308nm 準分子激光聯合補腎消白方對白癜風療效觀察及對外周血T 淋巴細胞影響

胡文韜，蔣宜芳，唐 挺，賈 敏

（貴州中醫藥大學第一附屬醫院，貴州 貴陽，550002）

白癜風是一種常見的色素變性疾病，其發病機制不明確，可能與遺傳、自身免疫反應、黑素細胞凋亡、精神心理和微量元素相對缺失等因素有關[1]。其中最為認可的是自身免疫學說。大量的研究表明白癜風的發病機制中細胞免疫因素起著重要的作用，其中以T淋巴細胞的免疫參與研究尤為突出[2]。白癜風易診難治，臨床上治療白癜風方法諸多，但整體療效并不理想，我們通過308nm準分子激光聯合補腎消白方治療肝腎不足型白癜風，觀察患者皮損恢復情況，并檢測外周血T淋巴細胞水平變化來評價治療效果。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究收集2019年12月至2020年06月期間就診于我院符合白癜風診斷標準的60例患者作為研究對象。每位患者就診時通過隨機數字表法分為對照組（308nm準分子激光）、觀察組（308nm準分子激光聯合補腎消白方）。對照組患者男性17例，女性13例，平均年齡（35.67±12.78）歲，平均病程（4.93±4.64）年。觀察組患者男性12例，女性18例，平均年齡（35.77±12.17）歲，平均病程（5.00±4.85）年。兩組患者的性別、年齡、病程等基本資料具有可比性，差異無統計學意義（P>0.05），詳見表1。

1.2 納入與排除標準

納入標準:①確診為白癜風[3]，分期為穩定期[4]及中醫辨證分型白癜風（肝腎不足型）[5]；②年齡在16周歲至65周歲患者；③近1個月內未使用本研究中藥物及糖皮質激素等相關藥物；④患者自愿參與臨床試驗，能積極配合并簽署知情同意書。

排除標準:①合并嚴重的心、肝、腎疾病等；②近期肝、腎功能檢查異常者；③妊娠、哺乳期及近期計劃懷孕者；④存在光過敏史者及對本研究所用的中藥存在過敏史者。

1.3 治療方法

對照組單純采用308 nm準分子激光（公司：日本USHIO，激光參數：波長308 nm，能量1～9999 mJ/cm2，治療區出光窗口面積120 nm×120 mm，治療時間1～624s）治療，根據患者皮損部位選擇合適能量，隨后根據患者皮損區反應調節能量，每周1次，12周為1個療程。觀察組在此基礎上予補腎消白方口服，藥物配伍及用量如下，補骨脂 12g、骨碎補10g、當歸15g、川芎10g、黑芝麻20g、制何首烏10g、桑葉10g、菟絲子15g、知母10g、墨旱蓮15g、女貞子20g、紫草10g（以上均為免煎顆粒劑，由廣東一方制藥有限公司）。將上述藥物粉劑一同倒入杯中，再予250 ml熱開水沖調后，分早晚兩次口服。

1.4 觀察指標

（1）療效評定：參考文獻[3]，痊愈：白斑全部消退，恢復正常膚色；顯效：白斑部分消退，復色率≥50%；有效：白斑縮小或者消退，復色率≥10%；無效：白斑無明顯變化。顯效率=(痊愈+顯效)/總例數×100% 。

（2）白斑面積比較及色素積分比較：參照文獻[6，7]記錄兩組治療前、治療后3個月皮損面積、色素積分情況。

（3）實驗室指標檢測:分別取患者治療前后外周空腹靜脈血，經處理后，采用流式細胞術(Flow Cytometry,FCM)檢測外周血CD3+T、CD4+T、CD8+T及CD4+T/CD8+T水平。

（4）安全性評價：記錄治療過程中出現的不良反應如皮膚局部出現紅斑，水皰及瘙癢等，并于治療結束后檢測患者肝、腎功能，評價其安全性。

1.5 統計學處理

選用SPSS17.0統計軟件進行統計學處理，計量資料用均數±標準差()來表示，計量資料采用t檢驗，計數資料采用卡方檢驗，P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 臨床療效

觀察組痊愈率為20%，顯效率為40%，有效率為33.33%，無效率6.67%，總有效率為93.33%。對照組痊愈率為6.67%，顯效率為16.67%，有效率為53.33%，無效率為23.33%，總有效率76.67%，詳見表2，圖1、2。

圖1 32 歲女性，1a.治療前,1b.治療3 月后

表2 兩組患者療效對比（例）

2.2 皮損面積及色素積分比較

兩組在治療前皮損面積、治療前色素積分上均不存在顯著差異（P>0.05）；治療后觀察組中皮損面積均值明顯低于對照組（P<0.05），治療后觀察組中色素積分均值明顯高于對照組中均值（P<0.05），詳見表3。

