，以是否發生糖尿病早期腎損傷為狀態變量，繪制ROC，見圖1。結果顯示u-NGAL，Kim-1及CTGF 聯合預測概率判斷早期腎損傷的AUC 為0.81（SE=0.05，95%CI=0.71～0.91，P=0.00）。聯合預測概率判斷腎損傷的AUC 顯著高于u-NGAL，Kim-1 及CTGF（Z=-2.817，-2.021，-1.972；P=0.00，0.01，0.03）。

圖1 u-NGAL，Kim-1 及CTGF 判斷糖尿病早期腎損傷的價值分析

3 討論

糖尿病腎損傷多因微血管病變引起，其早期隱匿性強，臨床常被忽視[9]。目前多數學者推薦UACR在30～300mg/g作為早期腎損傷的診斷標準，此階段患者具有持續微量清蛋白尿特點，而早期干預能有效緩解癥狀，部分患者甚至可能扭轉病情[10]。因而，本研究采用這一標準作為糖尿病早期腎損傷依據。Kim-1 為Ⅰ型跨膜糖蛋白。研究顯示，腎臟發生局部缺血性損傷時，Kim-1 可在金屬基質蛋白酶作用下發生裂解反應而被釋放，進入尿液[11]。因而，檢測尿Kim-1 水平可監測腎損傷的發生。本研究也顯示尿Kim-1 有助于判斷糖尿病早期腎損傷。但也有報道發現Kim-1 可能促進腎小管上皮細胞增殖和修復過程[12]。因而，在腎損傷發生后Kim-1與腎損傷程度無相關性。本文結果也發現早期腎損傷與臨床腎損傷患者Kim-1 水平無顯著性差異，且Kim-1 與UACR 無相關性，可能與此有關。

u-NGAL 為脂質運載蛋白lipocalin 家族成員，NGAL 能誘導腎小管中性粒細胞凋亡，并抑制炎癥反應[13]。詹頡等[14]還認為NGAL 可促進腎小管上皮細胞轉化和腎小管上皮細胞再生，抑制腎損傷。當糖尿病患者累及微血管，造成早期腎損傷時，持續的尿蛋白導致重吸收蛋白負荷增加，引起蛋白尿，并導致腎間質損傷[15]，使u-NGAL 應激性增加。因而，u-NGAL 對判斷早期腎損傷具有較高敏感度，本研究結果也證實這一點。陶青松等[16]還認為u-NGAL 水平有助于監測腎損傷病情，這與本研究結果一致。

CTGF 為轉化生長因子β 下游因子，能介導細胞增殖和黏附過程[17]。CTGF 通過促進腎小球系膜細胞外基質聚集，參與腎小球硬化和腎小管間質纖維化病變[18]。本研究也顯示尿CTGF水平與UACR呈顯著正相關性，通過抑制CTGF 有助于延緩腎損傷進展。趙雯紅等[19]還認為尿CTGF 判斷早期腎損傷風險的敏感度較腎小球濾過率更高。本研究采用ROC 進一步分析也顯示其敏感度達0.76，說明CTGF 可作為早期篩查糖尿病腎損傷的指標。而CTGF 與Kim-1，u-NGAL 聯合檢測判斷早期腎損傷的AUC 達0.86，高于其他單項指標檢測，說明CTGF 與Kim-1，u-NGAL 聯合檢測有助于提高預測早期腎損傷的價值。

綜上，CTGF 與Kim-1，u-NGAL 聯合檢測用于糖尿病患者，能提高早期腎損傷檢出率。