骨髓活檢聯(lián)合基因檢測在血液病診療中的應(yīng)用價值

袁曉婧 王勇強 朱晨雨 蘇東峰

【摘要】目的：針對骨髓活檢聯(lián)合基因檢測在血液病診療中的應(yīng)用價值進(jìn)行研究。方法：選擇2017年1月至2020年10月期間，醫(yī)院收治的60例血液病患者作為本次的研究對象，對患者實施骨髓活檢、基因檢測，針對檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性進(jìn)行對比分析。結(jié)果：骨髓活檢聯(lián)合基因檢測的血液病診斷準(zhǔn)確率為81.67%，骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查的診斷準(zhǔn)確率為71.67%，骨髓活檢、骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)及基因檢測診斷準(zhǔn)確率為96.67%，聯(lián)合檢測診斷準(zhǔn)確率明顯高于單獨方法檢測方法準(zhǔn)備率，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)、骨髓活檢聯(lián)合基因檢測、骨髓活檢+骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)及基因檢測骨髓增生Ⅲ級及以上檢出率分別為48.33%、91.67%、98.33%，骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)及基因檢測骨髓增生Ⅲ級及以上檢出率高于其他方法檢出率，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：在血液病的診斷檢查中，實施骨髓活檢聯(lián)合基因檢測，可以提高疾病的診斷準(zhǔn)確率，為患者的臨床診療提供有效的臨床診斷依據(jù)，可以進(jìn)行推廣實施。

【關(guān)鍵詞】血液病；骨髓活檢；基因檢測

【中圖分類號】R55. R446.8.【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A.【文章編號】2096-5249（2021）14-0159-02

在臨床治療中，血液病是常見疾病，屬于造血系統(tǒng)疾病，患者常見的癥狀為發(fā)熱、貧血、出血等[1]。在臨床診斷中，血液病的診斷為患者的治療提供依據(jù)和參考，所以臨床診斷技術(shù)的應(yīng)用和選擇非常重要。既往血液病診斷以細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查為主[2]，近幾年骨髓活檢技術(shù)在臨床上得到應(yīng)用，基因檢測技術(shù)也取得了一定的發(fā)展，該方法檢查過程安全，取材快捷、操作簡便、創(chuàng)傷小，檢測時間短，穿刺前先使用利多卡因凝膠涂抹于操作皮膚區(qū)域，減輕穿刺及活檢進(jìn)針至骨皮質(zhì)的痛感等優(yōu)勢[3]。文章就針對在血液病的診療中，骨髓活檢聯(lián)合基因檢測的應(yīng)用價值進(jìn)行分析，報道如下。

1？對象與方法

1.1.研究對象

選擇2017年1月至2020年10月，醫(yī)院收治的60例血液病患者作為本次的研究對象。其中男性患者33例，女性患者27例，年齡26～78（54.32±2.34）歲。

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）具有發(fā)熱、出血、骨關(guān)節(jié)疼痛、貧血等癥狀、貧血、乏力或血象異常等癥狀，均經(jīng)臨床檢查及實驗室檢查確診為血液病；（2）經(jīng)臨床檢查和實驗室檢驗確診為血液病；（3）無語言障礙、精神障礙等；（4）無嚴(yán)重心肝腎臟器疾病；（5）對本次研究知情，且自愿參與。

排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）不符合血液病診斷標(biāo)準(zhǔn)者；（2）精神疾病者；（3）嚴(yán)重心肝腎臟器疾病者，或其他嚴(yán)重臟器功能不全患者；（4）臨床資料不完整者；（5）不自愿、不依從者。

1.2.方法

對患者實施骨髓活檢、基因檢測。骨髓活檢使用環(huán)鉆法對患者的骨髓組織進(jìn)行采集，骨髓穿刺退針后，換用骨髓活檢針旁開骨髓穿刺區(qū)域0.5 cm后，環(huán)鉆法進(jìn)針至骨皮質(zhì)下固定，拔出活檢針芯，套入長（或短）接柱，然后進(jìn)行再順時針方向旋轉(zhuǎn)進(jìn)針約1.0 ～1.5 cm ，采集患者骨髓組織約1 cm，采取的骨髓組織使用4%的甲醛進(jìn)行固定，固定后使用乙醇對其進(jìn)行梯度脫水，脫水處理之后進(jìn)行塑料包埋。之后對制作的骨髓標(biāo)本進(jìn)行常規(guī)切片以及染色處理，完成之后，對其進(jìn)行鏡檢。

