辣椒品種(組合)抗病性水平差異測定

裴衛華，施竹鳳，王 會，畢云青，張 慶，楊佩文，吳貴宏，楊明英*

(1.云南省農業科學院農業環境資源研究所，云南 昆明 650205；2. 丘北縣溫瀏鄉農業綜合服務中心，云南 丘北 663208；3.瑞麗海關綜合技術中心，云南 瑞麗 678600)

【研究意義】通過對不同辣椒品種(組合)進行種植及抗病性鑒定試驗，篩選出具有抗病水平的辣椒品種(組合)，為辣椒育種和生產應用推廣提供理論依據。【前人研究進展】辣椒(CapsicumannuumL.)是茄科辣椒屬1年生或多年生草本植物，是一種重要的蔬菜，全球廣泛種植。危害辣椒的真菌病害超過15種，因真菌病害造成的減產每年可達20 %～50 %[1-2]。其中主要真菌病害有：辣椒白粉病[Leveillulataurica(Lev.) Arn]主要危害辣椒葉片，影響辣椒的光合作用；從而導致減產[3]。辣椒疫病是辣椒疫霉菌 (Phytophoracapsici) 導致的一種土傳病害，發生危害比較嚴重，呈逐年上升的趨勢，嚴重的會導致絕收[4-5]。炭疽菌(Colletotrichumspp.)引起的炭疽病是辣椒的主要病害之一，主要危害辣椒果實，造成采收前后果實的腐爛、減產從而造成經濟損失[6]。黃瓜花葉病毒(Cucumber mosaic virus，CMV)，侵染辣椒產生花葉、環斑、壞死條斑或全株矮化等癥[7]；番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus，TSWV)，引起辣椒短縮，葉片壞死，植株矮化、黃化明顯，成熟果實黃化，伴有同心環或壞死條紋。病毒病對辣椒生產造成20 %～30 %減產[8]。【本研究切入點】辣椒由于種植面積大，病害發生普遍，病害綜合防控措施及關鍵藥劑施用技術的操作要求較高，田間措施又往往延后，造成辣椒病害難以控制和產量損失。因此，篩選和選用辣椒抗病性強的優質品種是預防和控制重要病害的有效途徑[9-10]。【擬解決的關鍵問題】本研究針對不同辣椒品種和組合材料進行辣椒突出病害(疫病、白粉病、炭疽病、番茄斑萎病、黃瓜花葉病)的抗性水平差異測定試驗，以期篩選出抗性強、品種優的品種和組合應用于生產種植或品種選育工作，加快抗病品種選育和推廣進程，為辣椒綠色栽培及優質產品生產提供支撐。

1 材料與方法

1.1 鑒定材料

鑒定材料共16個：艷椒465、艷椒435、紅泰664、紅泰668、渝椒13號、渝椒15號、1-1、2-1、3-1、4-1、5-1、6-1、7-1、小米辣(疫病和病毒病感病品種)、朝天椒(白粉病和炭疽病感病品種)、云干椒7號(抗病品種)，每個品種(組合)設置空白對照。

1.2 種植材料

鑒定材料用650 cm×410 cm×155 cm栽培筐采用茄果類育苗基質進行種植，常規水肥管理，不施用農藥。

1.3 辣椒疫病鑒定

1.3.1 鑒定菌株 采集晉寧縣和文山縣等地的田間辣椒疫病標樣進行分離及菌株保存。

1.3.2 接種時間和方法 接種時間：播種后85 d進行人工接種。接種方法：采用1.3.1中病原菌制備成的孢子懸浮液接種，其濃度為1×103～2×103個·mL-1，配制完成后放入4 ℃冰箱2 h后進行辣椒根莖及土表噴淋接種，接種后用大號透明保鮮袋罩好保濕48 h。鑒定條件：溫室光照條件好，溫度18～28 ℃，濕度65 %～90 %。

