不同克氏原螯蝦養殖模式下幼蝦生長、體成分和血淋巴生化指標的比較

徐 濱，魏開金，馬寶珊，徐 進，朱祥云，劉 偉

(中國水產科學研究院長江水產研究所，農業農村部淡水生物多樣性保護重點實驗室，武漢 430223)

養殖模式指在某一特定條件下，使養殖生產達到一定產量而采用的經濟與技術相結合的規范化養殖方式。由于養殖模式的不同，在生長特性和品質特性上會有所差異[1]。養殖模式會影響養殖對象的生存對策，同時也會改變其生命代謝特征[2-3]。生長性能、體成分、血清生化是衡量水產養殖動物健康程度的重要指標，也是其生存狀況、生命代謝的重要依據[4-5]，對比不同養殖模式生長性能、體成分、血清生化指標，揭示由養殖模式引起的生存對策、生理代謝的變化本質，對推進水產動物的健康高效養殖具有重要意義。

克氏原螯蝦(Procambarusclarkii)俗稱小龍蝦，屬甲殼綱十足目螯蝦科原螯蝦屬，原產于墨西哥北部和美國南部，是我國重要的經濟水產養殖對象之一，也是目前淡水蝦類增養殖的主要品種[6-7]。近年來，國內外學者對克氏原螯蝦的關注與研究較多[8-12]，同時隨著克氏原螯蝦價格的提高、養殖規模的擴大，出現了多種多樣的養殖模式，養殖模式的發展對克氏原螯蝦養殖起著積極的促進作用，而不同養殖模式的養殖效果研究還存在空白。本研究通過對江漢平原池塘單養、蝦魚混養、蝦蟹混養、稻蝦養殖四種養殖模式的幼蝦的生長、體成分、血淋巴生化指標等進行了分析，為比較不同養殖模式的特點，生產優質綠色水產品提供基礎資料。

1 材料與方法

1.1 養殖實驗

實驗用蝦均取自湖北潛江水產局后湖稻蝦養殖基地，其中蝦單養、蝦魚混養、蝦蟹混養養殖實驗于湖北百瑞生物公司仙桃基地內進行，實驗池為水泥池，大小為(6 m×6 m×1 m)，小龍蝦養殖密度12 尾/m2，蝦魚(小龍蝦：泥鰍)和蝦蟹(小龍蝦：中華絨螯蟹)數量比均為12 ∶1。每組設3個平行，養殖用水為經曝氣過濾的室外池塘水，投喂飼料為市場上常見的蝦蟹飼料，蛋白含量為30%，日投喂量為蝦體重的5%～7%，同時每隔10 d，投放水草一次；稻蝦養殖在湖北潛江水產局后湖稻蝦養殖基地進行(每口稻田面積33 330 m2，共20口，在稻田四周挖溝，溝寬3～4 m，溝深1～1.5 m，中晚稻，6月份插秧)，養殖密度12 尾/m2，同時種植水草，投喂飼料同為蛋白含量為30%的蝦蟹飼料，日投喂量為蝦體重的5%～7%。定期用YSI EXO2水質分析儀監測水溫、溶氧、pH、葉綠素、藍綠藻、氨氮、硝氮等水質指標，養殖周期為4月5日至6月5日，各實驗組水溫17.8～27.7 ℃，溶氧5.5～8.9，pH7.3～7.9。

1.2 樣品采集及測定

養殖實驗共進行60 d，每隔10 d每組取樣50尾克氏原螯蝦，用吸水紙吸干蝦體表水分后，分別用游標卡尺和電子天平測量蝦的體長(精確到0.01 mm)和體重(精確到0.01 g)。養殖實驗結束后，每組取10尾測定全蝦的體成分，另取8尾測定蝦的血淋巴生化指標。先測量蝦體長、體重，然后用1 mL一次性注射器從頭胸甲縫隙插入圍心腔內取血淋巴，放入2 mL離心管內，靜止2 h后，4 ℃、3 000 r/min離心5 min吸取上層血清，-80 ℃凍存備用。

全蝦的粗脂肪含量測定采用索氏抽提法(乙醚)；粗蛋白含量測定采用凱氏定氮法(GB/T5009.5-2003)；灰分含量測定采用550 ℃馬弗爐灰化法(GB/T5009.4-2003)；水分采用105 ℃恒溫烘干恒重法測定(GB 6435-86)；血清生化指標(谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、葡萄糖、膽固醇、甘油三脂、總蛋白、白蛋白)采用CHEMIX-800全自動生化分析儀測定。

