光照對貴州黃雞主要生殖器官發育和生殖激素的影響

李冬光，朱麗莉，陶宇航，張福平，韓 雪，徐景峨，楊粵黔，張林鑫，蒲 齡，伍革民*

(1.貴州省農業科學院 畜牧獸醫研究所，貴州 貴陽 550005；2.貴州大學，貴州 貴陽 550025)

【研究意義】貴州黃雞是以貴州地方雞種威寧雞為母本，新漢夏和金黃洛克為第1、2父本進行三元雜交育成的蛋肉兼用品種。該雞具有抗逆性強、早期生長發育快、產蛋多、肉質好、羽毛色澤美觀等特點。探究不同光照周期下貴州黃雞繁殖機能的差異性，為充分發揮其生產潛力、提高其生產性能具有重要的學術價值和實際應用價值。【前人研究進展】家禽繁殖活動是由多因素調控的復雜過程，主要受遺傳、環境、營養等因素綜合影響，其中遺傳為決定性因素，環境和營養則可在一定程度上挖掘或限制生產潛能。在環境因子與繁殖性能互作關系研究中發現，光照對家禽繁殖生理的影響和相關作用機制具有重要作用[1]。在現代生產中，光照調節家禽的生長發育、生產和繁殖已成為一種提高生產效率的重要方法。Lewisp等[2]研究表明，蛋雞或蛋種雞產蛋期光照時長為16 h 或17 h；Renema等[3-4]研究表明，肉種雞的光照時長一般短于蛋雞，多為14 h或15 h。【本研究切入點】貴州黃雞產蛋率較低是否與光照管理、雞的生殖器官發育和組織學結構有關，目前未見系統報道。【擬解決的關鍵問題】在半舍飼養殖模式下，研究增加光照對不同生長發育期貴州黃雞卵巢、輸卵管形態結構和主要生殖激素的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗雞

雛雞和青年雞采用舍內網上平養，公母混合飼養，10周齡分組并采用圈舍+運動場的半舍飼養，選取體重相近的母雞216只用于試驗。

1.2 試驗設計

將選出的216只母雞隨機分為2組(Ⅰ組和Ⅱ組)，每組設3個重復，每個重復36只雞。試驗Ⅰ組采用自然光照(CK)，Ⅱ組早晚各增加光照1 h(試驗組)。整個階段均采用定時喂料、自由采食和飲水，割刈青綠飼草投喂，雞只的日糧配方、免疫程序、采食飲水、清糞消毒等日常飼養管理均相同。于產蛋初期(140齡)、高峰期(200日齡)及后期(480日齡)進行生殖激素、主要生殖器官的發育情況及生殖器官組織學特征觀察。

1.3 測定項目及方法

1.3.1 血液生化指標檢測 140、200和480日齡隨機采集試驗組和對照組各9只雞空腹翅下靜脈采血5 mL，靜置 30 min，于4 ℃下以3000 r/min迅速離心15 min，吸取上層血清，分裝到小離心管中，-20 ℃ 保存。采用酶聯免疫吸附測定法(ELISA試劑盒)檢測自然光照組、增光組個體生長發育階段貴州黃雞血清中卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)和雌二醇(E2)激素水平。

1.3.2 主要生殖器官測定 140、200和480日齡隨機屠宰試驗組和對照組各9只雞，參照NY/T 823-2004 家禽生產性能名詞術語和度量統計方法[5]和《家禽實體解剖學圖譜》[6]測定貴州黃雞主要生殖器官的發育情況，包括卵巢重、輸卵管重、輸卵管長、最大卵泡直徑、大黃卵泡數和小黃卵泡數。

1.3.3 生殖器官組織學特征觀察 試驗雞屠宰后，取卵巢和輸卵管組織流水沖洗，于4%多聚甲醛中固定24 h。修整卵巢、輸卵管組織塊，常規梯度酒精脫水，二甲苯透明，石蠟包埋，切片，片厚5～8 μm。參考姜曉龍等[7]的方法進行蘇木精-伊紅(Hematoxy-lin-eosin，HE)染色。用Nikon顯微鏡進行觀察并攝影。