1.3.3 調查時間及依據 調查時間：接種后3～5 d進行調查。鑒定依據：辣椒疫病抗性鑒定技術規程[11]。

1.3.4 分級及評價標準 如表1所示，抗性評價標準：以病情指數(DI)為評價標準。免疫(I)：DI=0.00；高抗(HR)：0.0070.00。

表1 分級標準

1.4 辣椒白粉病鑒定

1.4.1 鑒定菌株 采集田間辣椒白粉病標樣。

1.4.2 接種時間和方法 接種時間：播種后75 d進行人工接種。接種方法：用白粉病孢子懸浮液(5×104個·mL-1)對辣椒莖葉噴霧、在植株間散放置辣椒白粉進行接種，設空白對照，接種后每天噴1次少量清水補充濕度。鑒定條件：溫室光照條件好，溫度18～28 ℃，濕度65 %～80 %。

1.4.3 調查時間及依據 調查時間：接種后30 d進行調查。鑒定依據：辣椒抗白粉病室內鑒定技術規程[12]。

1.4.4 分級及評價標準 如表2～3所示。

表2 分級標準

1.5 辣椒炭疽病鑒定

1.5.1 鑒定菌株 采集2～3地的田間辣椒炭疽病標樣分離及菌株保存。

1.5.2 接種時間和方法 果實接種：采用成熟初期的辣椒果實，放置在底部有吸水紙的塑料盤加滅菌水后，采集成熟度一致的果實分品種整齊放置，每個品種接種果實在30～54個，每個果實接種備好的炭疽病菌塊1～2塊(直徑0.5 cm)，菌絲面貼緊辣椒，然后用保鮮膜密封保濕，放入光照培養箱里面培養。鑒定條件：光照培養箱，相對濕度70 %～90 %，溫度18～26 ℃。

表3 抗性評價標準：以病情指數(DI)作為評價標準

1.5.3 調查時間和依據 調查時間：果實接種后10～20 d進行調查。鑒定依據：辣椒炭疽病室內抗性鑒定技術規程[13]。

1.5.4 分級及評價標準 如表4所示，辣椒炭疽病抗性評價標準參見辣椒白粉病評價標準。

表4 分級標準

1.6 辣椒病毒病鑒定

1.6.1 鑒定菌株 田間采集辣椒斑萎病毒病和黃瓜花葉病毒病標樣低溫保存帶回接種。

1.6.2 緩沖液配制 接種緩沖液(0.03 mol·L-1磷酸緩沖液，3 mmol Na2SO3)；KH2PO4(1.3473 g)+K2HPO4(4.5872 g)+Na2SO3(0.3781 g)+H2O(滅菌水)；定容至300 mL(pH值7.4)后備用。

1.6.3 接種時間和方法 接種時間：播種后70 d部分葉片在部分植株自然發病基礎上進行人工摩擦接種。接種方法：將病毒樣本放入研缽中，加入接種的緩沖液研磨直到汁液溢出(即用即配)；將辣椒植株生長頂部葉片的葉面灑少量金剛砂，用棉簽或刷子蘸取少量病樣汁液，在灑了少量金剛砂的葉面上輕輕反復摩擦3次，以磷酸緩沖液磨擦接種健康辣椒為空白對照。接種后35 min再噴施清水沖洗葉片。鑒定條件：溫室光照條件好，溫度18～29 ℃，相對濕度50 %～80 %。

1.6.4 調查時間及依據 調查時間：接種后30 d進行調查。鑒定依據：辣椒抗黃瓜花葉病毒病鑒定技術規程[14]。

1.6.5 分級及評價標準 如表5～6所示。

表5 分級標準

表6 抗性評價標準：以病情指數(DI)作為評價標準

2 結果與分析

2.1 不同品種(組合)對辣椒疫病的抗性測定

采用疫霉菌游動孢子懸浮液(1～2×103個·mL-1)噴淋接種辣椒根莖部及土表試驗，接種后3～5 d調查，記載發病情況，計算出病情指數。

結果顯示，各辣椒品種(組合)接種辣椒疫病菌后均可感染發病，品種(組合)間發病程度差異明顯。由圖1可見，15個品種(組合)平均病株率在2.87 %～50.1 %，總平均17.12 %；平均病情指數在0.89～38.17，總平均8.5；而對照品種小米辣平均病株率86.88 %，平均病情指數56.46，云干椒7號平均病株率1.72 %，平均病情指數0.57。

