肺小細(xì)胞惡性腫瘤活檢診斷中免疫組化的應(yīng)用研究

奚劍敏 文歡 黃勁

目前，肺癌疾病發(fā)病率已經(jīng)呈現(xiàn)出逐漸增高的態(tài)勢(shì)，該疾病對(duì)患者身心健康造成了極大損傷，同時(shí)更影響了患者日常生活，極大降低了患者生活質(zhì)量[1]。臨床中肺癌屬于一種惡性腫瘤疾病，該疾病在細(xì)胞學(xué)、免疫表型以及組織學(xué)和分子遺傳學(xué)水平等多方面均具有一定的異質(zhì)性，可將其分為兩種，其一是小細(xì)胞肺癌，其二則是非小細(xì)胞肺癌[2]。根據(jù)相關(guān)數(shù)據(jù)調(diào)查顯示[3]，臨床中肺癌患者中只有25%左右的患者屬于小細(xì)胞肺癌。為了能夠充分明確肺小細(xì)胞惡性腫瘤活檢診斷中免疫組化的作用，提升肺小細(xì)胞惡性腫瘤疾病臨床診斷質(zhì)量，促進(jìn)患者疾病治療和預(yù)后效果，基于此，文章對(duì)利用免疫組化對(duì)肺小細(xì)胞惡性腫瘤活檢診斷的實(shí)際價(jià)值進(jìn)行詳細(xì)分析，繼而提升臨床肺小細(xì)胞惡性腫瘤活檢診斷中免疫組化的應(yīng)用，結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

對(duì)我院2018年1月—2019年3月收治的40例行肺穿刺與支氣管鏡活檢的肺癌患者進(jìn)行研究，分析免疫組化對(duì)肺小細(xì)胞惡性腫瘤活檢診斷的實(shí)際價(jià)值。本次研究中患者男29例，女11例，年齡42～78歲，平均年齡為（63.87±3.62）歲。所有患者在進(jìn)過(guò)病理學(xué)分析后均確診為肺癌。所有患者及家屬已明確本次研究目的，自愿加入本次研究，我院倫理委員會(huì)同意該次試驗(yàn)正常推進(jìn)。

1.2 方法

病理組織學(xué)檢查：相關(guān)工作人員利用濃度為10%的中性福爾馬林將其標(biāo)本固定，隨后對(duì)標(biāo)本進(jìn)行脫水、切片以及使用石蠟包埋和染色，完成后使用顯微鏡進(jìn)行查看，嚴(yán)格按照形體學(xué)特征對(duì)標(biāo)本進(jìn)行診斷。

免疫組化檢測(cè)：采取免疫組化SP法進(jìn)行樣本檢查，其中CgA、CD56、P40、TTF1、CK5/6、Syn、P63均為即用型抗體，來(lái)源于安必平技術(shù)有限公司提供的試劑盒進(jìn)行染色，選取PBs取代一抗為陰性對(duì)照，選用已知陽(yáng)性片為陽(yáng)性對(duì)照。對(duì)切片行EDTA抗原熱修復(fù)后，滴加需檢測(cè)的標(biāo)記CgA、CD56、P40、TTF1、CK5/6、Syn、P63一抗，經(jīng)孵育、洗滌后，再滴加辣根過(guò)氧化物酶為二抗，孵育、DAB顯色后，復(fù)染細(xì)胞核最后脫水、封片及鏡檢。

1.3 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

最終檢測(cè)染色為棕褐色、棕黃色，則認(rèn)為陽(yáng)性；具體著色部位根據(jù)指標(biāo)不同，定位也會(huì)有差異，在明確各指標(biāo)陽(yáng)性后，根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞占比，將結(jié)果進(jìn)行如下劃分：（1）陰性：未發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性細(xì)胞；（2）+：發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性細(xì)胞，陽(yáng)性細(xì)胞低于10%；（3）++：陽(yáng)性細(xì)胞保持在11%～50%；（4）+++：陽(yáng)性細(xì)胞保持在51%～75%；（5）++++：陽(yáng)性細(xì)胞高于75%[4]。

2 結(jié)果

2.1 病理組織學(xué)結(jié)果

本次研究中的40例患者經(jīng)病理學(xué)檢查后均確診為肺癌，其中有1例患者顯示為非霍奇金淋巴瘤、6例患者顯示為小細(xì)胞肺癌、33例患者顯示為低分化鱗癌（如表1）。顯微鏡下小細(xì)胞肺癌特點(diǎn)：癌細(xì)胞呈現(xiàn)出小梁狀、巢狀現(xiàn)象，并且片狀分布。癌細(xì)胞的細(xì)胞核顯示為圓形、卵圓形和梭形，核染色質(zhì)呈現(xiàn)出微細(xì)顆粒現(xiàn)象，并且核染色質(zhì)染色較深，嚴(yán)重缺少核仁，并且小細(xì)胞肺癌的細(xì)胞分界較為模糊，細(xì)胞質(zhì)相對(duì)稀少（如圖1所示）。顯微鏡下低分化鱗癌特點(diǎn)：癌細(xì)胞呈現(xiàn)出巢狀現(xiàn)象，并且片狀分布。癌細(xì)胞的細(xì)胞核顯示為卵圓形，染色質(zhì)和泡狀核呈現(xiàn)出過(guò)粗現(xiàn)象，核仁較為明顯但是胞質(zhì)少（如圖2所示）；顯微鏡下非霍奇金淋巴瘤特點(diǎn)：腫瘤細(xì)胞整體排列分散，細(xì)胞核呈現(xiàn)出圓形和卵圓形，且細(xì)胞染色質(zhì)過(guò)粗（如圖3所示）。

