HPLC 法同時測定心可舒膠囊中木香烴內酯和去氫木香內酯的含量

董曉茜，鄢長余，于遠洋

（1 遼寧省中醫藥研究院，遼寧 沈陽；2 大連市檢驗檢測認證技術服務中心，遼寧 大連）

0 引言

心可舒膠囊是由丹參、葛根、三七、山楂、木香五味藥材制成的復方制劑，具有活血化瘀、行氣止痛的作用。在臨床中，經常用于治療氣滯血瘀型冠心病引起的胸悶、頭痛、高血脂等癥[1]。該制劑現行質量標準收載于《衛生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊，僅有性狀、木香和丹參的薄層鑒別項，無法很好的控制其投料的藥材質量。因此本實驗參考中國藥典《2015》年版一部[2]木香項下及其相關文獻[3-6]對木香中的指標性成分木香烴內酯和去氫木香內酯建立了含量測定方法。結果表明該方法可以對木香的藥材質量進行控制。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Waters2489/2695 液相色譜儀；Sartorius BP211D、SartoriusBP221S 電子天平。

1.2 試劑與試藥

木香烴內酯（111524-201509 99.0%）和去氫木香內酯（111525-201912 99.5%）對照品均來自中國食品藥品檢定研究院；甲醇為色譜純，水為超純水。

2 方法與結果

2.1 含量測定

2.1.1 色譜條件

采用Agilent Extend-C18（4.6mm×250mm，5μm）色譜柱，以甲醇-水(65 ∶35)；檢測波長:225nm；流速:1.0ml/min；柱溫:30℃。

2.1.2 溶液的制備

2.1.2.1 對照品溶液

精密稱取木香烴內酯和去氫木香內酯對照品，加甲醇制成每1ml 含20μg 的溶液。

2.1.2.2 供試品溶液

取本品內容物，研細，混勻，取約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理40min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.1.2.3 陰性樣品溶液

取缺木香的陰性樣品，按“2.1.2.2”項下的方法制備陰性樣品溶液并進行測定，記錄色譜圖，結果陰性無干擾。

2.2 方法學驗證

2.2.1 線性范圍的考察

精密吸取木香烴內酯和去氫木香內酯對照品溶液，分別制成每1ml 含5μg、10μg、20μg、40μg、80μg、100μg 的溶液。在上述色譜條件下分別進樣測定。以質量濃度（X，mg/ml）為橫坐標，峰面積（Y）為縱坐標，繪制標準曲線，得木香烴內酯和去氫木香內酯的回歸方程分別為Y=584113026X-1915（R2=0.9999）和Y=408213776X-2033（R2=0.9999），分別在0.05-0.99μg 和0.05-1.02μg(R2=0.9999)范圍內線性良好。

2.2.2 精密度考察

取同一供試品溶液連續進樣6 次，測得木香烴內酯和去氫木香內酯峰面積的RSD 分別為0.5%和0.8%。結果表明，儀器精密度良好。

2.2.3 穩定性考察

取同一供試品溶液，分別于0h、2h、4h、6h、12h、24h 進樣測定。結果顯示木香烴內酯峰面積的RSD 為0.6%、去氫木香內酯峰面積的RSD 為0.2%。表明供試品溶液中兩種物質均在24h 內穩定性良好。

2.2.4 重復性考察

取同一批供試品，平行制備6 份供試品溶液，測定，記錄各組分色譜峰面積。木香烴內酯和去氫木香內酯含量測定結果的RSD 分別為0.2%和0.3%。

2.2.5 加樣回收率試驗

取已知含量的心可舒膠囊約0.25g，精密稱定，共9 份，分別加入木香烴內酯和去氫木香內酯對照品母液1ml、2ml、3ml，按“2.1.2.2”項下方法制備供試品溶液，測定，計算加樣回收率(表1、表2)。木香烴內酯和去氫木香內酯的平均回收率(n=9)分別為98.8%和99.5%，RSD 分別為1.5%和1.4%。

表1 木香烴內酯加樣回收率試驗結果(n=9)

表2 去氫木香內酯樣回收率試驗結果(n=9)

3 討論

（1）本實驗為了兼顧木香烴內酯和去氫木香內酯的熱不穩定性，選擇了超聲處理提取方式[7-10]。比較了無水乙醇、甲醇、70%甲醇作為提取溶劑，結果表明甲醇提取效率較高，并考察提取溶劑的體積和超聲時間，根據測定結果，最終選擇甲醇溶液50ml 超聲處理40min 作為供試品溶液的提取方法。

（2）參考文獻[2]中木香含量測定項下的流動相，并查閱了相關文獻[11-13]，對甲醇-水和甲醇-0.1%磷酸溶液等系統進行了研究，結果表明酸的加入對兩種對照品的峰形、分離度、出峰時間等并無明顯區別，故而選擇甲醇-水流動相系統。