表現高抗(HR)水平有艷椒465、艷椒435、紅泰664、紅泰668、渝椒13號、2-1、3-1、4-1、5-1和6-1；組合1-1表現抗病(R)水平；渝椒15號和7-1表現中抗(MR)水平。對照品種小米辣表現感病(S)水平，云干椒7號表現高抗(HR)水平。

2.2 不同品種(組合)對辣椒白粉病的抗性測定

采用白粉病孢子懸浮液(5×104個·mL-1)噴霧辣椒莖葉接種和病葉碎片植株間散放接種結合，接種后30 d進行調查發病情況，計算出病情指數。

結果顯示，各辣椒品種(組合)接種辣椒白粉病菌后均有發病情況，發病程度普遍較高。由圖2可見，15個品種(組合)平均病株率在14.76 %～93.83 %，總平均43.71 %；病情指數在4.68～51.09，總平均16.63。對照品種朝天椒平均病株率92.68 %，平均病情指數52.44，云干椒7號平均病株率16.8 %，平均病情指數6.8。

品種艷椒465、紅泰664、紅泰668、渝椒13號對白粉病均表現為高抗(HR)水平；品種艷椒435、渝椒15號、組合1-1、4-1、5-1和6-1對白粉病均表現為抗病(R)水平；組合3-1、7-1對白粉病均表現為中抗(MR)水平；組合2-1對白粉病均表現為高感(HS)水平；而對照品種朝天椒表現感病(S)水平，云干椒7號表現高抗(HR)水平。

2.3 不同品種(組合)果實對辣椒炭疽病的抗性測定

采集不同辣椒品種(組合)成熟期初期果實，進行每個辣椒果實接2個菌塊，果實接種后10～20 d進行調查，分別記載果實發病情況，計算病情指數。

結果顯示，辣椒品種(組合)果實接種辣椒炭疽病菌后均有發病情況，發病程度普遍較高。由圖3可見，15個品種(組合)平均病果率35 %～89.81 %，總平均60.5 %；病情指數11.3～26.07，總平均18.5。對照品種朝天椒平均病株率83.33 %、平均病情指數37.96，云干椒7號平均病株率34.29 %、平均病情指數9.52。

辣椒品種艷椒465、艷椒435、紅泰664、紅泰668、組合1-1、4-1和5-1對炭疽病均表現為抗病(R)水平；品種渝椒13號、渝椒15號、組合2-1、3-1、6-1和7-1對炭疽病均表現為中抗(MR)水平。對照品種朝天椒表現感病(S)水平，云干椒7號表現高抗(HR)水平。

表7 辣椒品種(組合)病毒病抗性鑒定結果

2.4 不同品種(組合)對辣椒病毒病抗性測定

鑒定試驗棚內有辣椒、煙草、馬鈴薯和蔬菜等作物種植，有零星病毒病發生。通過采集田間新鮮病毒(花葉和斑萎)病樣品冷藏帶回室內并試紙測定后，用摩擦接種方法在辣椒植株生長頂部葉片接種。鑒定試驗以自然發病及接種相結合(即在自然發病的基礎上進行人工摩擦接種)，接種后30 d調查發病情況。

結果顯示，辣椒品種(組合)斑萎病毒病發生較普遍、發病率高，黃瓜花葉病發生較輕。斑萎病毒病平均病株率17.53 %～59.06 %，總平均34.3 %；病情指數在4.8～15.03，總平均10.0；黃瓜花葉病平均病株率3.27 %～22.92 %，總平均11.14 %；病情指數在0.36～4.04，總平均2.1。