1.3 數據統計與分析

數值采用均用平均值±標準差表示，所得數據均以Excel與SPSS 21.0軟件作單因素方差分析、Pesrson相關系數分析和Duncan氏多重比較分析，顯著性水平為P=0.05。

體重增長率(WGR)=(W1-W0)/W0×100%

體長增長率(LGR)=(L1-L0)/L0×100%

式中，W0和W1分別為實驗蝦測量時間段內的起始、結束體重(g)，L0和L1分別為實驗蝦測量時間段內的起始、結束體長(cm)。

2 結果與分析

2.1 四種養殖模式克氏原螯蝦生長性能比較

由圖1可見，在實驗開始至10 d時，4個模式的幼蝦體長、體重基本處于同一水平，無顯著差異。隨著試驗的進行，體長和體重均呈現蝦單養組>蝦魚組>蝦蟹組>稻蝦組，且體重比體長差異更大。在20 d，稻蝦組體長顯著低于其余三組，蝦單養組體重顯著大于其余三組，其余各組差異不顯著；在30 d，體長和體重均表現為蝦單養組顯著大于另外3組，稻蝦組顯著低于另外3組，蝦魚組和蝦蟹組無顯著差異；40 d，稻蝦組體長顯著低于另外3組，蝦單養組體重顯著大于另外3組，稻蝦組體重顯著低于另外3組，蝦魚組和蝦蟹組體重無顯著差異；至50 d，蝦單養組體長顯著高于稻蝦組，蝦單養組和蝦魚組體重顯著高于稻蝦組，其余各組差異不顯著；至60 d體長和體重均表現為蝦單養組顯著大于另外3組，稻蝦組顯著低于另外3組，蝦魚組和蝦蟹組無顯著差異。

圖1 四種養殖模式克氏原螯蝦的體長和體重變化

四種養殖模式下，克氏原螯蝦LGR隨時間大體呈逐漸下降的趨勢，WGR率則呈先升高后降低的趨勢，見圖2。其中LGR在前30 d體長保持較高增長，然后逐漸降低。WGR在前40 d保持較高增長，然后逐漸降低，蝦單養組、蝦魚組和蝦蟹組WGR在30 d達到最高，稻蝦組在40 d達到最高。

2.2 四種養殖模式水環境理化指標變化

在60 d的養殖期間，水溫在前30 d一直保持升高，而后隨天氣變化而變化。溶氧則是先升高后降低，在前30 d增加較快，而后迅速降低。pH則是先降低后升高，開始時蝦單養組最高，稻蝦組最低，試驗結束時稻蝦組最高，4個模式組均在40 d時pH最低。葉綠素和藍綠藻含量在實驗開始時4個組均處于較低水平，而后均開始增長，20 d至60 d稻蝦組葉綠素和藍綠藻含量最低且差異顯著。硝氮和氨氮隨著養殖的持續不斷升高。其中稻蝦組的氨氮在實驗開始時顯著大于其余三組，至60 d，稻蝦組氨氮含量顯著低于另外三組。硝氮無顯著差異。

圖3 養殖期間水體理化指標變化

2.3 四種養殖模式克氏原螯蝦體成分比較

四種養殖模式克氏原螯蝦的體成分組成見表1，結果顯示，全蝦的水分含量稻蝦組>蝦魚組>蝦蟹組>蝦單養組，稻蝦組最高，顯著高于蝦單養組、蝦蟹組，與蝦魚組差異不顯著。全蝦的粗蛋白含量蝦蟹組>蝦單養組>蝦魚組>稻蝦組，蝦蟹組最高，顯著高于另外3組，其余三組間差異不顯著。全蝦粗脂肪含量稻蝦組>蝦魚組>蝦蟹組>蝦單養組，蝦單養組最低，顯著低于另外3組，其余三組間差異不顯著。全蝦的灰分蝦單養組>蝦蟹組>蝦魚組>稻蝦組，蝦稻組最低，顯著低于另外3組，蝦單養組與蝦魚組也差異顯著，其余各組間差異不顯著。

