結核患者痰結核桿菌檢驗的要點探討

于杰

（吉林省吉林市龍潭區結核病防治所，吉林 吉林 132000）

0 引言

結核并具有較強的傳染性和危害性，由結核分枝桿菌誘發，可經由呼吸道傳播。該病多為老年群體高發，在慢性呼吸道疾病、糖尿病患者中有較高發病率，會導致患者出現盜汗、低熱、消瘦等癥，對人們的生命健康造成非常嚴重的威脅。從現階段的現狀來看，結核病的發病率逐年上升，已成為重點防治傳染病之一。該病中的大部分患者均可經及時治療后獲得痊愈，故需及早予以診斷[1]。該病癥在臨床診斷過程中，常常需要根據患者的胸部X線來判定，但影像特異性不夠明顯，而且PPD實驗的假陰性問題比較多，加之結核桿菌耐藥性不斷增強，因此采取更為合適的方法獲得準確的檢驗結果非常重要。痰結核桿菌檢驗的方法主要為痰涂片顯微鏡檢查（分為普通顯微鏡和熒光顯微鏡），這兩種方法在臨床的應用范圍均比較廣泛，為進一步了解兩種方法的檢測差異，本次研究選取70例研究對象進行對比分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料。選擇2020年1月至2020年12月吉林省吉林市龍潭區結核病防治所進行痰結核桿菌檢驗的患者70例，其中男40例，女30例，年齡16～70歲，平均（42.16±3.46）歲。分別進行普通顯微鏡檢查（普通顯微鏡組）和熒光顯微鏡檢查（熒光顯微鏡組），所有患者均存在不同程度的乏力、午后低熱、盜汗等癥狀，最終均在病理報告、痰片或熒光顯微鏡檢查檢查下確診。

1.2 方法。收集患者晨起痰液標本，如果患者不能有效咳出痰液，則收集其咽拭子標本，即肺部分泌物。采集完畢后將痰涂片均送往實驗室檢驗[2]。普通顯微鏡組：將酒精浸泡的玻璃片用鑷子取出，將其放置與酒精燈上進行烘干，以有效消除載玻片上的油脂、酒精等。載玻片溫度恢復到室溫后，則可以將痰液標本涂成2 cm大小，厚薄適宜的痰膜，抗酸染色，將其放在光學顯微鏡下檢查，若顯示為3～9條/100條視野則可以判定為陽性，然后玻片經脫油干燥后進行有序保存。熒光顯微鏡組：對涂片進行干燥處理，取0.1%金胺0染色，15 min后，行5%鹽酸酒精脫色，時間控制在3 min，予以0.5%高錳酸鉀染色1 min，于室溫下予以干燥處理，行以LED熒光顯微鏡鏡檢。需要注意的是，需控制好涂層的厚度，避免涂過厚，否則無法觀察到單個的菌體，也不可涂太薄，防止出現找不到生物組織的情況，同時，也避免用力過猛對載玻片造成損害[3]。

1.3 統計學分析。在SPSS 20.0中完成本次研究數據，計量數據用（±s）表示，施以t檢驗，計數資料用（%）表示，施以χ2檢驗，P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

普通顯微鏡組發現陽性患者14例，占總人數20.00%；熒光顯微鏡組檢查發現陽性患者52例，占總人數的74.29%，兩組差異具有統計學意義（P＜0.05），詳見表1。

