減少非洲豬瘟病毒接觸后發病的 “五分”策略

朱中平朱 敏彭 堯

（1湖南加農正和生物技術有限公司，湖南長沙 410329；2PSY應用研究院，湖南長沙 410329）

傳統生物安全防控非洲豬瘟的模式可能已經“失靈”。傳統生物安全的內涵是堵住病毒不進入豬場圍墻之內，于是便有了“鐵桶”防控非洲豬瘟的模式。圍墻或“鐵桶”防控非洲豬瘟具有一定的合理性和重要性，俗話說“只有千日做賊，哪有千日防賊”道出了傳統生物安全的“難言之隱”。根據大量檢測數據分析發現，豬場內的非洲豬瘟病毒可能來自引進的豬只，尤其是基因缺失毒株感染的引進豬，往往感染30 d才可以檢測到，在引進時對非洲豬瘟抗體進行檢測可能是抗原抗體反應“雙陰性”，但實際上已經被非洲豬瘟病毒隱性感染了。此外，豬場內病毒還可能來自菜市場、屠宰場和拉豬車等，據樊福好研究員在會議講課中報道，在菜市場隨機抽檢的菜品及地面垃圾中，非洲豬瘟病毒的檢出率高達80%。因此，非洲豬瘟病毒可能會在“不知不覺”中進入豬場。而且，非洲豬瘟病毒基因缺失毒株感染的豬只表現發病晚、臨床癥狀不典型、病毒隱蔽性強，往往在豬只出現癥狀時，已經有大批豬只感染了病毒，精準清除等“拔牙”措施為時已晚。

1 如何應對豬場內 “低烈度”病毒的存在

既然病毒隨時都會突破傳統的圍墻或“鐵桶”生物安全防控屏障，那么，養豬企業就要思考如何在豬場存在“低烈度”病毒的情況下阻止豬群不感染病毒，甚至是感染病毒而豬不發病的防控措施。一般病毒入侵豬體要經過3個“關口”，如果能夠做好防控，增加病毒闖過這些“關口”的難度，病毒自然就會“知難而退”，最終再通過日常的嚴格消毒將病毒消滅。

1.1 第一關，病毒怎樣進入豬體

豬體完整的皮膚黏膜對于非洲豬瘟病毒來說就是一道堅不可摧的“長城”，體型“巨大”的非洲豬瘟病毒難以通過完整的皮膚進入豬體內。如果豬體有傷口，則病毒很容易侵入。

1.2 第二關，病毒如何進入細胞

當病毒進入豬體內后，會被豬體的免疫系統識別，觸發非特異性免疫而被吞噬細胞消滅。同時，體液中的抗體會粘附在病毒顆粒表面，并且互相結合，把單個微小的病毒聚合在一起，由巨噬細胞對病毒進行吞噬和分解。

1.3 第三關，找到細胞核

在微觀環境上，豬體細胞的體積比病毒大800萬倍。“無手無腳”不能自主運動的病毒在較大的空間中尋找細胞核，純憑“瞎貓遇上死耗子”般的運氣，不是一件容易的事情。豬的細胞中有溶菌酶、免疫球蛋白等各種免疫物質，并會對病毒進行包裹和殺傷。進入到細胞內部的絕大多數病毒終其一生都未找到細胞核。病毒想感染豬體，只能依靠足夠多的數量去“碰運氣”。

2 “非洲豬瘟病毒+豬≠非洲豬瘟”

據中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所仇華吉研究員在2021年5月南昌召開的“生物安全”大會上報道，在試驗豬場，用非洲豬瘟活毒模擬自然感染豬只15 d后，檢測豬的血液、鼻拭紙和肛門拭紙，病毒抗原均為陰性，但環境病原檢測為陽性。說明非洲豬瘟病毒和豬共存的環境不等于會發生非洲豬瘟疫情。可以說豬群環境中存在非洲豬瘟病毒，甚至豬的皮膚上存在病毒，豬也不一定表現非洲豬瘟疫病的癥狀。因此，豬群處在非洲豬瘟病毒污染的環境中發生非洲豬瘟疫情，還需要其他條件的配合。根據以往經驗，列舉“非洲豬瘟病毒＋豬≠非洲豬瘟”的一些條件，為存在“低烈度”非洲豬瘟病毒的豬場防控非洲豬瘟提供參考。

2.1 非洲豬瘟病毒與豬接觸需要一定的量才能使豬發病

非洲豬瘟病毒感染豬只需要一定的病毒數量才能使其發病，據中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所報道[1]，感染不同劑量非洲豬瘟病毒分離株的田間試驗發現，非洲豬瘟病毒數量達102HAD50才能具有致病性。

2.2 非洲豬瘟病毒與豬接觸需要有利于病毒存活的環境條件

非洲豬瘟病毒必須在宿主活的細胞內才能復制，存在于環境中的病毒只能隨著時間的推進不斷減少。病毒本身在環境中不能長久生存，在有利的環境下，病毒半衰期會長一些。而在不利的環境（強酸、強堿）下，病毒的半衰期會大大縮短。如表1、表2和表3所示[2]，非洲豬瘟病毒怕高溫、怕干燥、怕強酸強堿。

