微住凝膠技術在新生兒ABO 溶血病檢測中的應用及結果分析

葉志達，唐炳娣

(1.廣東省惠州市第一婦幼保健院，廣東 惠州 516007；2.惠州市第三人民醫院，廣東 惠州 516007)

0 引言

新生兒溶血病(hemolytic disease of the new-born，HDN)是指母子血型不合所致的胎兒或新生兒免疫性溶血性疾病。主要是胎兒紅細胞(含有母親缺乏的父系遺傳抗原)經胎盤進入母體循環刺激母體產生免疫性抗體(主要為 IgG 類)[1]。是造成新生兒死亡、智力發育的主要疾病之一，一旦發病，可引起新生兒肝脾水腫、腫大、貧血、黃疸等一系列疾病，病情嚴重者可誘發膽紅素腦病，對新生兒健康構成嚴重危害。臨床中早期發現、早期診斷治療，是降低HDN 危害性的關鍵，對改善新生兒預后至關重要[2]。目前，臨床早期檢查HDN 方法較多，有研究指出，微住凝膠技術具備操作簡單、高準確度、高靈敏度等優點。本研究選取2019 年1 月至2020 年9 月共994例疑似新生兒溶血病(HDN)新生兒作為觀察對象，分析微住凝膠技術的價值，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

納入2019 年1 月至2020 年9 月共994 例疑似新生兒溶血病(HDN)新生兒作為觀察對象，其中男童534 例、女童460例，日齡均≤12d，其中≤3d 患兒522 例，3＜n≤7d 患兒368例，＞7d 患兒104 例。

1.2 方法

采集新生兒血液標本，進行常規離心處理，分離血清；新生兒抗凝全血標本使用生理鹽水洗滌3 次，配置0.5%-0.8%濃度紅細胞混懸液，剩余1mL 壓積紅細胞待用。

直接抗人球蛋白試驗：取1 張抗人球蛋白卡，將0.5%-0.8%紅細胞懸液50μL 加入孔中，離心觀察結果。

游離抗體試驗：標記抗人球蛋白卡實驗，分別將0.5%-0.8%紅細胞懸液50μL 加入ABO 孔，加入新生兒血清50μL，孵育15min，離心觀察結果。

釋放試驗：取大試管1 只，加入洗滌3 次的新生兒壓積紅細胞1mL，并加入1mL 生理鹽水，水浴10min，溫度56℃，同時振搖；離心2min，分離上清放散液備用。標記抗人球蛋白卡，分別將0.5%-0.8%紅細胞懸液50μL 加入ABO 孔，加入放散液50μL，孵育15min，離心觀察結果。若O 孔陽性，提示可釋放出ABO 以外抗體，另拿一張抗人球蛋白卡，并將抗體篩選細胞I、II、III 加入，對ABO 以外不規則抗體加入放散液50μL 篩選。

1.3 結果判讀

僅1 項游離試驗或直抗試驗陽性，判為“可疑為 HDN”；有2 項陽性或者釋放試驗單項陽性均為 HDN[3]。

1.4 統計學

將本次研究所得所有項目數據資料均納入SPSS 21.0軟件分析，t檢驗與χ2檢驗，P＜0.05 可認為有統計學意義，P＜0.01 有非常顯著性的差異。

2 結果

2.1 檢測結果分析

血清學檢驗顯示，994 例疑似HDN 新生兒中，確診為ABO-HDN 患兒共計559 例，確診率為56.24%；其中O/A 血型患兒264 例(59.06%)、O/B 血型患兒294 例(61.25%)。994例疑似病例中，直抗陽性1.21%、游離陽性52.31%、放散陽性56.24%。詳見表1。

表1 血清學檢測疑似新生兒ABO 溶血病患兒結果(%)

2.2 三項試驗檢測結果HDN 構成

對確診559 例ABO-HDN 患兒進行三項試驗檢測，結果顯示，游離試驗+放散試驗陽性占比最高85.69%，單項放散試驗陽性為12.16%，放散+游離+直抗陽性為2.15%。詳見表2。

表2 新生ABO-HDN 患兒三項實驗結果(%)

2.3 分析新生兒出生天數與ABO-HDN 陽性檢出關系

研究結果分析顯示，新生兒出生天數≤3d 新生兒ABOHDN 陽性檢出率最高，為63.98%；其次出生3＜n≤7d 新生兒ABO-HDN 陽性檢出率為50.54%，出生＞7d 新生兒ABOHDN 陽性檢出率37.50%，詳見表3。

表3 分析新生兒出生天數與ABO-HDN 陽性檢出關系(%)

3 討論

HDN 是在臨床上較為常見的免疫性疾病，主要因母嬰血型不合，造成母體IgG 抗體經胎盤進入胎兒體內，破壞胎兒紅細胞最終致病[4-5]。在新生兒HDN 病中，其他血型及Rh 血型等引起HDN 則相對較為少見，母嬰ABO 血型不符合最為常見。HDN 疾病危害性重大，可造成新生兒智力發育障礙，死亡等，對新生人口質量造成嚴重影響。因此，在臨床中采取敏感、可靠、有效的早期診斷、篩查方法，對HDN 及時發現，早期治療意義重大。

傳統試管法抗人球試驗是診斷HDN 的經典方法，但在早期診斷中仍然存在不足。探索一種快速、有效的方法尤為必要[6]。微住凝膠技術作為一項新的方法，該方法結合微住凝膠技術與傳統試管法抗人球試驗；該方法屬于免疫學檢查技術之一，在國外發達國家已得到廣發推廣，被用于常規紅細胞血型血清檢查；相比于傳統方法，微住凝膠技術能夠降低診斷誤差率，提高診斷特異性與敏感性，為臨床提供更為準確、科學的數據支持，在早期新生兒ABO-HDN 疑似病例診斷中具備獨特優勢[7-8]。

本研究對994 例疑似HDN 新生患兒應用微住凝膠技術檢查，結果顯示，確診為ABO-HDN 患兒共計559 例，確診率為56.24%；其中O/A 血型患兒264 例(59.06%)、O/B 血型患兒294 例(61.25%)，說明在新生兒ABO-HDN 疾病診斷中，微住凝膠技術具備良好的準確性。而研究顯示，游離試驗+放散試驗陽性占比最高85.69%，單項放散試驗陽性為12.16%，放散+游離+直抗陽性為2.15%，說明ABO-HDN 患兒中，三項實驗聯合檢測對HDN 診斷作用巨大，可進一步提高診斷準確率；結合膽紅素檢測結果，多方面綜合考慮分析，可進一步提高準確性[9]。

此外，本研究顯示，新生兒出生天數≤3d 新生兒ABOHDN 陽性檢出率最高，為63.98%，提示隨著新生兒出生天數延長，ABO-HDN 陽性檢出率下降；因此，在ABO-HDN 篩查中，應當在出生3d 內盡快檢查，以確保診斷準確率。

綜上，ABO-HDN 新生兒運用微住凝膠技術檢查，具備診斷準確率高，可為臨床提供科學、有效依據，值得推廣。