FASN、Runx2在老年腦膠質瘤患者中表達及與臨床病理特征、預后生存的相關性

李忠華 彭臻 李勁松 王勇

(1百色市人民醫院腦科，廣西 百色 533000；2貴州醫科大學第三附屬醫院神經外科)

腦膠質瘤是由神經外胚葉衍化而來的膠質細胞發生的腫瘤，是顱內腫瘤中最常見的一種疾病，在膠質瘤中以星形細胞瘤最為常見，好發于老年人〔1〕。早期腦膠質瘤患者可無明顯癥狀，容易延誤最佳治療時機；且該病惡性程度高，臨床治療難度大，生存率低，嚴重威脅患者的生命安危〔2〕。隨著細胞與生物分子研究的開展，腦膠質瘤與轉移的分子機制與腫瘤治療新靶點引起廣泛關注〔3〕。

脂肪酸合成酶(FASN)存在于脂質合成代謝活躍及激素敏感型細胞中；相關研究表示其與腫瘤的轉移、增殖、凋亡等方面密切相關，在乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌等多種癌癥中呈高表達狀態〔4〕。而人類runt相關轉錄因子(Runx)2基因是近年來臨床研究中新發現的成員，已被確定為腫瘤抑制基因，其與腦膠質瘤的關系一直是研究的熱點〔5〕。本研究擬分析老年腦膠質瘤患者FASN、Runx2的表達情況及與病理特征、預后生存的相關性。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年6月至2018年6月于百色市人民醫院病理科進行收集手術切除的67例老年腦膠質瘤組織及相關臨床資料，納入標準：①研究對象均明確病理；②診療前未行相關治療干預。排除標準：①存在血液系統異常者；②存在肝癌、胃癌等惡性腫瘤者；③中途退出研究者。最終65例符合本次研究，其中男30例，女35例，平均年齡(68.71±3.82)歲。同時選取同期50例本院病理科保存的腦膠質瘤癌旁相對正常標本及相關臨床資料，所有患者臨床資料完整，將其作為對照組，男26例，女24例，平均(68.75±3.79)歲。兩組基線資料對比無顯著差異(P>0.05)。

1.2研究方法 收集所有患者臨床資料，比較FASN、Runx2在各組的表達情況；分析FASN、Runx2與老年腦膠質瘤患者各病理參數的相關性，并對患者進行追蹤隨訪，統計2年內(截止于2020年6月30日)預后情況，分析影響老年腦膠質瘤患者預后生存的危險因素及預測價值。

1.3儀器與試劑 SP試劑盒(北京中杉金橋生物技術有限公司)、磷酸鹽緩沖液(PBS，北京賽默飛世爾生物化學制品有限公司)、FASN、Runx2兔抗人多克隆抗體(美國Santa Crutz公司)。

1.4檢測方法 檢測FASN、Runx2蛋白：SP法〔6〕，石蠟切片、烘烤、脫蠟，浸泡、沖洗。采用酶阻斷劑對其進行滴加，于溫室內孵育并清洗。而后再次滴加聚合物，于溫室孵育。另一組人群一抗采用PBS，將二抗滴入室溫孵育。蘇木精復染，脫水，封片。

1.5結果判定 FASN、Runx2蛋白的免疫組織學結果判定〔7〕：根據陽性細胞百分比、染色強度綜合判定，陽性細胞數量及染色程度由少(無染色)至多(棕褐色)計0～3分。細胞數量+染色程度得分之和判斷高低表達情況，≤3分為低表達，4～6分為高表達。

1.6統計學方法 采用SPSS22.0軟件進行χ2檢驗、t檢驗及多元Logistic回歸分析和受試者工作特征(ROC)曲線分析。

2 結 果

2.1兩組FASN、Runx2表達比較 研究組FASN、Runx2高表達率高于對照組，差異有統計學意義(P<0.001)，見表1，圖1。

表1 兩組FASN、Runx2表達情況比較〔n(%)〕

圖1 免疫組化染色(×400)

2.2FASN、Runx2與患者臨床病理因素的關系 老年腦膠質瘤患者FASN、Runx2水平與組織分化類型、組織學分級、遠處轉移有關(P<0.05)，與年齡、腫瘤直徑、病理類型、腫瘤部位等無關(P>0.05)，見表2。

