下呼吸道感染非發酵菌的臨床分離情況及藥物敏感性試驗分析

王貝琦

摘要：目的 分析臨床下呼吸道感染患者非發酵菌分離情況及其藥物敏感性試驗。方法 將2020.1-2020.12我院下呼吸道感染患者檢查標本主要三種非發酵菌其臨床分離情況和藥物敏感性分析。結果 痰標本中主要分離出銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌、嗜麥芽窄食單胞等3種非發酵菌，呈多重耐藥趨勢。結論 非發酵菌因其特殊的耐藥機制，使感染患者的耐藥性情況日益嚴重，臨床應當根據藥敏試驗結果合理使用抗生素，具有重要意義。

關鍵詞：藥物敏感性;臨床分離;下呼吸道感染;非發酵菌

【中圖分類號】R373.1 ? ? ? ? ? ? 【文獻標識碼】A ? ? ? ? ? ? 【文章編號】2107-2306（2021）05-035-02

非發酵菌在臨床中是指一大群不發酵葡萄糖或僅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厭氧、無芽胞的革蘭陰性桿菌，多為條件致病菌[1]。目前，在臨床下呼吸道感染病原菌中存在一定上升跡象，及時掌握非發酵菌分布于下呼吸道感染患者中，以及了解患者藥敏情況，對提高臨床治療效果、降低治療費用、縮短治療時間與住院時間，便于臨床合理用藥具有重要意義[2]。本文旨在對下呼吸道感染非發酵菌患者分離情況及藥物敏感性進行分析，內容如下。

1資料與方法

1.1基線資料

收集我院2020.1-2020.12下呼吸道感染患者纖支鏡或痰液分泌物標本，根據“全國臨床檢驗操作過程”判斷痰標準符合情況，培養分離可接受痰標本和合格痰標本的致病菌。

1.2方法

均采用法國梅里埃公司生產的細菌鑒定板卡以及干粉添加劑與培養基。使用ATCC27853銅綠假單胞菌、ATCC25922大腸埃希菌作為室內質量控制，所有菌株均來自于臨床衛生檢驗中心。同樣使用上述公司生產的細菌半自動檢定儀對細菌進行鑒定以及根據CLSI進行藥物敏感性試驗。

2結果

2.1非發酵菌分離情況

在2020.1-2020.12間共接收合格痰標本與纖支鏡分泌物標本共2534份，分離出1161株病原菌，培養陽性率為45.82%。其中革蘭陽性細菌250株（21.53%），革蘭陰性細菌911株（78.47%）。在革蘭陰性細菌中有490株（占53.79%）非發酵菌，其中分離出銅綠假單胞菌275株（56.12%），鮑曼不動桿菌125株（25.51%），嗜麥芽窄食單胞菌46株（9.39%），其他非發酵菌株44株（8.98%）。

2.2藥物敏感性

三種非發酵菌常用藥物敏感性試驗情況見表1。

3討論

非發酵菌一般具有以下特征：不發酵葡萄糖，在OF培養基中表現為氧化型或產堿型、氧化酶陽性（除不動桿菌屬和窄食單胞菌外）、生長要求低、動力陽性（除不動桿菌屬和莫拉菌屬外）、無芽孢的革蘭陰性桿菌，廣泛存在于自然界的水、土壤和空氣中，有的是人體皮膚黏膜表面的正常菌群組成成分，一般是條件致病菌。由于非發酵菌生長營養要求低，在水及潮濕環境中極易生長，并對抗生素和消毒劑有天然耐藥質粒。此外，侵入性醫學治療、抗生素、化療的廣泛使用等非發酵菌已成為醫院內感染的主要致病菌。人類非發酵菌感染中，假單胞菌占70%～80%，主要為銅綠假單胞菌，此外，不動桿菌屬、嗜麥芽窄食單胞菌等也是常見的病原菌[3]。

從表1可統計出，銅綠假單胞菌對替卡西林/克拉維酸的耐藥率為61.45%，對碳青霉烯類、對頭孢吡肟、頭孢他定、阿米卡星等比較敏感，對多粘菌素E罕見耐藥;鮑曼不動桿菌對哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、氨芐西林/舒巴坦、替卡西林/克拉維酸的耐藥率達74% 以上，對第三、四代頭孢及碳青霉烯類耐藥率達72% 以上，對慶大霉素、妥布霉素、阿米卡星的耐藥率達72% 以上，對環丙沙星、左氧氟沙星的耐藥率達76% 以上，對多粘菌素E罕見耐藥;嗜麥芽窄食單胞菌對頭孢他啶、替卡西林/克拉維酸的耐藥率各為63.04%、52.17%，對復方新諾明、米諾環素及左氧氟沙星比較敏感。

