2397例不同產前診斷指征的羊水細胞染色體核型分析

黃如純，皮回春，吳曼禎，高玉山，吳麗萍

（深圳市龍崗區婦幼保健院 產前診斷中心，廣東 深圳 518172）

0 引言

染色體核型出現異常會導致出現染色體疾病，在我國新生兒中發生率約0.5%～0.7%[1]，是一種較為常見的遺傳學疾病，可導致流產、死胎或結構、功能異常等，當前對于該疾病的治療并沒有徹底治愈的方式，孕婦年齡結合NT、血清學篩查、NIPT及胎兒超聲檢查是常見的產前篩查方法，羊膜腔穿刺術是一種較為常見的產前診斷技術，目前進行產前診斷胎兒染色體異常的金標準為羊水細胞胎兒染色體核型分析[2]。本文總結了不同產前診斷指征在我中心行羊水細胞培養的2397例孕婦的染色體核型結果，分析不同的產前診斷指征的孕婦羊水細胞染色體核型，研究產前診斷指征和胎兒染色體異常核型的關系。為產前篩查、產前診斷及產前咨詢提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料。試驗選取2016年1月至2019年12月之間在我院進行就診的不同產前診斷指征孕婦作為試驗對象，共計選取2397例孕婦，年齡17～46歲，懷孕時間16～31周。根據不同的產前診斷指征進行分組：單純高齡組；血清學篩查高風險組；胎兒超聲異常組；NIPT檢測結果異常組；不良孕產史組（復發性流產史、死胎、畸胎引產史或生育過出生缺陷兒病史等）；夫妻一方為染色體異常攜帶者。參與實驗所有產婦均沒有介入行產前診斷禁忌證，并均知情統一且簽訂知情同意書。

1.2 方法。在超聲引導下經腹抽取羊水20 mL，常規方法進行G顯帶染色體核型分析，每例標本采用Leica SL120 全自動核型掃描儀掃描100個分裂相，選擇長短合適并且分散較為良好的核型計數20個，分析5個，嵌合體及異常核型加倍計數至100個。核型診斷標準依據2009年人類細胞遺傳學國際命名體系（ISCN2009）。

1.3 統計學分析。運用SPSS 23.0統計軟件進行統計學分析，采用卡方檢驗與Fisher精確概率法，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 染色體異常核型在不同產前診斷指征中的檢出情況。2397例產前診斷的羊水標本中，產前診斷指征分布由高到低為：血清學篩查高風險（42.76%，1025/2397）、NIPT檢測結果異常23.86%（572/2397）、超聲檢查異常15.56%（373/2397）、單純高齡15.56%（304/2397）、不良生育史4.59%（110/2397）、夫妻一方染色體異常0.54%（13/2397），共檢出染色體異常核型232例，檢出率為9.65%。不同產前診斷指征的染色體異常核型檢出率由高到低依次為：NIPT檢測結果異常27.8%（159/572）、夫妻一方染色體異常15.38%（2/13）、胎兒超聲異常5.36%（20/373）、血清學篩查高風險4.2%（43/1025）、不良生育史2.73%（3/110）、單純高齡1.64%（5/304），對比分析各個組別之間的異常染色體檢出率差異有統計學意義（χ2=257.03，P＜0.001）。

2.2 染色體異常核型分布情況。在232例異常染色體核型當中常染色體數目異常為119例，以21三體為主，占數目異常的40.95%（95/232），其中性染色體數目異常有56例，48，XXY，+21為1例，染色體非平衡性結構異常有31例，平衡性結構異常有8例，其中倒位3例，平衡易位4例，羅氏易位1例，嵌合體17例。染色體異常核型詳細分布情況見表1。

表1 胎兒染色體異常類型與產前診斷指征分布

2.3 高齡孕婦染色體異常核型差異情況。單純高齡的孕婦共304例，異常染色體核型5例，檢出率為1.97%，高齡合并其他產前診斷指征共623例，異常染色體核型82例，檢出率為13.2%，明顯高于單純高齡孕婦，兩者檢出率具有統計學意義（χ2=31.868，P＜0.001），見表2。

表2 單純高齡及高齡合并其他產前診斷指征分組染色羊水染色體異常核型比較（n=927）

2.4 NIPT目標染色體檢出率。NIPT目標疾病高風險進入介入性產前診斷共147例，NIPT示21三體高風險符合率為77.78%（63/81），NIPT示18三體高風險符合率為30.95%（13/42），NIPT示13三體高風險符合率為8.33%（2/24），見表3。