表2 FASN、Runx2與患者不同病理參數的關系(n)

續表2 FASN、Runx2與患者不同病理參數的關系(n)

2.3老年腦膠質瘤患者2年內預后情況 2年隨訪發現，生存46例，死亡19例，預后不良率為29.23%。

2.4生存組與死亡組FASN、Runx2表達比較 死亡組FASN、Runx2高表達率高于生存組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 生存組與死亡組FASN、Runx2表達比較〔n(%)〕

2.5影響患者預后生存的因素 影響患者預后的因素與組織中低分化、組織學分級Ⅲ+Ⅳ、FASN、Runx2高表達有關(P<0.05)。見表4。

表4 影響老年腦膠質瘤患者預后生存的單因素、多因素分析

2.6FASN、Runx2蛋白對老年腦膠質瘤患者預后的預測價值 采用ROC曲線分析FASN、Runx2蛋白及兩者聯合對老年腦膠質瘤患者預后的預測價值，以FASN、Runx2聯合曲線下面積最大，故預測價值最佳。見表5，圖2。

表5 FASN、Runx2蛋白對老年腦膠質瘤患者預后的預測價值

圖2 FASN、Runx2蛋白對老年腦膠質瘤患者預后的預測價值

3 討 論

腦膠質瘤是一種嚴重威脅人類健康的惡性腫瘤，隨著社會老齡化程度的加劇和生活方式的改變，該癥發病率和死亡率呈逐年上升趨勢〔8〕。隨著外科技術及放療和化療藥物的進展，腦膠質瘤的治療方法有了一定進展，但部分患者治療效果仍不理想，預后較差〔9〕。因此，老年腦膠質瘤患者的早期診斷、有效治療至關重要〔10〕。

相關學者表示，該疾病的進展與多基因、多細胞共同作用有關。其中，FASN定位于染色體19q22上，全長50 kb，有3個外顯子和3個內含子，3個轉錄起始位點和2個啟動子〔11〕。研究表明其直接影響著脂肪酸合成酶多寡，對控制體內體脂沉積具有重要意義；同時，FASN已被證明在腫瘤中起抑癌作用〔12〕。有關FASN在腫瘤方面的報道主要集中在其作為腫瘤抑制基因抑制乳腺癌、甲狀腺癌、腦膜瘤等的進展，而在老年腦膠質瘤方面的研究報道甚少〔13〕。本研究結果提示FASN在老年腦膠質瘤中起抑癌作用，抑制前列腺癌進展。同時，本研究結果顯示FASN表達水平與組織分化類型、組織學分級關系密切。分析其原因可能為：FASN能夠上調血管內皮生長因子和微血管密度的表達，且FASN基因可抑制細胞凋亡，但一旦FASN發生變異，會增加細胞，減少凋亡機制，促進癌細胞的表型轉化和增殖，增加了腫瘤的侵襲行為，因此其高表達狀態可導致高組織分級及組織低、中分化〔14〕。

Runx2是Runx轉錄因子家族成員的重要組成部分〔15〕。不僅在成骨細胞早期增殖過程中起作用，也在成骨細胞的分化成熟過程中發揮重要作用〔13，16〕。Alves等〔17〕研究發現，Runx2的表達與其在乳腺癌微鈣化形成關系密切。研究發現，Runx2表達水平對腫瘤病理參數及生物學效應作用具有一定臨床意義〔18〕。而本研究結果說明Runx2與腦膠質瘤患者進展關系密切，可為未來臨床診治提供有效參考依據。此外，本研究利用ROC曲線證實臨床可通過聯合檢測Runx2與FASN蛋白提高對患者預后的研究作用。另本研究納入患者例數較少，年限過短，可能在結果表示上存在一定誤差，后續筆者將對老年腦膠質瘤患者Runx2與FASN蛋白的關系進行深入研究。

綜上，老年腦膠質瘤患者FASN、Runx2呈高表達狀態；FASN、Runx2與患者預后生存關系密切，可作為預測老年腦膠質瘤患者預后的分子標志物和腫瘤治療的潛在靶點。