表3 兩組患者皮損面積及色素積分比較（）

表3 兩組患者皮損面積及色素積分比較（）

2.3 兩組患者外周血T 淋巴細胞水平比較

兩組治療前T淋巴細胞水平比較，差異均無統計學意義(P>0.05) 。治療后3個月，觀察組T淋巴細胞CD3+T、CD4+T百分比及CD4+T/CD8+T均高于對照組(P<0.05)，CD8+T百分比低于對照組(P<0.05)，詳見表4。

表4 兩組T 淋巴細胞前后水平比較()

表4 兩組T 淋巴細胞前后水平比較()

注：a 表示治療后觀察組與對照組比較，t 值分別為2.920、4.233、-2.119、3.597，P 值分別為0.005、0.000、0.038、0.001。

2.3 不良反應

治療過程中，對照組共有3人，觀察組2人在接受光療后訴局部出現水皰，暫停治療后癥狀消失，不影響此次試驗結果。治療前后對所有參與此次研究的患者進行肝功能監測均未見異常。

3 討論

T淋巴細胞在免疫機制中發揮著主要的作用，特別是在皮膚免疫中，直接影響著皮膚黑色素細胞[8]。關于白癜風的發病，目前多認為與T淋巴細胞介導的黑素細胞異常免疫應答相關，主要集中表現在T淋巴細胞失調[9-11]。研究表明[12]不同亞群的T淋巴細胞如輔助性T淋巴細胞、細胞毒性T淋巴細胞及調節性T細胞（Treg細胞）等通過黑素細胞免疫應答造成皮損區炎細胞浸潤及微環境異常，誘發白斑。成熟的T淋巴細胞多表達為CD4+T細胞和CD8+T細胞。其中CD4+T細胞通過對外源性抗原肽的識別，分化出主要為Th細胞的效應細胞，當Th細胞激活后，分泌大量細胞因子如白介素2、白介素6、粒細胞巨噬細胞集落刺激因子及腫瘤壞死因子‐α等，從而通過調節固有免疫和適應性免疫來作用于黑素細胞，或通過直接凋亡作用引起黑素細胞的殺傷，導致白癜風發生。而CD8+T細胞則通過對內源性抗原肽的識別作用，分化出大量具有細胞毒作用的毒性T細胞，特異性殺傷黑素細胞，且該殺傷作用可能依賴IFN－γ、顆粒酶B及穿孔素分泌水平的上調[13]。

目前白癜風治療包括藥物治療（類固醇皮質激素、鈣調磷酸酶抑制劑及微量元素和維生素D等）、光療、手術治療及中醫中藥等。308nm準分子激光為波長為308 nm的紫外激光，可穿透皮膚深層至真皮淺層，選擇性治療白斑。在對白癜風的物理治療中308nm準分子激光的治療的有效性已被證實，能使具有殺傷性的T淋巴細胞進一步凋亡,還可以經過引誘某些細胞因子和炎癥介質，減輕局部的免疫及炎癥反應，達到加快黑素細胞的增殖分化和移動，從而促使患者皮損部位恢復[14-15]。

補腎消白方為貴州省名老中醫賈敏教授經驗方，該方從腎論治,以滋補肝腎、益精養血為治法，在補腎陽同時配以滋補腎陰藥物，陰中求陽，從而達到陰陽雙補平衡，精血互生，使黑色素代謝趨于正常，治療肝腎不足型白癜風。方選補骨脂、骨碎補、當歸、川芎、黑芝麻、制何首烏、桑葉、菟絲子、知母、墨旱蓮、女貞子、紫草等為主進行辨證加減。具體遣方用藥中，補骨脂，因其能補益脾腎，《本草經疏》曰“補骨脂，暖水臟，陰中生陽，壯火益土之要藥也。”配合骨碎補以增強其補腎之功，共為君藥。女貞子、墨旱蓮、黑芝麻、制何首烏、菟絲子相伍以增強其補肝腎、益精血之功，知母善滋腎陰、潤腎燥。共為臣藥。當歸補血活血，川芎行氣活血，二者同用行氣活血通絡，為佐藥。桑葉、紫草清熱達表，涼血活血，為佐使藥。

本研究通過外周血CD3+T、CD4+T、CD8+T及CD4+T/CD8+T細胞的前后檢測，發現經治療后患者外周血CD3+T、CD4+T及CD4+T/CD8+T水平上升，CD8+T細胞水平明顯降低，進一步揭示了白癜風的發病與外周血淋巴細胞亞群失衡有關，從細胞免疫功能方面證明308nm準分子激光聯合補腎消白方治療白癜風有效性。

綜上，308nm準分子激光聯合補腎消白方治療肝腎不足型白癜風療效理想，無明顯不良反應，值得臨床推廣。