銅綠假單胞菌和不動桿菌屬主要產生以下耐藥機制：①產β-內酰胺酶，兩者均可產生染色體介導的頭孢菌素酶（AmpC酶），某些抗生素的應用可能選擇出去抑制高產AmpC酶的突變株導致銅綠假單胞菌對哌拉西林、第三代頭孢菌素等多種抗生素耐藥。此外，該兩種菌尚可產生多種其他β-內酰胺酶以及絲氨酸或金屬碳青霉烯酶（IMP、VIM酶）等。②細菌外膜蛋白改變使抗生素進入細菌體內的量減少。③氨基糖苷類化酶導致此兩種細菌對多種氨基苷類抗生素耐藥。④喹諾類耐藥，兩種細菌均可發生拓撲異構酶ⅡgyrA或拓撲異構酶Ⅳ的parC突變，導致對喹諾酮類耐藥。⑤外排泵，位于細菌細胞膜上的外排泵可將β-內酰類、喹諾酮類，有時甚至氨基糖苷類等抗菌藥排出，導致細菌耐藥。由于嗜麥芽窄食單胞菌外膜低滲透性而對多種抗生素天然耐藥，并產生一種可引起亞胺培南耐藥、染色體介導的B類β-內酰胺酶（Bush3），即一種含鋅離子金屬β-內酰胺酶。該細菌對頭孢菌素類、碳青霉烯類、單環β-內酰胺類和氨基糖苷類抗生素均耐藥[4]。

銅綠假單胞菌由于其特殊的耐藥機制及膜孔蛋白的突變，所有抗菌藥物在延長治療期間可致該菌發展為耐藥，初代敏感菌株在開始治療后3～4天內可發展為耐藥株[5]，測試重復分離菌株的藥敏試驗具有重要意義，對碳青霉烯類的耐藥率已經超過20%，臨床治療目前提倡聯合用藥。鮑曼不動桿菌作為ICU院內感染和定植的主要菌，其多重耐藥性亦呈明顯上升趨勢。近年來，在ICU、燒傷、急診監護室及呼吸內科等病房的危重病人不斷出現的泛耐藥銅綠假單胞菌和不動桿菌，使得治療變得非常棘手，多粘菌素成為目前泛耐菌治療的最后一道防線。

綜上所述，對于臨床中的非發酵菌感染標本，微生物實驗室確定菌種后，應及時與臨床溝通進行藥物敏感性試驗，為臨床早期治療提供用藥依據，合理選擇用藥，延緩細菌耐藥，為患者爭取有利的治療時機。同時，通過藥物敏感試驗，發現細菌耐藥機制，對其進行流行病學追蹤監測，為臨床經驗治療調整用藥，針對細菌耐藥表型進行目標性藥物治療，定期修訂臨床抗菌譜內容，為醫院制訂預防措施提供依據[6]。根據不同的藥物敏感性及MIC值來聯合藥物治療等，具有重要的指導意義。

參考文獻：

[1]辜依海，張微，侯軒，等.2010-2019年某三級甲等醫院非發酵革蘭氏陰性桿菌的分布及耐藥性分析[J].中國藥房，2020，31（23）：2889-2894.

[2]孫艷婷，吳大瑋，王曉斐， 等.新建醫院ICU臨床分離菌的分布及耐藥變遷[J].山東大學學報（醫學版），2020，58（2）：64-71.

[3]叢玉隆，尹一兵，陳瑜.《檢驗醫學高級教程》[M].第一版.中華醫學電子音像出版社，2016.891

[4]張秀珍，朱徳妹.《臨床微生物檢驗問與答》[M].第2版.人民衛生出版社，2014.892

[5]倪語星，尚紅.《臨床微生物學檢與檢驗》[M].第4版.人民衛生出版社.2007.155

[6]張秀珍，朱徳妹.《臨床微生物檢驗問與答》[M].第2版.人民衛生出版社，2014.265