表1 四種養殖模式克氏原螯蝦的全蝦常規組成

2.4 四種養殖模式克氏原螯蝦血淋巴生化指標比較

養殖實驗結束后，四種養殖模式克氏原螯蝦的血清生化指標見表2。總蛋白為蝦蟹組>蝦魚組>蝦單養組>稻蝦組，其中蝦蟹組、蝦魚組與稻蝦組差異顯著，其余各組差異不顯著。白蛋白與總蛋白類似，蝦魚組>蝦蟹組>蝦單養組>稻蝦組，蝦魚組、蝦蟹組與蝦單養組、稻蝦組差異顯著，其余各組差異不顯著。總膽固醇含量，蝦單養組>蝦魚組、蝦蟹組>稻蝦組，蝦單養組顯著高于其余3組，其余各組差異不顯著。甘油三脂含量稻蝦組>蝦魚組>蝦單養組>蝦蟹組，稻蝦組顯著高于其余蝦單養組和蝦蟹組，其余各組差異不顯著。葡萄糖含量蝦魚組>蝦蟹組>稻蝦組>蝦單養組，蝦魚組與蝦單養組差異顯著，其余各組差異不顯著。谷丙轉氨酶含量，蝦單養組>稻蝦組>蝦魚組>蝦蟹組，蝦魚組和蝦蟹組差異顯著，其余各組差異不顯著。谷草轉氨酶含量稻蝦組>蝦單養組>蝦魚組>蝦蟹組，其中稻蝦組與蝦蟹組差異顯著，其余各組差異不顯著。

表2 四種養殖模式克氏原螯蝦的血液生化指標

3 討論

3.1 四種養殖模式克氏原螯蝦生長性能比較

克氏原螯蝦的生長受到其生物習性、食物資源、發育階段、養殖密度及環境條件等多因素的影響。克氏原螯蝦適宜的水溫范圍為21～30 ℃，當水溫高于32.2 ℃時，蝦的生長則會受到影響，當水溫降至5～6 ℃時，幼蝦會停止攝食[13]。同時，水體溶氧也會影響其生長，溶氧降低會引起攝食的減少[14-15]，幼蝦的適宜pH范圍為7.5～8.5[16]。本實驗條件下水溫、溶氧和pH與建議值均比較接近。本實驗期間，水溫在10 d略低于20 ℃，其體重增長率略低，但其體長增長率是整個試驗期間最快，我們推測跟幼蝦所處的發育階段相關。在實驗前10 d，四個模式的幼蝦體長、體重無顯著差異。隨著試驗的進行，體長和體重均呈現蝦單養組>蝦魚組>蝦蟹組>稻蝦組，且體重比體長差異更大，克氏原螯蝦的體長增長率大體呈逐漸下降的趨勢，體重增長率則呈先升高后降低的趨勢。克氏原螯蝦為蛻殼生長，蛻殼后體長才能增加，結果表明克氏原螯蝦在試驗前30 d蛻殼較多，體長生長較快。

克氏原螯蝦生長指標從高到低依次為蝦單養組、蝦魚組、蝦蟹組、稻蝦組，分析其原因，一是前三組試驗池較小，水溫相比稻田升高快，水體的葉綠素和藍綠藻水平較高，能給幼蝦提供額外的餌料，有利于幼蝦的生長；其次，蝦魚和蝦蟹模式的養殖對象之間存在競爭關系，導致這兩組生長速度略低于蝦單養組。蝦單養組、蝦魚組及蝦蟹組的體重增長率均在30 d時達到最高，而稻蝦組的體重增長率在40 d時達到最高，且稻蝦組的標準差比其余三組大，表明稻蝦組的幼蝦規格不整齊，推測稻蝦模式應該有去年打洞的留塘抱卵親蝦，該批蝦苗處于不同的生長階段的原因。

3.2 四種養殖模式克氏原螯蝦體成分比較

克氏原螯蝦的全蝦體成分主要包括粗蛋白、粗脂肪、灰分、水分等，體成分的含量將影響其營養價值與經濟價值。體成分是其對特定生境的表型適應，受環境中餌料的豐富程度所驅動，其中蛋白質和脂肪決定了機體的營養水平，已有研究表明蛋白質主要用于動物的生長發育，脂肪主要用于為機體儲存能量[17]。對水產動物進行營養成分分析有助于了解其經濟應用價值，并為人工飼料的配置提供理論依據。四種養殖模式克氏原螯蝦的體成分組成差異較大，全蝦的水分含量稻蝦組顯著高于蝦單養組、蝦蟹組。全蝦的粗蛋白含量蝦蟹組顯著高于另外3組。全蝦粗脂肪含量蝦單養組顯著低于另外3組。全蝦的灰分稻蝦組顯著低于另外3組。一般養殖品種的個體水分含量低于野生個體，實驗結果顯示稻蝦組的水分含量顯著高于其余3組，表明稻蝦組更接近野生個體。同時稻蝦組蝦可以在稻田內打洞穴居，由于競爭少，能量消耗少，導致多余的能量以脂肪形式儲存在體內，所以粗脂肪高于其余三組。蝦蟹組因其存在較大競爭關系，需要更多的能量用于生存，蛋白含量顯著高于另外三組。

