23%溴氰蟲酰胺·三氟苯嘧啶懸浮劑高效液相色譜分析

2021-07-08 00:49:00李廣澤戴蘭芳李歐燕

世界農藥 2021年6期

李廣澤，王芳，戴蘭芳，李歐燕

(深圳諾普信農化股份有限公司,廣東深圳 518102)

三氟苯嘧啶(triflumezopyrim)是美國杜邦公司開發的一種新型介離子類殺蟲劑，作用于煙堿型乙酰膽堿受體正構結合位點，抑制乙酰膽堿受體。與現有藥劑不存在交互抗性，安全性好，選擇性強，對稻飛虱特效且持效期長，是吡蚜酮之后防治稻飛虱的最佳藥劑品種。

溴氰蟲酰胺(cyantraniliprole)是繼氯蟲苯甲酰胺后杜邦公司開發的第二代魚尼丁受體抑制劑類殺蟲劑，通過激活靶標害蟲的魚尼丁受體釋放橫紋肌和平滑肌細胞內貯存的鈣離子，導致肌肉運動失衡、肌肉麻痹，最終導致害蟲死亡。其殺蟲譜更廣，對鱗翅目、鞘翅目和半翅目等害蟲均有良好殺蟲效果，且兼具觸殺與內吸性，市場前景廣闊[1]。

23%溴氰蟲酰胺·三氟苯嘧啶懸浮劑復配制劑以二化螟和稻縱卷葉螟等鱗翅目害蟲及稻飛虱為防治靶標，具有降低用工成本、方便省事等優點，符合國家環保減量要求，是一種廣譜高效綠色殺蟲劑。

目前，溴氰蟲酰胺原藥[2]和可分散油懸浮劑[3]中有效成分分析方法已有報道， 10%三氟苯嘧啶懸浮劑[4]和20%三氟苯嘧啶水分散粒劑的高效液相色譜分析方法也有報道[5]，但關于溴氰蟲酰胺和三氟苯嘧啶混配制劑的分析方法尚未公開報道。本文采用反相高效液相色譜，使用ODS-BP反相柱和可調波長紫外檢測器，對溴氰蟲酰胺和三氟苯嘧啶同時進行分析和定量。該方法簡便快速，分離效果好，準確度和精密度均達到定量分析的要求，適用于產品的質量分析。

1 試驗部分

1.1 試劑和溶液

乙腈(色譜純)、磷酸(分析純)、水(超純水，電阻率18.2 MΩ·cm)、溴氰蟲酰胺標準品(質量分數99.2%)、三氟苯嘧啶標準品(質量分數98.8%)均由杜邦公司提供；23%溴氰蟲酰胺·三氟苯嘧啶懸浮劑由深圳諾普信農化股份有限公司提供。

1.2 儀器

U3000型高效液相色譜儀配DAD檢測器、紫外檢測器和自動進樣器，變色龍色譜工作站(美國賽默飛世爾科技有限公司)；SinoChrom ODS-BP色譜柱(大連依利特分析儀器有限公司，200 mm×4.6 mm，內裝5 μm填充物)；過濾器及濾膜(孔徑0.22 μm，天津津騰科技有限公司)。

1.3 高效液相色譜操作條件

檢測器：紫外檢測器；流動相：乙腈+0.05%磷酸水(40+60，體積比)；流速：1.0 mL/min；柱溫：25 ℃；檢測波長：260 nm；進樣體積：5 μL。在該色譜條件下，三氟苯嘧啶和溴氰蟲酰胺的保留時間分別約為6.7 min和11.5 min。

