實驗動物病理學檢測與實施成果*

賴夢雨 周向梅 趙德明 楊利峰

(中國農業大學動物醫學院，北京 100193)

1 病理學檢查在實驗動物質量評價中的地位和作用

獸醫在實驗動物的疾病診療、種群繁育、研究設計、動物福利等方面發揮著極其重要的作用[1]。獸醫病理學是獸醫學的重要分支，是具有獸醫臨床性質的基礎學科，它既可作為獸醫基礎理論學科為臨床醫學奠定堅實的基礎，又可作為應用學科直接參與動物疾病的診斷和防治。因此，獸醫病理學是連接基礎獸醫學與臨床獸醫學的橋梁。病理學檢查是判斷動物健康與否的“金標準”，利用病理學檢查等方法，由組織器官的病理學變化最直接、最明確地反映動物的健康狀況。尤其是當動物由于如應激和飼養管理不當，或不慎接觸有毒有害物質等不確定因素，進入健康與疾病的中間態即“亞健康”狀態[2]時，病理學能夠對無臨床癥狀的實驗動物質量進行更準確地評估，避免實驗動物“亞健康”狀態影響動物實驗結果的準確性。因此，通過病理學檢查，對實驗動物健康狀況進行監測，是評價實驗動物質量，保障實驗動物健康必不可少的重要環節。實驗動物資源建設和質量標準化與科技創新、社會經濟發展和人類健康密切相關[3]，因此，病理學在實驗動物質量監測中的應用與發展具有重要意義。

2 病理學標準的研究與發布實施

病理學在動物質量控制和評價中發揮著關鍵作用，在北京實驗動物行業協會、北京市實驗動物管理辦公室的帶領下，在多位病理學專家的共同努力下，率先在全國開展實驗動物病理學診斷技術規范的研究工作。目前，北京市已經頒布實施了一系列實驗動物病理學診斷規范，詳見表1所列。同時，實驗用雞、鴨、鵝、鴿等病理學診斷規范也在研究制定中，即將陸續發布。

表1 已頒布實驗動物病理學診斷規范

實驗動物病理學標準的陸續頒布和實施，將為北京地區各種實驗動物質量控制和健康評價提供重要的依據和指導，為提高實驗動物品質進而保障動物實驗結果的科學性、可靠性及穩定性發揮重要作用。同時，北京市實驗動物病理學標準的制定也將起到引領和示范作用，為全國和其他省市實驗動物的監督管理工作提供參考。

3 實驗動物病理學檢測的實施與成效

從2009年開始，北京地區實驗動物質量檢測中納入了病理學的檢測，主要由中國農業大學動物醫學院獸醫病理學專業的老師及技術人員負責完成。一年兩次檢查，以大鼠、小鼠、豚鼠、金黃地鼠等嚙齒動物為抽檢對象，對動物的心臟、肝臟、脾臟、腎臟、大腸和小腸，進行大體檢查后采樣，使用石蠟切片、HE染色、冰凍切片、油紅O染色、PAS染色、免疫組化等方法，對組織結構和細胞病變特征進行病理學描述，并結合微生物、寄生蟲等檢測結果以及動物飼養管理制度等進行綜合診斷。最后，出具病理檢測報告，對嚙齒類實驗動物的整體健康狀況做出分析與評價，根據檢測結果梳理病變發生的可能原因并提出建議。

在十一年的檢測過程中，我們陸續發現了送檢實驗動物不同組織臟器的病變，如肝細胞脂肪變性、肝細胞糖原沉積、肝臟局灶性或彌漫性壞死、脾臟出血、間質性腎炎、嗜酸性粒細胞性腸炎(可見腸道寄生蟲)、增生性心包炎、嗜酸性粒細胞性心肌炎、間質性肺炎、肉芽腫性肺炎和支氣管肺炎等[4-13]。2009—2019年的數據整體結果對比顯示，大、小鼠肝臟病變率確有明顯下降趨勢，小鼠肝臟病變率從最高值57.35%(2011年)下降至0.51%(2019年)，大鼠肝臟病變率從最高值65.00%(2011年)下降至0(2019年)，但豚鼠肝臟病變率仍相對較高，最高值為78.25%(2010年)，下降至5.00%(2019年)；各種嚙齒類實驗動物腎臟、腸道、肺臟、心臟、脾臟等臟器的病變仍然時有發現，近五年內病變率不超過5.00%。

