AFP及PIVKA-Ⅱ在HBV相關肝細胞癌中的臨床價值研究

高小堅，秦雪

（1.廣西醫科大學第一臨床醫學院，廣西 南寧 530000；2.廣西中醫藥大學附屬瑞康醫院檢驗科，廣西 南寧 530000）

0 引言

肝細胞癌 (hepatocellular carcinoma, HCC) 是原發性肝癌的主要病理類型, 是我國最常見的惡性腫瘤之一，在廣西地區乙型肝炎病毒感染是肝細胞癌發生的高危因素[1,2]。篩查肝細胞癌一般依靠影像學和病理學，但因影像學檢查敏感性低，病理活檢難度大有創傷性，增加了肝細胞癌早期篩查的困難。目前臨床上常用甲胎蛋白(AFP)和維生素K缺乏或拮抗劑誘導蛋白(PIVKA-Ⅱ)作為早期肝細胞癌的血清學生物篩查指標，但在乙型病毒感染相關的肝細胞癌中診斷價值研究較少，因此本研究旨在分析HBV相關肝病患者血清中甲胎蛋白(AFP)和維生素K缺乏或拮抗劑誘導蛋白(PIVKA-Ⅱ)的含量， 繪制單獨檢測的ROC曲線 ,再通過建立Logistic回歸模型并繪制ROC曲線評價聯合檢測AFP及PIVKA-Ⅱ的診斷價值。

1 材料與方法

1.1 入組資料

選擇2019年8月至2020年7月在廣西中醫藥大學附屬瑞康醫院確診為HBV相關肝病患者作為研究對象,入組標準如下: (1)入院后進行肝功能、乙肝肝炎病毒五項等實驗室檢查及B超、CT、MRI等影像學檢查,且病歷資料完整; (2)HBsAg陽性; (3)診斷依據《慢性乙型肝炎防治指南》（2019年版）[3]、《原發性肝癌診療規范》（2019年版）[4]等國家衛計委、國家中醫藥局發布或相關專業學會和臨床標準組織制定的最新診療指南; (4)排除膽汁性肝硬化和嚴重黃疸患者以及維生素K缺乏接受華法林治療的患者。共有165例患者入組并按HBV相關肝細胞癌組、HBV相關肝硬化組和慢性乙型肝炎組進行分組。該研究經廣西中醫藥大學附屬瑞康醫院倫理委員會批準。

1.2 方法

采集入組患者清晨空腹狀態下外周靜脈血3～4mL于干燥管內，常溫保存，2小時內送檢，由經過專業培訓的技術人員嚴格按照儀器操作說明書和試劑盒說明書進行操作和檢測。采用μTASWako i30 全自動電泳熒光免疫分析儀和AFP、PIVKA-Ⅱ檢測試劑盒（日本富士膠片和光純藥株式會社）進行檢測。

1.3 統計學處理

采用SPSS 26.0軟件進行統計分析。采用χ2檢驗比較三組患者性別和年齡的關系。PIVKA-Ⅱ、AFP用中位數/四分位數[M(P25～P75)]表示，多組之間比較采用 Kruskal-Wallis H 檢驗，兩兩比較用Mann-Whitney U檢驗。將PIVKA-Ⅱ、AFP作為自變量建立肝細胞癌診斷的 Logistic回歸模型。繪制單獨檢測和聯合檢測的ROC曲線，計算曲線下面積，分析診斷的敏感性和特異性。所有分析采用雙側檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 一般資料比較

HBV相關肝細胞癌組、HBV相關肝硬化組和慢性乙型肝炎組在年齡和性別的差異無統計學意義。( 見表1)

2.2 三組受檢者的血漿PIVKA、AFP檢測結果比較

HBV相關肝細胞癌組患者在血清PIVKA-Ⅱ和AFP的表達水平上顯著高于HBV相關肝硬化組及慢性乙型肝炎組，差異具有統計學意義(P＜0.05)，但HBV相關肝硬化組與慢性乙型肝炎組患者在PIVKA-Ⅱ和AFP水平上差異無統計學意義（P＞0.05），具體見表2。