圖3 低分化鱗癌病理組織學(xué)特點(diǎn)（HE染色×200倍）

表1 病理組織學(xué)檢查結(jié)果

圖1 小細(xì)胞肺癌病理組織學(xué)特點(diǎn)（HE染色×200倍）

圖2 非霍奇金淋巴瘤病理組織學(xué)特點(diǎn)（HE染色×200倍）

2.2 免疫組化結(jié)果

經(jīng)免疫組化后，小細(xì)胞肺癌CD56表達(dá)率為95%（38/40），CgA表 達(dá) 率 70%（28/40）、TTF-1表 達(dá) 率 100%（40/40）、Syn表達(dá)率85%（34/40）。1例非霍奇金淋巴瘤患者的Syn灶狀區(qū)和LCA均顯示為陽(yáng)性，TTF-1、CgA、p63均顯示為陰性。5例低分化鱗癌患者中，CK5/6、p63均顯示為陽(yáng)性，其中有1例低分化鱗癌患者的Syn灶狀區(qū)顯示為陽(yáng)性，TTF-1、CgA顯示為陰性。

3 討論

近年來(lái)，隨著臨床醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷成熟化，是分子生物學(xué)以及腫瘤學(xué)等相關(guān)研究已經(jīng)獲取了良好發(fā)展和進(jìn)步，更能夠根據(jù)不同的組織學(xué)類(lèi)型以及腫瘤分子改變?yōu)檫M(jìn)行差異性病理類(lèi)型分析和治療。根據(jù)臨床實(shí)際分析發(fā)現(xiàn)[5]，在針對(duì)小細(xì)胞肺癌疾病診斷過(guò)程中與其他類(lèi)型肺癌診斷相比更加復(fù)雜，容易將其診斷為非小細(xì)胞肺癌。因此臨床中提升對(duì)小細(xì)胞肺癌疾病的病理診斷準(zhǔn)確率是十分重要。目前，臨床中診斷小細(xì)胞肺癌疾病的常用診斷方法就是活檢檢測(cè)，但是在實(shí)際活檢檢測(cè)過(guò)程中，由于樣本量較少容易出現(xiàn)人工擠壓，進(jìn)而導(dǎo)致樣本出現(xiàn)細(xì)胞變性，這在一定程度上極大降低了檢測(cè)人員對(duì)于樣本結(jié)構(gòu)組織分辨的清晰程度，容易出現(xiàn)誤診的現(xiàn)象[6-8]。

通過(guò)免疫組化方式對(duì)肺小細(xì)胞惡性腫瘤進(jìn)行診斷與其他診斷方法相比優(yōu)勢(shì)更明顯，該種檢測(cè)方式主要是應(yīng)用不同的酶系統(tǒng)對(duì)差異化顯色底物進(jìn)行催化，繼而將其顯示為對(duì)應(yīng)顏色，以此能夠?qū)ν粡埥M織切片當(dāng)中的不同抗原進(jìn)行充分表達(dá)，不僅如此，與其他診斷方法相比，免疫組化方式具有更強(qiáng)的實(shí)用性，并且該種檢測(cè)方法的實(shí)際操作更加便捷，更有著較高的特異性和靈敏性[9]。

但是在應(yīng)用免疫組化方式對(duì)肺小細(xì)胞惡性腫瘤進(jìn)行診斷過(guò)程中需要注意一下兩點(diǎn)：第一，檢測(cè)人員需要準(zhǔn)確篩選不同酶，從而防止出現(xiàn)交叉感染；第二，檢測(cè)人員需要盡量選擇顏色明顯的色組作為底物。同時(shí)，在實(shí)際操作過(guò)程中檢測(cè)人員需對(duì)具體檢測(cè)環(huán)節(jié)嚴(yán)格把控，最大程度避免不良因素出現(xiàn)，輔助醫(yī)師、患者做出正確的治療判斷[10-12]。

通過(guò)本文研究發(fā)現(xiàn)，40例患者經(jīng)病理學(xué)檢查后均確診為肺癌，其中有1例患者顯示為非霍奇金淋巴瘤、33例患者顯示為低分化鱗癌、6例患者顯示為小細(xì)胞肺癌。經(jīng)免疫組化后，小細(xì)胞肺癌表達(dá)率為100%，CgA表達(dá)率70%、CD56表達(dá)率為95%、TTF-1表達(dá)率72.5%、Syn表達(dá)率85%。

綜上所述，利用免疫組化對(duì)肺小細(xì)胞惡性腫瘤活檢診斷的實(shí)際價(jià)值較高，將各項(xiàng)指標(biāo)核屬于臨床中診斷患者肺小細(xì)胞惡性腫瘤的重要性可靠指標(biāo)，同時(shí)將指標(biāo)聯(lián)合使用對(duì)于提升疾病診斷準(zhǔn)確率有著極大作用。