表1 比較兩組痰涂片顯微鏡檢驗結果

3 討論

肺結核屬于臨床常見的呼吸系統疾病，發病后需要及時進行對癥治療，盡可能避免病灶發生轉移現象。通常情況下，病灶會轉移到腸道、腎臟等部位，導致臨床治療難度加大。此類患者隨著病程的不斷延長，大部分會出現多器官相應功能的減退[4]。相關調查研究顯示，結核病的發病人群主要為青年。發生結合桿菌感染后，一般會有4～8周的潛伏期，這其中，主要以肺部感染結合桿菌為主，該病菌可侵入皮膚、骨骼、腦膜、頸淋巴等，主要通過呼吸道進行傳染[5]。結核桿菌進入人體后，極易誘發結核病，對患者的神經系統、呼吸系統等會造成嚴重損害，進而對生活及正常工作造成嚴重影響。結核桿菌誘發呼吸系統疾病后，患者通常會出現低熱、惡心嘔吐、食欲不振等癥狀，嚴重者可能出現上腹部疼痛、反復高熱等癥狀，不但危害到患者的身體健康，也會對其生命安全造成威脅[6]。近些年來，人們的生活質量不斷提升，醫療機構相關規定也在不斷完善，肺結核在臨床的治療效果也取得了極大程度的改善。不過，由于肺結核的早期臨床癥狀不明顯，在臨床診斷過程中非常容易出現誤診問題，從而對臨床治療造成延誤。所以，對于肺結核疾病，早期進行有效的診斷極其重要。

在以往的臨床檢驗中，主要采用痰液涂片方式進行檢驗，這種檢驗方法操作簡單，費用也比較低。對于結核病患者，結核桿菌是臨床診斷該病的極其重要的指標，可以采用痰液抗酸染色法、痰培養法等方式檢查。痰液涂片檢驗法對于痰液樣本的質量要求比較高，靈敏度不高，陽性的檢出率也不高，并不能為結核病患者提供有效的診斷意見，對于其病情的恢復及預后效果均不利[7]。在臨床治療方面，由于肺結核的治療周期比較長，而斑菌轉陰率是此類患者臨床治療效果判定的一個非常重要的依據，所以臨床上需采取合理手段，來較為準確判斷臨床預后，從而為臨床治療提供有價值的參考意見[8]。現階段，隨著醫療技術的不斷進步，熒光顯微鏡在臨床已經得到非常成熟的發展。采用此種檢驗方式，可使工作人員在更短的時間內觀察到更多視野，減輕了工作人員的負擔。而且，發光柔和，對人的親近性較好，不易產生視覺疲勞。此外，熒光顯微鏡檢查法在暗色環境中會使抗酸桿菌發出橙黃色熒光，更易被發現，更為有效的探測特異性熒光，進而有效改善臨床診斷準確率。

隨著臨床研究的不斷深入，熒光顯微鏡檢查方法在結核桿菌檢驗中的應用逐漸廣泛起來。金胺0為鹽酸氨基四甲二氨基苯甲烷，為熒光染色的染色劑，需在24 h內完成鏡檢。將其置于棕色瓶內，保存于暗處，在熒光顯微鏡下進行觀察，可擴大觀察范圍，使結果更易于判讀，從而在臨床檢測中可以為疾病的診斷提供準確的診斷依據，可有效指導臨床治療工作。本次研究結果顯示，普通顯微鏡組發現陽性患者14例，占總人數20.00%；熒光顯微鏡組發現陽性患者52例，占總人數的74.29%，兩組差異明顯。這一結果表明，結核患者在檢驗痰結核桿菌時，熒光顯微鏡檢查法對于痰結核桿菌的檢出率更高。熒光顯微鏡檢查法是現階段新興分子與基因結合的診斷方法，具有診斷速度快、特異性高、費用低等優點，相比痰液涂鏡片檢驗方法，更值得在臨床進行應用。可為臨床治療工作的開展提供重要參考依據，最終使疾病治療預后得以強有力的改善。但需注意的是，雖然LED熒光顯微鏡鏡檢方法的應用，可使痰涂片檢測陽性率提高，并使痰涂片檢測陽性率提高，減輕實驗室人員工作量。然而，若鏡檢人員缺乏經驗，則會使結果出現失誤。因此，需對閱片人員進行系統化的培訓，并在有經驗的人員協助下展開閱片，為確保痰涂片的質量，需要避免陽光直射，將其放在不透明玻片盒里進行保存，以盲法質量控制，以免有錯誤出現時，可對錯誤痰涂片進行重新脫色與復染，進而進行再次檢測，獲取結果。空氣傳播是結核病傳播的主要途徑，想要有效控制結核病的流行，需要加強對病原體經空氣傳播進行控制，在日常生活中養成良好的生活習慣，對于已經確診的患者，需要嚴格做好痰液傳播防護措施，不可隨意吐痰，加強衛生消毒工作及個人防護工作。結核患者所處的環境，應保持良好的通風，減少空氣中的結核桿菌，并勤換衣物，做好個人衛生。同時對于結核病，早發現早治療是關鍵，及時就診，依據醫師要求規律服藥治療，以最大限度的控制病情進展，推進機體康復。