表1 三組患者的基本資料

表2 三組PIVKA-Ⅱ、AFP的濃度比較

2.3 血清AFP和PIVKA-Ⅱ單獨及聯合檢測在HBV相關肝細胞癌中診斷性能的評價

使用SPSS繪制血清AFP和PIVKA-Ⅱ含量診斷HBV相關肝細胞癌的ROC曲線，單獨檢測時PIVKA-Ⅱ的曲線下面積（AUC）較大為0.974( 95%CI 0.949-1.000)，敏感度和特異度為94.7%和91.7%，AFP的AUC、敏感度、特異度分別為0.913(95%CI 0.861-0.964)、84.2%、90.7%。以是否為HBV相關肝細胞癌為因變量，PIVKA-Ⅱ、AFP檢測結果為自變量，建立Logistic回歸模型，繪制聯合診斷HBV相關肝細胞癌的ROC曲線，AUC為0.983(95%CI 0.962-1.000)，敏感度和特異度為93%和96.3%，優于血清AFP和PIVKA-Ⅱ單獨檢測模型，是診斷HBV相關肝細胞癌的最佳診斷模型。（見圖1和表3）

表3 PIVKA-Ⅱ、AFP及兩者聯合檢測對診斷HBV相關肝細胞癌的敏感度和特異度

圖1 PIVKA-Ⅱ、AFP及兩者聯合檢測對診斷HBV相關肝細胞癌的ROC曲線

3 討論

肝細胞癌，是原發于肝臟的上皮性惡性腫瘤，占原發性肝癌的90%以上，是目前我國最常見的腫瘤之一。在我國肝癌新發病例中，男性的比例是72.8%，這與本研究中男性患病比率高相同，男女性別在肝癌發病率中的差異原因考慮與男女體內激素與生活習慣的不同有關[5]。異常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)是一種在肝細胞合成過程中缺乏維生素K而導致合成缺陷的凝血酶原, 無凝血功能。肝細胞癌時,由于癌細胞對凝血酶原前體的合成發生異常，凝血酶原前體羧化不足, 生成大量的PIVKA-Ⅱ[6]，因此PIVKA-Ⅱ可作為輔助診斷肝細胞癌的腫瘤標志物,其與AFP的聯合檢測目前已廣泛應用于臨床。

在本研究中，HBV相關肝細胞癌、肝硬化組和慢性乙型肝炎組之間的男女比例和年齡構成無統計學差異，研究的各項指標具有可比性。本研究顯示，血清PIVKA-Ⅱ、AFP含量在肝細胞癌組明顯高于肝硬化組和慢性肝炎組，但在HBV相關肝硬化組和慢性乙型肝炎組之間沒有明顯差異，表明PIVKA-Ⅱ、AFP在HBV相關肝細胞癌中均有較高的診斷價值。根據ROC曲線分析，PIVKA-Ⅱ、AFP取截斷值34 mAU /mL和29.84 ng/mL時，AFP診斷HBV相關肝細胞癌的敏感度和特異度分別為84.2%、90.7%，PIVKA-Ⅱ的敏感度和特異度為94.7%和91.7%，聯合檢測的敏感度和特異度為93%和96.3%，單獨檢測時，PIVKA-Ⅱ的診斷性能優于AFP，聯合檢測可以提高特異度，這與Li[7]等的研究一致，而Wu[8]的研究也顯示PIVKA-II在診斷早期HCC方面比AFP更有效。分析單獨和聯合檢測的曲線下面積AUC ：PIVKA-Ⅱ+AFP ＞PIVKA-Ⅱ＞AFP，聯合檢 測PIVKA-Ⅱ和AFP對HBV相關肝細胞癌的總體診斷性能最佳，而Yang[9]的研究也表明，與單獨使用AFP或PIVKA-II相比，PIVKA-II和AFP的組合在將HBV相關肝細胞癌患者與慢性乙型肝炎或HBV相關肝硬化患者區分開時顯示出更高的診斷準確性。

綜上所述，PIVKA和AFP在區分HBV相關肝細胞癌和HBV相關非肝細胞癌之間有重大意義，單獨檢測時，PIVKA在診斷HBV相關肝細胞癌上優于AFP，聯合檢測可提高診斷特異性且總體診斷性能最佳。因本實驗納入的研究對象較少，且有轉移和復發病例，今后還需擴大實驗例數，結合臨床特征

以進一步探討，為HCC的早期發現提供更可靠的依據。