辣椒品種(組合)中艷椒465、艷椒435、紅泰668、渝椒13號、3-1、5-1和6-1對斑萎病毒病表現為高抗(HR)水平；紅泰664、品種渝椒15號、1-1、2-1、4-1和7-1對斑萎病毒病表現為抗病(R)水平。

表8 不同辣椒品種綜合抗感性水平

品種艷椒465、艷椒435、紅泰664、紅泰668、渝椒13號、渝椒15號、1-1、2-1、3-1、4-1、5-1、6-1和7-1對黃瓜花葉病毒病均表現為高抗((HR)水平。

2.5 辣椒品種(組合)綜合抗病性水平

通過對不同辣椒品種(組合)病害進行人工接種鑒定試驗，綜合評價其抗感性水平。結果顯示，不同品種(組合)對不同病害的抗感性水平有一定差異。13個辣椒品種(組合)對白粉病除組合2-1外其余表現均為中抗以上水平；對疫病表現為中抗以上水平；對炭疽病中抗以上水平；對花葉病毒病均表現為高抗水平，對斑萎病毒病表現為抗病以上水平。

3 討 論

通過16個辣椒品種(組合)對疫病、白粉病、炭疽病、病毒病的抗病性測定，試驗設置感病和抗病品種對照。試驗均以自然發病與接種鑒定相結合來綜合分析。

鑒定試驗根據病害田間發生特點和病原菌特性，接種技術均采用本研究團隊制定的地方標準和相關文獻等，采用科學的接種方法和時間綜合分析及評價。辣椒疫病采用病原菌孢子懸浮液噴淋根莖部及土表接種；辣椒白粉病采用病原菌孢子懸浮液噴霧接種和白粉病葉片散放接種相結合；辣椒炭疽病采用辣椒果實菌塊接種；辣椒病毒病(黃瓜花葉病和斑萎病毒病)采用自然發病和接種液(新鮮病樣+磷酸緩沖液)摩擦接種相結合。

根據多年經驗，辣椒苗種植及病菌接種測定在60 d以內的辣椒苗對病害抗性較弱，感病性較高，不能真實反映品種間抗感性水平。因此該試驗在辣椒苗生長85 d接種，在具有菌源和適宜發病條件情況下，大多數辣椒品種均有疫病的發生，但不同品種之間發生程度差異較大。

病情指數高說明抗性水平低，其抗性高低順序為紅泰668(6.82)、艷椒465(7.93)、艷椒435(8.8)、紅泰664(9.07)、5-1(10.21)、渝椒13號(11.09)、1-1(11.2)、4-1(12.32)、3-1(13.02)、6-1(14.11)、7-1(21.79)、渝椒15號(23.41)、2-1(24.61)。

通過不同接種方法觀察和評價不同病害發生情況，分析不同品種(組合)的抗感性水平及差異性，其抗病性水平受種植年限、氣候及農事操作關系密切，接種鑒定試驗彌補了田間試驗受條件限制造成鑒定結果不穩定的缺陷。

4 結 論

16個品種(組合)對辣椒4種病害的抗感性水平表現有一定差異，組合2-1對疫病表現高抗、斑萎病毒病表現抗病、炭疽病表現中抗、白粉病表現高感。渝椒15號和7-1對疫病表現中抗水平。

辣椒品種(組合)艷椒435、艷椒465、紅泰664、紅泰668的綜合抗病性較強；其次是渝椒13號、1-1和3-1、4-1、5-1、6-1等綜合抗病性中上水平；渝椒15號、2-1和7-1綜合抗病性水平一般。中抗以上辣椒品種可在辣椒生產中輪換種植，抗病以上的辣椒組合可在育種工作中進行選擇，為抗病辣椒品種的選育及推廣提供理論依據。

生產上提供品種輪換種植，種植過程中結合田間濕度控制、病害源頭預防及關鍵藥劑防控等措施，可減輕病害發生危害。