痰結核桿菌檢驗過程中為提高陽性率，也需要注意下述內容。不管是初治還是反復住院患者，其入院后的痰標本檢查均非常重要，需要讓患者意識到采集痰標本的重要性，不可隨便吐痰留取，痰標本是否合格為疾病得到準確診斷的重要條件，故需充分重視標本采集環節。對患者進行針對性的健康教育，為其講解肺結核相關知識，明確陽性檢出率與痰標本質量的關系，以及檢驗結果對治療方案的影響，從而使患者在留取痰標本過程中具有良好的自覺性和依從性。在采集痰標本期間，應當選擇平坦、寬敞的標本盒，便于檢驗人員進行觀察和挑出可疑的部分，以提升痰涂片抗酸桿菌的陽性檢出率。護士是否正確指導患者留取痰標本，也會對痰菌的檢出率產生影響，因此，護士必須向患者正確講解留取痰標本的方法。正確的方法應是，晨起用清水漱口，深呼吸后用力咳嗽，咳出呼吸道深部的痰液，每天采集一次，連續采集三天。對于咳嗽無痰、痰少或無力咳痰的患者，應當通過誘導方式進行排痰，臨床檢驗工作中主要采用胸部叩擊排痰法、霧化吸入、人工采集法。相對而言，晨痰的抗酸桿菌陽性率高于夜間痰及即時痰，所以需要指導患者連續3天留取晨痰，以提升涂片陽性率。標本采集成功后需要進行全面檢查，對于不合格的標本需要進行重新采集。而采集后的標本必須盡快送檢，如果不能立即進行送檢，可以將標本放在4℃的冰箱中。

另外，不同性狀的痰標本陽性檢出率也有明顯差異。通常痰液性狀分為干酪痰、血痰、黏液痰、水樣痰，黃色、膿樣、團塊狀肺部分泌物屬于干酪痰，是最有價值的痰標本。血痰和黏液痰相比干酪痰，檢出率明顯較低，水樣痰檢出率次之。在肺結核患者痰結核桿菌檢驗過程中，也需要采用正確的檢驗操作方法。按照實驗室的操作規定，在涂片過程中要盡量選擇干酪痰，而含血標本屬于破壞的肺組織，在選取時應盡可能選擇含血部分。在加熱染色過程中不能讓染液沸騰，脫色時間也不能過長，因為脫色后的染液中很難辨認出抗酸桿菌。在痰液沖洗過程中應保持緩慢的水流，須從一側進行沖洗，不可直接沖洗[9]。而在患者痰標本構成方面，黏液痰和唾液痰所占比例比較大，膿樣痰比例相對較少，這主要與患者未掌握咳痰技巧和方法有關。肺結核患者痰液標本主要來自上呼吸道，其成分構成主要為口腔分泌物、咽部分泌物，而膿樣痰主要來自下呼吸道，主要是由肺部病變部分的壞死組織及支氣管分泌物構成，其中結核分支桿菌的含量比較高，所以，在留取標本過程中，非常有必要對患者留痰行為進行干預和指導。此外，在引痰前需要初步評估患者的病情、治療情況、心理狀況等各項因素，需要向患者解釋10%的濃鹽引痰不會造成痛苦，也不會引起毒副作用。這種引痰方法比較經濟適用，安全性也較高，患者的接受度及配合度也較高。做好各項引痰前的護理干預措施，才能有效保證痰液標本的合格率。

綜上所述，熒光顯微鏡檢查法能夠有效提升結核患者陽性率，可以為臨床工作提供非常科學的指導，在患者的臨床治療及預后中起著非常重要的作用，這種檢驗方法值得在臨床中進行普及。