表2 非洲豬瘟病毒在不同環境下的存活時間 [2]

表3 非洲豬瘟病毒在原料中30 d的適應性 [2]

2.3 不同接觸途徑感染發病所需病毒數量差異顯著

非洲豬瘟病毒主要感染途徑是口鼻或鼻咽，然后通過經扁桃體或胃腸道進入豬體內。ASFV的pH值耐受范圍是3.9～13.4[3]，而胃酸環境pH值是1.0～3.5，因此，非洲豬瘟病毒在胃腸道中引起感染的可能性不大。飲水（液體介質）為病毒與扁桃體接觸提供了理想的基質，病毒在扁桃體內復制。飼料（固體介質）可抑制病毒與扁桃體接觸，減少病毒在胃腸道前暴露于淋巴和上皮組織，因此飲水方式更容易使豬感染非洲豬瘟病毒。有研究表明[4]，在飲水途徑中，非洲豬瘟病毒的最小感染劑量是100TCID50；飼料途徑中，病毒的最小感染劑量是104TCID50。因為飼料可能刺激唾液蛋白酶降解病毒（見表4）。此外，飼料中的物質可能包裹病毒而抑制其與扁桃體接觸，減少病毒在進入胃腸道前暴露給淋巴組織和上皮組織。總體來說，在飼料和水中，ASFV的感染可能性隨著劑量的增加而升高。當病毒多次暴露時，飲水和飼料在各個劑量水平的感染率都會顯著增加。

表4 非洲豬瘟病毒在不同介質中的傳播和感染特性

2.4 豬非特異性免疫是阻止非洲豬瘟病毒感染的“阻燃劑”

當非洲豬瘟病毒進入豬體后，病毒會被豬體免疫系統識別，觸發非特異性免疫。體液中的抗體會粘附在病毒顆粒表面，并且互相結合，把單個微小的病毒聚合在一起，由巨噬細胞進行吞噬和分解。有少量病毒侵入黏膜系統時，可以通過提高豬體的非特異性免疫機制而被機體清除掉。

2.5 豬群應激是非洲豬瘟病毒感染的 “催化劑”

從嚴格意義上講，非洲豬瘟病毒不依靠空氣傳播，非洲豬瘟病毒粒子大小為170～215 nm，無法進入正常的細胞。如果豬只的皮膚、天然孔黏膜屏障、細胞結構完整，巨型的非洲豬瘟病毒粒子無法感染豬只，而傷口、應激、血液是非洲豬瘟病毒直接接觸傳播的最主要途徑。如圖1所示，豬群存在應激時，會產生大量自由基，從而破壞黏膜的通透性；應激會減少黏膜血液供應，改變黏膜形態；應激會使免疫球蛋白減少，從而破壞黏膜功能。因此，應激發生時，由于黏膜緊密性形態改變、防御功能下降以及通透性增加，為非洲豬瘟病毒的入侵打開了“方便之門”。

圖1 應激破壞黏膜的途徑

2.6 “幫兇”性疾病的感染是非洲豬瘟病毒感染發病的 “助燃劑”

臨床發現，豬藍耳病、豬偽狂犬病以及腸道病毒性疾病的發病與非洲豬瘟感染高度重疊。從發病機制上看，如圖2，一方面是豬藍耳病、豬偽狂犬病以及腸道病毒性疾病的發生降低了豬群的非特異性免疫力，另一方面是這些疾病的發生破壞了豬體黏膜的物理屏障功能。

圖2 “幫兇”性疾病的感染與非洲豬瘟病毒窗口期重合

3 小結

綜上所述，讓非洲豬瘟病毒不接觸到豬是一個理想的防控非洲豬瘟疫情的策略，但在萬一非洲豬瘟病毒突破圍墻、“鐵桶”屏障進入豬場的情況下，豬場也決不可“坐以待斃”，必須“以豬為本”筑起一道道物理性、生物性屏障，如通過強化豬場的“五分”，防止場內病毒交叉感染和病毒載量升高。其中“五分”分別為①分區：嚴格區分臟區、灰區和凈區；②分人：嚴格控制不同崗位人員的流動，嚴禁串舍；③分路：嚴格劃分人走的路、豬只單向流動的路、糞便流向及處理路徑；④分物：嚴格執行一次性使用物品的及時銷毀，重復使用物品的及時清洗消毒；⑤分度：嚴格消毒的程序和時間，例如人洗澡手泡藥時間，物料的熏蒸時間和熏蒸濃度，車清洗的清潔度。規模化豬場要做到工作職責不交叉、行走路線不交叉、洗消工具不交叉。并且，通過抗應激和清除“幫兇”等方法，保護豬的黏膜屏障，讓非洲豬瘟病毒無從下口，從而提升豬的非特異性免疫力、增強豬的抗感染能力。最后通過筑起的一道道屏障，使得“非洲豬瘟病毒＋豬≠非洲豬瘟”的“不等式”能夠成立。