理氣逍遙丸對功能性消化不良大鼠的治療作用研究

臧玉豹 馬子君

江蘇省新沂市中醫醫院藥劑科，江蘇新沂 221400

理氣逍遙丸是新沂中醫醫院以辨證論治為基礎的院內制劑。本方由柴胡、枳殼、白芍、延胡索、香附、甘草等17味中藥組成。具有疏肝理氣、通絡的功效[1-4]。有關文獻報道柴胡可促進腸蠕動，進而促進腸道吸收；枳殼中的揮發油成分可加速胃運動，但存在雙向調節的情況，香附以及延胡索都具有保護胃黏膜的作用。芍藥苷是主要的活性成分，此外，甘草還具有雙向調節胃腸運動的作用[5-8]。經過多年臨床實踐，發現該制劑對氣滯型胃痛有較好的治療效果。功能性消化不良（functional dyspepsia，FD）臨床上非常常見，嚴重影響患者的生活質量[9]。目前其發生機制尚未明確，根據有關文獻記載其機制可能與胃腸功能或急速紊亂有關，因此本研究建立FD動物模型，分析胃腸運動功能，調節激素分泌，探討理氣逍遙丸治療功能性消化不良的治療效果，以為該制劑增加氣滯型胃脘痛適應證奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 材料

理氣逍遙丸中間體（未成丸前制劑中間體），由新沂市中醫醫院提供；多潘立酮片（西安楊森制藥有限公司，批準文號：蘇藥制字Z04001458，批號：170306533，規格：10 mg），wistar大鼠體重為（200±20） g（江蘇艾菱菲生物科技有限公司，SCXK（蘇）-2018-0010）。

1.2 試劑

激素相關試劑盒（南京建成科技有限公司），水合氯醛（北京化工廠）。

1.3 儀器

酶標儀（上海皓莊儀器有限公司，MB16-414）；萬分之一電子天平（梅特勒ME204E）；紫外分光光度儀（上海元析儀器有限公司，X6）。

1.4 方法

1.4.1 動物分組與給藥 將成年 wistar 大鼠隨機分為4組，每組16只，空白組、模型組均每日給予生理鹽水，多潘立酮組每日灌胃給予多潘立酮片2.8 mg/kg，理氣逍遙丸組灌胃給予理氣逍遙丸1.25 g/kg。造模后連續給予各組藥物2周。

1.4.2 模型制備 本研究除空白組外，其余動物采用改良復合病因方法（慢性束縛應激+過度疲勞+飲食失節+夾尾激怒）復制FD模型，模型大鼠上午在束縛箱內禁閉3 h，下午游泳10 min。第一日飲食正常，二日進食，三日給足糧食，反復進行，每日夾尾激怒大鼠30 min，連續給予21 d。

1.4.3 大鼠常規形態觀察 對大鼠日常形態（精神狀態、毛發、氣味、顏色、進食量和體重）等進行觀察

1.4.4 胃排空率指標測定 最后一次給藥后2 h，每組大鼠灌胃甲基纖維素酚紅溶液，每只大鼠2 ml，20 min后腹腔注射10%水合氯醛麻醉，固定，打開腹腔，胃和賁門結扎，沿胃大彎切開，用蒸餾水沖洗胃內容物，將胃容積定容在20 ml容積瓶中，然后與0.5 mol/l NaOH 溶液混合，將胃置于室溫下1 h，另取5 ml上清液加入三氯乙酸溶液脫蛋白，離心10 min后，在560 nm 處測定吸光度，加入10%甲基纖維素酚紅溶液2 ml，依次加入NaOH溶液20 ml，再次加入三氯乙酸溶液（20%）4 ml制備成標準溶液。標準苯酚紅a的吸光度在560 nm處測定。計算胃排空率[（1檢測酚紅a/標準酚紅a）100%][4]。

1.4.5 相關激素水平測定 腹主動脈取血5 ml離心，分離血清，采用ELISA試劑盒，依據廠家說明操作，測定大鼠各組血清中Ghrelin、MTL及VIP指標含量。

1.5 統計學方法

應用SPSS 22.0版統計學軟件分析數據，計量資料以（）表示，采用t檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 一般狀態觀察

造模期間，自夾尾開始，大鼠情緒暴躁，存在尖叫、打架現象。模型組大鼠飲食減少，睡眠和活動減少，毛發糾結。給藥前多潘立酮組、理氣逍遙丸組大鼠與模型組一般狀態無差異，給藥后兩組一般狀態均不同程度低于空白組，體重與空白組接近，模型組體重最低。

2.2 四組胃消化不良大鼠胃排空率比較

模型組胃排空率明顯低于空白組（P＜0.01），實驗結果均表明造模成功。理氣逍遙丸組及多潘立酮組的胃排空率顯著高于模型組（P＜0.01），與空白組的胃排空率比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。理氣逍遙丸可促進胃排空率，并且其能力與多潘立酮組無異。胃排空率測定顯示四組雌性與雄性大鼠實驗結果比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），說明性別對胃排空率影響不大，見表1。