3.3 四種養殖模式克氏原螯蝦血淋巴生化指標比較

血清生化指標被廣泛用于評價動物的營養和健康狀況，反映動物體內器官功能狀態和物質代謝的重要特征[18]。影響水產動物的血液生化指標的因素很多，包括：養殖模式、溫度、鹽度、光照、重金屬、饑餓、飼料等。

總蛋白可以維持血液滲透壓和pH平衡，具有運輸、凝血、免疫等功能。白蛋白功能包括營養、保持血液滲透壓以及對離子、膽紅素、脂肪酸、激素等運輸[19]。總蛋白為蝦蟹組>蝦魚組>蝦單養組>稻蝦組，其中蝦蟹組、蝦魚組與稻蝦組差異顯著，白蛋白為蝦魚組>蝦蟹組>蝦單養組>稻蝦組，蝦魚組、蝦蟹組與蝦單養組和稻蝦組差異顯著。一般認為，血清中總蛋白含量增加是體內營養成分充足，代謝較快，蛋白質合成旺盛，分泌到血液中的蛋白質增多造成的[4]，魚類在低溶氧條件下總蛋白和白蛋白含量會降低[20]，這與稻蝦組溶氧較低吻合。結果表明蝦蟹組和蝦魚組蝦的體內營養充足、新陳代謝較快，患病少。

脂類是甲殼動物重要的能源儲備物質[21-22]，甘油三脂和膽固醇是血脂的主要成分，主要在肝臟合成，并經血液循環至全身各處[23]。過多攝食脂類食物和肥胖可使血清甘油三酯升高，而運動則可以降低甘油三酯[4,17]。甘油三脂含量稻蝦組>蝦魚組>蝦單養組>蝦蟹組，稻蝦組顯著高于蝦單養組和蝦蟹組，表明稻蝦組運動低于其余三組，這與體成分結果相印證。飽和脂肪酸的攝入會促進機體膽固醇的合成，進而使血清膽固醇升高，總膽固醇含量，蝦單養組>蝦魚組、蝦蟹組>稻蝦組，表明稻蝦組蝦的飽和脂肪酸的攝入低于另外三組。

葡萄糖是提供機體活動所需的能量，受棲息環境等許多因素影響，流水環境較靜水高，活動較少的生物血糖濃度較低[23]。葡萄糖含量為蝦魚組>蝦蟹組>稻蝦組>蝦單養組，表明蝦魚組和蝦蟹組蝦的水里活動多于稻蝦組和蝦單養組，混養種類存在競爭關系。Imsland等[24]認為在正常情況下,魚類體內有機成分的分解代謝與合成代謝保持動態平衡,血糖含量較高時,魚類表現為積極攝食,健康狀況良好。

轉氨酶可以反映肝臟健康狀態，在正常狀態下轉氨酶只有少量釋放到血液中，血清轉氨酶活性較小；當肝臟發生病變時，細胞的通透性增加，導致轉氨酶大量釋放到血液內，使谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶升高[25]。一般認為血液中轉氨酶活性增加表明肝臟功能出現障礙[5,26]。谷丙轉氨酶含量，蝦蟹組<蝦魚組<稻蝦組<蝦單養組，蝦單養組和蝦蟹組差異顯著。谷草轉氨酶含量蝦蟹組<蝦魚組<蝦單養組<稻蝦組，其中稻蝦組與蝦蟹組差異顯著。本結果表明蝦蟹組蝦的轉氨酶含量最低，肝臟最健康，這可能與蝦蟹組葉綠素和藍綠藻水平較高，幼蝦攝入浮游生物較多有關。本實驗是在4-5月份進行，池塘的水草及浮游生物隨水溫升高快速生長，而稻蝦是在5月底開始插秧，稻蝦組的葉綠素和藍綠藻水平偏低。綜上所述，從生長角度看蝦單養組生長最快，從蝦體成分看稻蝦組最接近野生群體，從血清生化指標看蝦蟹組最健康，我們建議在積極開展稻蝦綜合種養的同時，在養殖產量較少的地區可以適當增大池塘單養的規模，在養殖規模較大的地區適當開展蝦魚、蝦蟹模式。