1.4 數據分析

數據應用 SPSS18.0 進行分析。

2 結果與分析

2.1 貴州黃雞主要生殖器官的發育情況

貴州黃雞僅左側卵巢和輸卵管發育正常，右側退化。其卵巢呈黑色，位于腎的頭端，表面呈桑椹狀，凹凸不平，以短的卵巢系膜懸吊于腹腔頂壁和背系膜左側。140日齡開始產蛋，卵巢外觀光澤勻稱，布滿葡萄樣小卵泡，零星可見直徑3 mm左右卵泡；200日齡為產蛋高峰期，卵巢外觀豐滿，可見體積依次遞增的卵泡，卵巢腹面有諸多葡萄樣小卵泡，以短柄與卵巢連接；480日齡產蛋后期，卵巢個別外觀萎縮，未見與卵巢連接的卵泡。

輸卵管起自于卵巢后方，終止于泄殖腔。根據形態結構和功能特點，由前向后可分5段：漏斗部、蛋白分泌部、峽部、子宮部、陰道部和泄殖腔。140日齡開產期輸卵管較發達，子宮部管壁厚，管腔較大，皺褶較大。200日齡產蛋高峰期輸卵管發達，子宮部管壁厚，肌肉多，管腔大，皺褶肥大。480日齡產蛋后期，輸卵管皺縮，子宮部管壁薄，管腔小，皺褶小。

從表1看出，隨著時間的推移，貴州黃雞卵巢和輸卵管各指標均呈先增后降的生長趨勢。140日齡卵巢重和輸卵管重均是增加光照處理低于自然光照處理，輸卵管長、最大卵泡直徑、大黃卵泡數和小黃卵泡數則是增加光照處理均高于自然光照處理，除輸卵管重、最大卵泡直徑2處理間差異顯著外，其余指標2處理間差異均不顯著。200日齡增加光照處理的輸卵管重、輸卵管長、大黃卵泡數和小黃卵泡數均顯著高于自然光照處理，卵巢重和最大卵泡直徑2處理間差異不顯著。480日齡的卵巢重和大黃卵泡數為增加光照處理略高于自然光照處理，差異不顯著；輸卵管重、輸卵管長、最大卵泡直徑和小黃卵泡數則是增加光照處理低于自然光照處理，除輸卵管重2處理間差異顯著外，其余指標間差異均不顯著。

表1 不同日齡各處理間貴州黃雞卵巢和輸卵管發育指標

2.2 貴州黃雞的主要生殖器官組織學特征

2.2.1 卵泡發育情況 從圖 1看出，140日齡產蛋高峰期卵巢上卵泡發育良好，卵巢上緊湊排列著小黃卵泡(6～8 mm)和大白卵泡(3～5 mm)，開產期雞卵巢上密布著諸多小白卵泡(<2 mm)，而480日齡產蛋晚期雞卵巢上以小黃卵泡和大白卵泡為主，且數量少排布疏松。開產期和產蛋高峰期雞卵泡膜層較厚，內外膜分界明顯；產蛋晚期雞卵泡膜層和顆粒層較薄，內外膜層分界不明顯。由此可見，不同生理階段貴州黃雞卵巢在組織結構上存在明顯差異，但增加光照對雞卵巢組織結構無明顯影響。

圖1 貴州黃雞不同日齡卵巢的HE染色切片(100 倍鏡)

2.2.2 輸卵管子宮部發育情況 從圖2看出，140日齡開產期和200日齡產蛋高峰期輸卵管子宮部皺襞分布緊密，且皺襞長而復雜，呈葉片狀，有較多分支，發達，多為縱行，間有螺旋狀，黏膜皺襞間有橫行或斜行的溝，隔成不規則的間隙(100倍)；子宮部固有膜增厚，管狀腺發達且量多(400倍)；其中增光組較自然光照組葉片狀皺襞分支更為發達，黏膜皺襞間隙更深更多。480日齡產蛋后期輸卵管子宮部皺襞呈葉片狀，短，分支少，分布較分散，且大多數呈縱行；子宮部固有膜薄，管狀腺量少。