表1 四組胃消化不良大鼠胃排空率水平比較（）

表1 四組胃消化不良大鼠胃排空率水平比較（）

注：與空白組比較：*P＜0.01；與模型組比較：#P＜0.01；與雄性組比較：△P＜0.01，△△P＜0.01

組別 雄性 雌性空白組 69.00±2.55 68.02±2.06模型組 38.52±5.82* 35.45±6.28*多潘立酮組 67.57±11.12# 66.25±9.52#理氣逍遙丸組 65.04±9.51# 63.34±8.95#

2.3 四組胃消化不良大鼠血清Ghrelin、MTL及VIP水平比較

模型組血清Ghrelin、MTL水平明顯低于空白組（P＜0.01），血清VIP水平高于空白組（P＜0.01），實驗結果均表明造模成功。

理氣逍遙丸組、多潘立酮組血清Ghrelin、MTL水平顯著高于模型組，血清VIP水平顯著低于模型組，差異有統計學意義（P＜0.01），理氣逍遙丸組與多潘立酮組三項結果均無統計學意義（P＞0.05）。理氣逍遙丸組、多潘立酮組及空白組血清Ghrelin、MTL、VIP水平兩兩比較，差異無統計學意義（P＞0.05），結果表明理氣逍遙丸促進血清Ghrelin、MTL的分泌，降低VIP的分泌水平，且其效果與陽性對照組多潘立酮無異。

雌雄性FD大鼠血清Ghrelin和VIP水平比較，差異無統計學意義（P＞0.05），說明性別對血清Ghrelin及VIP分泌影響不大。雌性FD大鼠各組間血MTL水平明顯高于雄性（P＜0.01）。見表2。

表2 四組血清Ghrelin、MTL及VIP水平比較（，ng/L）

表2 四組血清Ghrelin、MTL及VIP水平比較（，ng/L）

注：與空白組比較：*P＜0.01；與模型組比較：#P＜0.01；與雄性組比較：△P＜0.01，△△P＜0.05

組別 血清Ghrelin 血清MTL 血清VIP雄性 雌性 雄性 雌性 雄性 雌性空白組 1355.11±25.56 1335.33±30.25 135.23±12.58 189.63±25.36△ 80.45±3.66 79.42±2.52模型組 682.22±18.23* 689.42±16.25* 69.23±19.25* 110.23±35.26*△ 138.25±2.89* 136.21±3.22*多潘立酮組 1306.25±60.25# 1299.25±55.87# 112.25±32.65# 180.23±35.21#△ 82.23±4.66# 80.15±3.25#理氣逍遙丸組 1323.36±45.23# 1305.26±48.23# 130.23±15.89# 188.89±24.56#△ 78.25±3.84# 81.25±5.45#

3 討論

FD的癥狀來源于胃、十二指腸，表現為上腹疼痛、腹脹、食欲不振、打嗝、惡心、嘔吐并伴有持續或反復的癥狀。傳統醫學認為屬“胃痛”“痞滿”“呃逆”及“嘔吐”等范疇[10-12]，病位在脾胃，與肝膽功能失調關系密切。因此本研究以夾尾激怒法和慢性應激法（斷食，斷水）相結合的方式造模，建立FD模型。

功能性消化不良的治療主要是消除誘因，緩解癥狀，提高患者生活質量，遵循綜合治療和個體化治療的原則，部分患者需要進行心理治療。目前中醫、中藥治療手段取得了良好的療效，提高了患者的生活品質，目前已成為治療FD的最為寶貴的醫療手段[13-15]。

理氣逍遙丸作為我院院內制劑，遵循中醫、中藥傳統治療方法，由柴胡、當歸、赤芍、白芍、川芎、王不留行、路路通、香附、枳殼、延胡索、茯苓、絲瓜絡、青皮、陳皮、合歡皮、炙甘草等17味中藥組方而成，具有疏肝理氣、和絡調中之功效[16-18]。

結果表明，理氣逍遙丸組、多潘立酮組血清Ghrelin、MTL水平顯著高于模型組，血清VIP水平顯著低于模型組，理氣逍遙丸組、多潘立酮組及空白組血清Ghrelin、MTL、VIP水平兩兩比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。結果表明理氣逍遙丸可促進血清Ghrelin、MTL的分泌，降低VIP的分泌水平。理氣逍遙丸能使雌雄性FD大鼠血清Ghrelin、MTL及VIP分泌恢復到正常水平，在FD大鼠在性別上MTL水平分泌不同，其機制尚未明確，其他激素水平無明顯差異。

理氣逍遙丸能在2周內有效緩解FD大鼠的癥狀，改善胃功能，其機制可能與Ghrelin、MTL和VIP的激素分泌水平相關，對FD大鼠有一定的治療效果。本研究僅在大鼠實驗中證明理氣逍遙丸可以有效緩解FD大鼠癥狀，但在實際臨床試驗中為測定人體血清中激素的改善情況，未來將在人體試驗中藥動、藥效學進行進一步研究。