表3 147例孕婦NIPT目標疾病高風險與羊水細胞染色體診斷結果

2.5 染色體異常與胎兒超聲異常分布情況。超聲異常胎兒共373例，檢出異常染色體20例，異常核型的發生率為5.36%（20/373），其中NT增厚196例，占比52.8%（196/373），檢出異常染色體核型17例，10例21三體，2例18三體，3例性染色異常，2例非平衡性染色體異常，占胎兒超聲異常中檢測出異常染色體核型的85%（17/20）。

3 討論

本研究中，產前診斷指征分布前三位為血清學篩查高風險組、NIPT檢測結果異常組及胎兒超聲異常，檢出染色體異常核型232例，檢出率為9.68%，高于近幾年國內其他地區文獻報道的檢出率（5.93%～8.10%）[3-4]，可能與NIPT、超聲異常陽性檢出率高及各地區人群染色體異常的特異性有關。但NIPT技術篩查存在一定的假陽性率及假陰性率，本研究中，NIPT陽性孕婦進一步產前診斷符合率分別為21三體77.78%、18三體31%、13三體8.33%，低于國內文獻報道[5]，這主要可能跟不同實驗室以及檢測機構質量控制水平差異以及研究樣本有限有關。因此，NIPT檢測作為一種被大眾廣泛接受的具有無創性、高準確性的產前篩查技術，已經成為篩查染色體異常胎兒的最有效的方法，但不能作為終止妊娠的依據，需進一步行介入性產前診斷以確診。

在對2404例產婦當中，因為血清學篩查高風險而進行羊水產前診斷的患者有637例，總共檢出22例異常核型，其異常率為3.45%，略低于文獻報道4.4%～4.5%[6-7]，可能與深圳市推行NIPT的政策及部分孕婦直接選擇NIPT檢查有關。但22例異常核型中，8 例21三體，3例18三體，2例性染色體異常，3例非平衡性結構異常，1例倒位染色體核型，5例嵌合體。由此可見血清學篩查不僅能提示21三體及18三體，也能夠提示其他異常的染色體，因此針對于血清學篩選高風險孕婦，建議直接進入介入性產前診斷。

伴隨著當前我國的計劃生育政策的放寬以及生育年齡的推遲，高齡孕婦比例逐年增高，根據我國的《母嬰保健法實施辦法》相關規定，對于高齡孕婦直接進行羊膜腔穿刺手術的產前診斷，本實驗當中單純高齡直接進入介入性產前診斷的孕婦染色體異常的檢出率為1.64%，遠遠低于高齡合并其他產前診斷指征異常染色體核型檢出率（13.16%），兩者比較檢出率具有統計學意義。因此，對于單純高齡孕婦是否作為產前診斷獨立指征尚待更多樣本進一步考量，但對于高齡合并其他高危因素時應更加重視介入性產前診斷，對于胎兒染色體進行檢查，及時的找出異常所在，避免染色體疾病患兒的出生。

在產前超聲篩選是對胎兒遺傳病進行檢測的重要手段，其中超聲異常的表現包含羊水過多或者過少、胎兒頸項透明層增厚、側腦室有輕度的擴張、胎兒出現水腫、脈絡叢囊腫、胎兒心室內強回聲點等和胎兒染色體異常有關系[8-9]。本研究中，包括胎兒結構異常75例，超聲軟指標異常296例，異常核型的發生率為5.36%，其中NT增厚196例，檢出異常染色體核型17例，占胎兒超聲異常中檢測出異常染色體核型的85%。所以NT增厚在進行早期篩查染色體異常的時候非常的中藥，尤其是在染色體數目異常的篩選中具有重大的提示意義，可以作為胎兒染色體異常介入行產前的診斷的一個非常重要的超聲篩查指標。

夫婦一方染色體異常是指夫婦一方為染色體異常攜帶者，可產生染色體遺傳物質數量異常從而導致婚后不育、流產、死亡、畸形以及智力低下等等。本研究中，檢測出2例平衡易位，均來源于母親，檢出率為15.38%，已足月分娩，目前生長發育良好。232例染色體核型異常病例中，2例易位型三體，7例衍生染色體，均考慮易位染色體導致，因此，對于夫妻一方染色體異常者應盡早行胎兒染色體核型分析，對于考慮易位染色體導致的胎兒染色體異常，因此建議夫妻雙方進行進一步的染色體核型分析檢查，評估再發風險。

綜上所述，嚴格掌握產前診斷指征，對于不同的產前診斷指正的孕婦進行羊水細胞染色體核型分析，為臨床醫生在產前篩查、產前診斷及產前咨詢中提供參考，對于降低染色體異常胎兒的出身具有非常重要的意義。