溴氰蟲酰胺、三氟苯嘧啶及其混劑樣品的典型液相色譜圖見圖1和圖2。

圖1 溴氰蟲酰胺和三氟苯嘧啶混合標樣的高效液相色譜圖

圖2 23%溴氰蟲酰胺·三氟苯嘧啶懸浮劑試樣的高效液相色譜圖

1.4 測定步驟

1.4.1 標樣溶液的配制

分別稱取溴氰蟲酰胺標樣0.08 g、三氟苯嘧啶標樣0.05 g (精確至0.000 02 g)于同一50 mL容量瓶中，加入30 mL乙腈超聲溶解，冷至室溫后用乙腈定容至刻度，搖勻。用移液管移取上述溶液10 mL于50 mL容量瓶中，乙腈定容，過濾備用。

1.4.2 試樣溶液的配制

稱取試樣0.12 g(精確至0.000 02 g)于50 mL容量瓶中，加入30 mL乙腈超聲溶解，冷至室溫后用乙腈定容至刻度，搖勻，過濾備用。

1.4.3 測定

在上述操作條件下，待儀器基線穩定后，連續注入數針標樣溶液，待相鄰2針三氟苯嘧啶和溴氰蟲酰胺標樣溶液的峰面積相對變化小于1.5%時，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行測定。

1.4.4 計算

將測得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標樣溶液中三氟苯嘧啶和溴氰蟲酰胺的峰面積，分別進行平均。三氟苯嘧啶和溴氰蟲酰胺的質量分數ω(%)，按式(1)計算：

式中：A1為標樣溶液中三氟苯嘧啶或溴氰蟲酰胺峰面積的平均值；A2為試樣溶液中三氟苯嘧啶或溴氰蟲酰胺峰面積的平均值；m1為三氟苯嘧啶或溴氰蟲酰胺標樣的質量，g；m2為試樣的質量，g；P為標樣中三氟苯嘧啶或溴氰蟲酰胺的質量分數，%；5為標準溶液的稀釋倍數。

2 結果與討論

2.1 色譜條件的選擇

溴氰蟲酰胺和三氟苯嘧啶的紫外波長掃描圖分別見圖3和圖4。從圖中可以看出，溴氰蟲酰胺的最大吸收波長為197 nm附近，次吸收波長在265 nm附近；三氟苯嘧啶的最大吸收波長在20 5 nm附近，次吸收波長在233 nm附近?？紤]到200 nm附近溶劑吸收可能會對分析造成影響，因此將檢測波長選為260 nm。

圖3 溴氰蟲酰胺紫外光譜圖

圖4 三氟苯嘧啶紫外光譜圖

選用SinoChrom ODS-BP 200 mm×4.6 mm(id)反向柱作為分析色譜柱。分別使用甲醇、乙腈、水、磷酸水作為流動相對試樣進行檢測分析。結果發現，乙腈與磷酸水組合作為流動相時被試物的峰型對稱性最好，而用0.05%磷酸水和0.1%磷酸水對分析檢測區別不大。通過系列比例試驗，最終確定流動相為Ψ(乙腈∶0.05%磷酸水)=40+60(體積比)，流速1.0 mL/min。該條件下，有效成分可以得到很好的分離，基線平穩，峰型對稱，分析時間適當。

2.2 分析方法的線性相關性試驗

分別稱取溴氰蟲酰胺標準品0.078 90 g、三氟苯嘧啶標準品0.052 34 g于同一50 mL容量瓶中，乙腈超聲溶解定容作為母液。分別移取5 mL母液至10、25、50 mL容量瓶中，再移取1 mL母液至一25 mL容量瓶中，分別用乙腈溶解定容。將5個容量瓶中的混合標樣溶液在上述色譜操作條件下進樣5 μL進行分析，分別以溴氰蟲酰胺或三氟苯嘧啶質量濃度(mg/mL)為橫坐標，其相對應峰面積(mAU*min)為縱坐標繪制標準曲線，分別得到其線性方程。當溴氰蟲酰胺質量濃度為0.062 6～1.563 8 mg/mL，其線性方程為y=181.976 1x+0.693 5，線性相關系數為1.000 0；當三氟苯嘧啶質量濃度為0.041 4～1.034 2 mg/mL時，其線性方程為y=171.669 9x+0.824 1，線性相關系數為1.000 0。