贛南地區孕期婦女ɑ、β地中海貧血分子流行病學回顧性分析

劉聰，鄒翠翠，劉婷，肖德俊，鄒淑慧，張麗琴

（贛州市人民醫院檢驗科分子實驗室，江西 贛州 341000）

地中海貧血（簡稱地貧）是一組由于珠蛋白基因突變所致的常染色體隱性遺傳病，主要表現類型為ɑ地貧和β地貧。其中廣西、廣東、海南和香港等地是該病高發區[1]。研究報道廣西、廣東人群中地貧基因攜帶率分別達23.98%、11.07%[2]，該病也被世界衛生組織列為危害人類健康的6 種常見病之一[3]。由于各地區產前診斷與遺傳咨詢條件差異，每年地貧患兒出生率不低于2.4‰[4]。重型及中間型ɑ和β地中海貧血可致殘或致死，且無治愈的方法，給整個社會造成極大的經濟負擔，因此對孕期婦女進行地貧基因檢測尤為重要，可大大降低地貧患兒出身率。本研究回顧性分析來本院產檢的475例孕婦地貧攜帶率及基因型，為開展遺傳咨詢及產前診斷提供理論依據，從而達到降低甚至杜絕地貧患兒的出生，對提高該地區人口素質具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 標本來源 2017年4 月-2018年12 月來本院產檢的孕婦475例，平均年齡為28.68±5.26 歲，用EDTA 抗凝管采集外周血2ml，就診患者全是贛州本地人，簽訂了知情同意書。

1.2 儀器與試劑 深圳亞能生物技術有限公司提供全血基因組DNA 檢測試劑盒，PCR 儀采用杭州博日科技有限公司提供的TC型基因擴增儀，深圳亞能生物技術有限公司提供的ɑ、β地中海貧血基因檢測試劑盒及YNH-16 恒溫雜交儀，安徽中科中佳科學儀器有限公司提供的高速冷凍離心機。

1.3 實驗方法 全血基因組DNA 提取（深圳亞能生物技術有限公司試劑盒操作規程），ɑ地貧和β地貧均采用PCR-反向斑點雜交法，具體步驟均按照深圳亞能生物技術有限公司提供試劑盒說明書操作。ɑ地貧檢測三種ɑ 缺失（-SEA/ɑɑ、-ɑ3.7/ɑɑ、-ɑ4.2/ɑɑ）、三種ɑ 突變（ɑɑ/ɑQSɑ、ɑɑ/ɑCSɑ、ɑɑ/ɑWSɑ），β地貧檢測17 種突變（41-42M、654M、-28M、71-72M、17M、βEM、IVS-I-M、IVS-I-5M、27/28M、43M、-29M、-30M、31M、-32M、14-15M、IntM和CAPM）。

2 結果

2.1 ɑ地貧基因類型及其分布 檢測的475例標本中，缺失型ɑ地貧共187例，攜帶率為39.37%(187/475),其中--SEA/ɑɑ152例，ɑɑ/-ɑ3.721例，ɑɑ/-ɑ4，210例，ɑ4.2-/--SEA2例，ɑ3.7-/--SEA1例，ɑ3.7-/-ɑ3.71例，見表1。

表1 缺失型ɑ-地貧基因型頻率

2.2 突變型ɑ地貧共6例，攜帶率為1.26%（6/475）其中ɑWSɑ/ɑɑ1例，ɑQSɑ/ɑɑ4例，ɑCSɑ/ɑɑ1例，見表2。

表2 突變型ɑ-地貧基因型頻率

2.3 β地貧基因突變類型及其分布 突變型β地貧共85例，攜帶率為17.89%（85/475）,其中654M/N 30例,41-42M/N 29例，28M/N 11例，17M/N 10例，βM/N 1例，27-28M/N 3例，14-15M/N 1例，見表3。

表3 突變型β-地貧基因型頻率

圖1 缺失型ɑ-地貧結果圖

2.4 ɑ、β 復合型地貧攜帶率 ɑ、β 復合型地貧共11例，攜帶率為2.32%（11/475）,其中--SEA/ɑɑ 復合654M/N 6例；--SEA/ɑɑ 復合41-42M/N 2例；ɑQSɑ/ɑɑ復合41-42M/N 1例；ɑɑ/-ɑ3.7復合654M/N 2例，見表4。

表4 ɑ、β 復合型地貧基因型頻率

2.5 475例患者地貧基因類型匯總表 缺失型ɑ地貧共187例，攜帶率為39.37(187/475)；突變型ɑ地貧共6例，攜帶率為1.26%（6/475）；突變型β地貧共85例，攜帶率為17.89%（85/475）；ɑ、β 復合型地貧共11例，攜帶率為2.32%（11/475），見表5。

表5 475例患者地貧基因類型匯總表

3 討論

圖2 突變型ɑ-地貧結果圖

圖3 突變型β-地貧結果圖

地中海貧血是遺傳性慢性溶血性貧血癥的一種，危害較大，臨床出現率較高[6]。主要分為ɑ和β兩種類型，ɑ地貧是由于ɑ 珠蛋白編碼基因的突變而導致肽鏈表達失衡引起,其類型主要有--SEA/ɑɑ、ɑɑ/-ɑ3.7、ɑɑ/-ɑ4，2等[7,8]。β地貧分子基礎是位于人類11 號染色體中的兩個β 珠蛋白基因發生突變,導致β 珠蛋白合成障礙,主要有IVS-Ⅱ-654、CD41/42、CD17 等類型。如果夫妻雙方為同型地貧則有可能造成子代的重型地貧[9,10]。重型ɑ地貧可通過B 超檢測到，且這種患兒在妊娠末期或出生30 分鐘內會死亡；重型β地貧則要在出生6 個月以后才會出現癥狀，患兒會出現嚴重發育不良，發育遲緩，出現中度或中度貧血，需要長期輸血才能維持生命，多在童年時期會夭折。輕型或靜止型地貧攜帶者直接觀察無法發現貧血癥狀，臨床癥狀也不明顯，如不通過血液檢查，則可能出現漏診[11,12]；當夫妻雙方為同種類型基因攜帶者時，則有25%概率生育出中型或重型地貧患兒[13-15]，因此在產前進行地貧基因檢測尤為重要，此舉可大大降低地貧患兒出生率，提高整個贛南地區人口素質。

本研究通過檢測分析475例孕婦地中海貧血基因情況，檢測結果有ɑ地貧、β地貧及ɑβ 復合地貧,其中ɑ地貧(ɑ 缺失及ɑ 突變)共193例（40.63%），β地貧共85例（17.89%），ɑβ 復合地貧共11例（2.32%），由此得出在贛南地區ɑ地貧比重最高,主要基因型為--SEA/ɑɑ（東南亞型），β地貧以IVS-Ⅱ-654 最為常見，ɑβ 復合地貧主要為--SEA/ɑɑ/IVS-Ⅱ-654基因型。

本研究分析了贛南地區ɑ、β地中海貧血基因攜帶率、主要基因型，為今后該地區產前診斷及遺傳咨詢提供理論依據，可大大降低地貧患兒出生率，從而提高該地區人口素質具有重要意義。