我們發現，肝細胞腫脹主要以脂肪變性和糖原沉積為主，這可能與長期的飼料營養成分有關，而各送檢單位均使用目前市場上商品化飼料，可見其原料質量及配方有待規范；秋、冬季低溫影響同樣不容忽視。在低溫環境下，動物能量代謝加強，需要通過增加采食量來維持熱平衡，如果飼料供應不足，同樣會引起營養不良和抗病力下降，飼料充足又易造成脂肪沉積，故應注意優化飼喂次數及進食量；腎臟管型及腎炎等病變可能與代謝或接觸有害物質有關，應注意飼料、飲水、墊料等是否有污染；肺臟間質性肺炎、支氣管肺炎及肉芽腫性肺炎等重點要考慮飼養環境空氣是否達標等因素；腸道所見嗜酸性粒細胞腸炎及蟲體結構則多與寄生蟲感染有關。及時向送檢單位反饋檢查結果，給出合理的飼養管理建議的同時，在下一年度的監測中，也進行了追溯對比分析，部分單位在接受建議并完善、調整管理制度后，動物健康狀況確實得到了明顯改善。這一檢測作為病理學在實驗動物質量控制中的應用，為北京市實驗動物病理學診斷規范的制定，積累了寶貴的實踐經驗，使規范能夠更加貼近生產實際，有利于規范的推行普及，為實驗動物病理學診斷規范未來的升級提供基礎。

4 “獸醫病理師”在實驗動物病理學檢測中的作用

實驗動物病理學診斷規范的執行應由病理學專業人員實施，從對實驗動物外觀的檢查、血液學及生化指標的檢測到動物的剖檢、組織器官制片、組織病理學觀察、結果判定等一系列病理學檢查，均需要具有獸醫病理學專業知識和技能的人員完成。檢測完畢后，病理學專業技術人員需要出具病理診斷報告并在報告上簽字確認。因此，病理學從業人員的規范在實驗動物病理學檢測中至關重要。2018年10月23日，中國獸醫協會正式宣布成立“獸醫病理師分會”。這一舉措，將為獸醫病理學人才隊伍的培養、繼續教育活動的開展、從業人員的規范、病理學標準體系的建設等搭建起重要的平臺。“獸醫病理師”的推出，不僅是行業自律的基本體現，更是推動獸醫病理學發展，加強病理學在動物臨床診斷或健康評價中服務的關鍵舉措。對于實驗動物病理學檢測，應由“獸醫病理師”執行并出具病理學診斷報告，以保證檢測過程的科學性、規范性和準確性。因此，負責病理學檢測的相關單位應重視人才隊伍的培養，積極組織參加病理學專業技能培訓和診斷交流活動，不斷提高綜合診斷水平，積累豐富的診斷經驗，以更好地服務于實驗動物的病理學監測。

5 推動我國實驗動物病理學評價體系的建設與運行的意義

中國的生物醫藥行業正在飛速發展，實驗動物作為生命科學發展的重要基石和必備工具發揮著舉足輕重的作用。實驗動物的質量不僅代表著一個國家開展生命科學研究的能力，更體現著這個國家生物醫藥發展的水平，決定著人類醫學發展的方向！未來，實驗動物將始終在國家戰略發展及社會文明進步中扮演著重要角色，始終與人類生命健康和社會和諧發展息息相關。因此，作為實驗動物管理工作者、實驗動物獸醫，我們責無旁貸，要為我國實驗動物的飼養管理方案、健康評價體系的不斷完善提出建議、提供策略且保障高品質實驗動物的生產。實驗動物病理學作為檢驗動物質量的關鍵指標，能夠最真實、最明確地反映動物的健康狀況，無論是微生物、寄生蟲等病原的感染，還是應激、營養失衡、飼養環境不良等問題的出現，病理學技術人員均可通過病理學檢測方法提供最可靠、最權威的“證據”。從診斷結果分析原因、機理、致病因素等，進而為實驗動物疾病監測、環境管理、飼料配方、遺傳背景等提供最具價值的參考依據。因此，實驗動物病理學檢測是動物健康評價體系中的必備環節，如何加強和提高病理學檢測的效率與準確性應從如下三方面入手：①根據不同類型實驗動物的特點，以科學性、標準性、可操作性為指導原則，制定相對應的病理學診斷規范。②在全國實驗動物健康監測體系中納入病理學檢測，推行病理學診斷規范，以期為我國實驗動物的品質監控保駕護航。③“獸醫病理師”具備病理學從業人員技能的基本要求，因此，實驗動物病理學檢測及病理報告的出具，應由“獸醫病理師”完成。

為了更好地為我國生命科學技術的發展服務，應逐步完善實驗動物質量控制檢測技術標準，與國際水平接軌，突顯獸醫病理學在監測體系中的作用與地位，全面推進實驗動物監管體系創新，提升實驗動物科技工作對生命科學領域研究與創新的支撐能力和服務水平。