基因檢測有三種檢測方法，包括免疫學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)、分析生物學(xué)。抽取患者的外周血或者骨髓液3～5 mL，完成抽取之后立即將其抽取液放到肝素管內(nèi)進(jìn)行上下?lián)u動，接著使用直接法以及24 h培養(yǎng)法處理后，加入秋水仙素，使用氯化鉀進(jìn)行30 min的低滲，固定液固定之后，將其制作成細(xì)胞懸液進(jìn)行細(xì)胞核型的分析。免疫學(xué)分析通過不同類型以及不同階段的血液或者的免疫細(xì)胞的表達(dá)方式不同的抗原，進(jìn)行細(xì)胞的鑒定檢測。細(xì)胞遺傳學(xué)主要是通過染色體進(jìn)行分析，分子生物學(xué)在是進(jìn)行定性和定量分析。在實際的檢測中根據(jù)實際情況選擇合適的基因檢測方法進(jìn)行檢測。

1.3.觀察指標(biāo)

觀察和統(tǒng)計研究對象的不同方法，診斷準(zhǔn)確率，并分析僅采取細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查，骨髓活檢聯(lián)合基因檢測對患者的骨髓增生分型狀況。

1.4.統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 21.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析，計數(shù)資料用百分比（%）表示，采用χ2檢驗。P<0.05時差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2？結(jié)果

2.1.骨髓活檢聯(lián)合基因檢測血液性疾病檢測率比較

骨髓活檢聯(lián)合基因檢測的血液病診斷準(zhǔn)確率為81.67%，骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查的診斷準(zhǔn)確率為71.67%，骨髓活檢、骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)及基因檢測診斷準(zhǔn)確率為96.67%，聯(lián)合檢測診斷準(zhǔn)確率明顯高于單獨方法檢測方法準(zhǔn)備率，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2.診斷骨髓增生級別情況

骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)、骨髓活檢聯(lián)合基因檢測、骨髓活檢+骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)及基因檢測骨髓增生Ⅲ級及以上檢出率分別為48.33%、91.67%、98.33%，骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)及基因檢測骨髓增生Ⅲ級及以上檢出率高于其他方法檢出率，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表2。

3？討論

血液病是臨床常見病，有較高的發(fā)病率，其主要是造血免疫系統(tǒng)發(fā)生異常，造成血液細(xì)胞數(shù)量改變或者細(xì)胞功能缺陷。血液病的種類有很多，但是患者的臨床癥狀無較大的差異性，所以血液病的臨床診斷難度較大。

在血液病的檢查中，傳統(tǒng)的檢查方法為細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查，該檢查方法操作簡單，診斷準(zhǔn)確率較高，而且細(xì)胞形態(tài)清晰可見。但是其在血液病的檢測中存在一定的局限型，例如不能完全的呈現(xiàn)骨髓造血的全貌，增加診斷的難度，無法對原始細(xì)胞異位、造血細(xì)胞異常等進(jìn)行診斷。隨著臨床檢驗的發(fā)展，骨髓活檢、基因檢測技術(shù)相繼在臨床檢測中得到應(yīng)用，骨髓活檢的產(chǎn)生將傳統(tǒng)的細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測的不足進(jìn)行了彌補，通過切片可以清楚的了解骨髓的增殖情況，可以觀察患者的骨髓組織、血管等關(guān)系，便于對患者的病情進(jìn)行評估，為患者后期的治療提供依據(jù)。基因檢測有多種檢測方法，例如免疫學(xué)檢查、生物學(xué)檢查、細(xì)胞遺傳學(xué)檢查等，可以通過一系列的檢查對不同階段的細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記，使用不同的抗原體對不同的細(xì)胞進(jìn)行分類，準(zhǔn)確的掌握細(xì)胞的分化階段，對細(xì)胞的良惡性進(jìn)行鑒別；細(xì)胞遺傳學(xué)的檢測通過染色體進(jìn)行鑒別診斷，在某些血液病的診斷中有臨床應(yīng)用價值[4-5]；生物學(xué)進(jìn)行定性、定量檢查，對疾病進(jìn)行確診分型、病情評估等。

