宮頸癌中腫瘤免疫細胞浸潤模式與預后價值分析

余志輝

（佛山市第五人民醫院，廣東 佛山 528211）

0 引言

本文研究中，采用CIBERSORT法對宮頸癌腫瘤樣本中免疫細胞類型比例進行分析，觀察探討宮頸癌中腫瘤免疫細胞浸潤模式與預后價值，現在總結如下。

1 資料及方法

1.1 采集數據。通過TCGA官網，即https：//protal.gdc.cancer.gov，下載TCGA-CESC基因表達數據與臨床數據，共納入238例宮頸癌腫瘤樣本，臨床數據涉及有年齡、分期、生存時間、病理學類型與存活狀態等。

1.2 腫瘤浸潤免疫細胞組成。采用CIBERSORT法，檢測22種腫瘤浸潤免疫細胞類型在每一個腫瘤組織中的相對分數，對于CIBERSORT算法，需在1000個排列中，通過LM22標記矩陣中進行計算。借助R軟件，運行CIBERSORT，經由CIBERSORT網站（https：//cibersort.stanford.edu）下載源代碼。其中，22種免疫細胞的類型如表1所示。

1.3 統計學處理。總生存率以診斷日期至死亡日期的時間間隔為準，采用Kaplan-Meier法生成生存曲線，通過Log-rank test法分析差異。Cox回歸分析法，評估免疫細胞的類型、基因表達水平和OS之間的關系。多因素Cox回歸分析，采用向后LR法予以觀察。通過Spearman的相關性與統計學意義評估基因表達以及與免疫細胞的相關性。采用SPSS 22.0以及GraphPad Prism 5法進行統計學分析，P＜0.05提示差異顯著，有統計學意義。

2 結果

2.1 臨床資料。238例宮頸癌患者，年齡24～87歲，平均（46.92±5.93）歲，121例年齡≤46歲，117例年齡＞46歲。分析組織學類型、臨床分期，如表2所示。

2.2 宮頸癌腫瘤浸潤免疫細胞。經分析發現，宮頸癌腫瘤浸潤免疫細胞中，巨噬細胞所占比例最高，其次是rδT細胞，嗜酸性粒細胞最低。如表3所示。

2.3 宮頸癌中免疫細胞類型和預后之間的關系。活化的CD4+記憶性T細胞高水平，和較長OS存在相關性（P=0.002）；未活化的CD4+記憶性T細胞高水平，和較短OS存在相關性（P=0.007）。活化的肥大細胞高水平，和較短OS存在相關性（P=0.004）；未活化的肥大細胞高水平，與較長OS存在相關性（P=0.018）。CD8+T細胞高水平，和較長OS存在相關性（P=0.006）。多因素Cox回歸分析，結果發現，對于免疫細胞，活化的CD4+記憶性T細胞以及活化的肥大細胞是宮頸癌預后的獨立因素（P=0.002；P=0.004），如表4所示。

表1 22種免疫細胞類型分析

表2 238例宮頸癌組織學類型以及臨床分期[n（%）]

表3 宮頸癌腫瘤浸潤免疫細胞的構成分析

表4 宮頸癌免疫細胞的多因素Cox回歸分析結果

2.4 免疫檢查點分子表達和免疫細胞浸潤水平關系及預后分析。數據分析發現，免疫檢查點分子表達和CD4+記憶性T細胞浸潤水平呈現出正相關關系（P＜0.001）；除了CD274，其余免疫檢查點分子表達和活化肥大細胞浸潤水平呈現出負相關關系（P＜0.001）。Cox regression單因素分析發現，PDCD1、ICOS以及CTLA4和宮頸癌的生存存在一定關系（P＜0.05）。多因素分析發現，ICOS是宮頸癌預后的獨立因素（P＜0.05），如表5所示。

表5 免疫檢查點分子多因素分析

3 討論

宮頸癌中95%是由于持續感染致癌人乳頭瘤病毒所致，控制病毒感染中，免疫系統的作用至關重要，故而為宮頸癌免疫治療提供可能性[1]。免疫檢查點療法，借助共抑制或者共刺激等信號，調節T細胞活性，提高抗腫瘤免疫反應，但這一療法總體反應率僅僅是17%～27%，治療成本高，存在潛在免疫相關毒性[2]。故此，尋找預測免疫治療療效的生物學標志，成為學者專家們探討的新課題之一。腫瘤浸潤免疫細胞，是腫瘤微環境的構成要素，和腫瘤細胞增殖、治療反應、預后存在關聯[3]。臨床上，關于腫瘤浸潤免疫細胞在宮頸癌中預后價值的研究并不多。其中，CIBERSORT，是借助標準化基因表達數據，評估免疫細胞組成的一種生物信息學方法[4]。CIBERSORT，通過反褶積算法，根據基因表達譜，對不同免疫細胞亞群相對比例進行評估，在一定程度上，可克服免疫組化法存在的缺陷與不足，適用于乳腺癌、腎癌、肺癌以及肝癌與結直腸癌等[5]。記憶性T細胞浸潤和多種腫瘤存在較好的預后關系，是新生物學標志。宮頸癌研究顯示，記憶性T細胞對白介素2、干擾素r以及腫瘤壞死因子，抑制腫瘤細胞增殖與遷移[6]。本研究表明，高水平活化CD4+記憶性T細胞和高生存率有關。肥大細胞，屬于先天免疫細胞，可調節宿主對癌癥所產生的反應，影響預后。肥大細胞和腫瘤預后之間的關系結果存在差異，不同腫瘤中表現不一。本研究顯示，活化的肥大細胞和較差預后有關，可能是因為被激活的肥大細胞分泌出系列因子，與免疫細胞、腫瘤細胞產生相互作用，形成免疫抑制環境，增強腫瘤細胞活性，預后欠佳。ICOS屬于T細胞特異性共刺激分子，其扮演著促癌與抑癌的雙重角色[7]。本研究中，ICOS高表達和宮頸癌預后良好有關，提示ICOS在宮頸癌中扮演抑癌角色。總之，宮頸癌中腫瘤免疫細胞浸潤與預后有關，需引起重視。