圖2 貴州黃雞不同日齡卵管的HE染色切片

2.3 貴州黃雞血液激素水平

從圖3看出，貴州黃雞的卵泡刺激素(FSH)和雌二醇(E2)含量均隨日齡的增加呈先升后降的趨勢，均以200日齡最高，140和200日齡增光處理顯著高于自然光處理，480日齡時2處理間均差異不顯著；黃體生成素(LH)隨日齡增加呈下降趨勢，其中140和480日齡2處理間差異不顯著，200日齡時自然光處理顯著高于增光處理。

D為自然光照，Z為增加光照；*為處理間差異達顯著水平(P<0.05)

3 討 論

光照對禽類而言是最重要且復雜的生態因子之一，能直接或間接影響雞的生長發育、繁殖性能、營養需求及死淘率等[8]。Joseph等[9]研究發現，光照刺激會加速母禽性腺發育，促進卵巢增大輸卵管增重。李佳宜等[10]研究發現，東鄉綠殼蛋雞高產組卵巢卵泡豐富，卵泡光滑而無塌陷。王巖等[11]研究發現，高產烏雞組卵巢卵泡較多，而低產組初級卵泡數量占多數。本試驗中不同生理階段貴州黃雞卵巢在組織結構上存在明顯差異，但未見光照周期對雞卵巢組織結構有明顯影響。王翠菊等[12]研究增方光式和光照周期都對輸卵管形態發育影響發現，光照周期對輸卵管重量有顯著影響。張楠楠等[13]研究發現，14 周齡海蘭灰蛋雞卵巢相同單位面積的卵泡數量和直徑與 18 周齡的差異顯著(P<0.05)。王錢保等[14]研究發現，不同光照制度下14 周齡優質肉雞的輸卵管長度、卵巢重量差異顯著，16周齡小黃卵泡差異顯著。本試驗中光照周期對輸卵管重影響差異顯著(P<0.05)，這與王翠菊等[12]的研究結果一致。產蛋高峰期卵巢和輸卵管形態發育最好，尤其是增光組的體重、卵巢重、輸卵管重、輸卵管長、最大卵泡直徑和數量均是最高值，可見，早晚各增光1 h有利于主要生殖器官發育，利于卵泡增值發育，進而提高產蛋量。因而，在生產實踐中采取合適的光照周期有重要生產意義。

生殖軸激素是調控家禽卵巢發育及其產蛋性能的主要內分泌因子，其中 FSH、LH、E2和P4等是調控卵泡發育及排卵過程的主要激素[15]。張蕾等[16]研究發現，高產雙黃蛋高郵鴨血清中FSH、E2和P4 的含量均顯著高于低產雙黃蛋高郵鴨(P<0.05)，而 LH 和TEST 無顯著差異。程文佳等[17]研究發現，連產雞的激素水平都顯著高于非連產雞。黃仁錄等[18]研究發現，禽體內激素的分泌規律并不與光照周期呈正相關，以緩增光條件下每日光照11 h處理組的FSH和LH含量最高，而E2含量最低且在整個產蛋期含量幾乎無變化。耿建軍[19]研究發現，281日齡雞血清FSH、E2含量極顯著或顯著高于63、100和481日齡，63日齡含量顯著低于100和481日齡，100日齡含量和481日齡含量差異不顯著。FSH、E2從小日齡到高日齡有由低到高再到低的動態變化。本研究表明，FSH和E2隨日齡增加呈先上升后再下降的動態變化，在產蛋高峰期達最高值，而LH在開產時最高，后為緩慢下降趨勢。增光組的FSH和E2含量分別在140和200日齡顯著高于自然光照組(P<0.05)，而480日齡的FSH、LH和E2 在兩組之間均無顯著差異(P>0.05)。該結果與耿建軍研究結果一致，與黃仁錄的結果有偏離。有關家禽性激素的詳細作用機理、不同發育時期各性激素變化規律以及受機體外和機體內各種因素影響的動態變化，均有待于進一步研究。

4 結 論

早晚各增光1 h有利于貴州黃雞主要生殖器官發育和卵泡增值發育，進而提高產蛋量。因而，在生產中可適當增加光照提高貴州黃雞的生產性能。