在血液病的檢查中，使用骨髓活檢聯(lián)合基因檢測，在一定程度上可以提高疾病的診斷準(zhǔn)確率。文章針對骨髓活檢聯(lián)合基因檢測在血液病診療中的應(yīng)用價值進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示，骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)的檢出率顯著的低于骨髓活檢聯(lián)合基因檢測的檢出率（P<0.05），由此說明聯(lián)合檢測有較高的疾病檢出率。究其原因，在血液病的檢查中，實施骨髓活檢聯(lián)合基因檢測，可以實現(xiàn)血液病的檢測從細(xì)胞形態(tài)學(xué)上升到生物學(xué)，不僅可以實現(xiàn)對疾病的檢出，還可以對疾病的生物學(xué)特征進(jìn)行分析，在患者疾病的臨床治療中有較高的應(yīng)用價值。骨髓活檢聯(lián)合基因檢測，整個檢查過程安全，取材方便，操作簡單，對患者產(chǎn)生的創(chuàng)傷小，而且檢測時間短，在一定程度上減少了反復(fù)骨髓穿刺給患者帶來的痛苦，檢測的結(jié)果準(zhǔn)確性也較高[6]。近幾年在各種因素的影響下，血液病的發(fā)病率呈現(xiàn)升高的趨勢，血液病的臨床診斷工作的重要性逐漸的突顯，如果實施骨髓活檢聯(lián)合基因檢測，可以實現(xiàn)一些血液病的早診斷、早發(fā)現(xiàn)、早治療[7]。從本次的研究結(jié)果可以得出，在血液病的檢查中骨髓活檢聯(lián)合基因檢測，診斷的準(zhǔn)確率較高。采用骨髓活檢聯(lián)合基因檢測較采用骨髓穿刺抽取骨髓液檢查和細(xì)胞形態(tài)學(xué)診斷的傳統(tǒng)檢測相比，可減少患者因復(fù)查反復(fù)多次骨髓穿刺操作的痛苦，為后期治療提供依據(jù)，并且可有效提高血液病診斷準(zhǔn)確率，為臨床醫(yī)師及時確診疾病及制定治療方案提供精準(zhǔn)信息，已確診患者可通過此項目定期復(fù)查，從免疫學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)、分子生物學(xué)層面上確定疾病的危險分層、治療效果、疾病進(jìn)展速度，判斷預(yù)后，以及治療后復(fù)查時間周期，對血液疾病的精準(zhǔn)診斷及治療具有重要意義[8-9]。

綜上所述，在血液病的檢查中可以采用骨髓活檢聯(lián)合基因檢測，操作簡單方便，對患者造成的創(chuàng)傷小，檢測時間短，檢測準(zhǔn)確性高，可以為血液病患者的臨床診斷和治療提供有效的診斷依據(jù)，可以在臨床上進(jìn)行推廣實施。

參考文獻(xiàn)

[1] 李白，孟慶磊，劉健，等.重組人凝血因子Ⅶa治療兒童血液病嚴(yán)重性和難治性臨床出血事件的療效觀察[J].中國小兒急救醫(yī)學(xué)，2019，26（5）：390-393.

[2] 陳國軍.骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗聯(lián)合免疫分型及細(xì)胞遺傳學(xué)在急性早幼粒細(xì)胞白血病中的診斷價值[J].遼寧醫(yī)學(xué)雜志，2020（4）：27-30.

[3] Reed L J ，Raghupathy R ，Strakhan M ，et al.The OnControl bone marrow biopsy technique is superior to the standard manual technique for hematologists-in-training：a prospective，randomized comparison[J]. Hematology Reports，2011，3（3）：e21.

[4] Boer E N D，Wouden P E V D，Johansson L F，et al.A next-generation sequencing method for gene doping detection that distinguishes low levels of plasmid DNA against a background of genomic DNA[J].Gene Therapy，2019，26（7-8）：338-346.

[5] 袁曉婧.骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)聯(lián)合骨髓活檢和基因檢測在血液病診療中的應(yīng)用研究[J].醫(yī)藥前沿，2019，9（13）：74-75.

[6] 閆慧霞.活檢與骨髓細(xì)胞學(xué)相結(jié)合在現(xiàn)代血液病診斷中的價值分析[J].醫(yī)學(xué)檢驗與臨床，2020，31（7）：58-60.

[7] 龍君.對比研究骨髓涂片及骨髓活檢在血液病診斷中的 應(yīng)用價值[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2018，16（5）：84-85.

[8] 蔣顯勇，申浩睿，葛昌文，等.形態(tài)學(xué)在彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤骨髓侵犯診斷中的作用[J].中國實驗血液學(xué)雜志，2019，27（2）：123-127.

[9] 范賢斌，徐志，邵水兒，等.骨髓印片聯(lián)合骨髓涂片檢查在血液病診斷中的應(yīng)用效果[J].中國鄉(xiāng)村醫(yī)藥，2019，26（18），54-55.