脾多肽聯合PAD對多發性骨髓瘤血清BALP、β-CTX和OPG水平的影響

范小紅，孫麗華

復旦大學附屬中山醫院青浦分院血液科，上海 201700

多發性骨髓瘤主要表現為漿細胞的惡性增殖，是一種嚴重的血液性疾病，以老年患者居多，占血液惡性腫瘤中的第2位，構成比為10%～15%。隨著我國進入老年化社會，其發病率呈逐年上升趨勢[1]。此類患者一旦發病，出現漿細胞的異常增殖，可造成機體的極大損傷，幾乎不可能完全治愈，并且臨床控制的緩解率較低，目前對其致病機制的研究仍不清楚，主要考慮為與免疫因素有關的血液性疾病[2]。現有的治療主要采用硼替佐米、阿霉素和地塞米松(PAD)方案，雖然一定程度上能夠提高生活質量，但其復發率仍較高，容易產生耐藥性[2]。脾多肽是從健康小牛脾臟中提取獲得，能夠改善機體的免疫功能，加速機體T細胞成熟和分化，維持機體的免疫功能，與傳統的化療結合能夠提高療效和改善預后的作用[4-5]。本研究采用脾多肽聯合PAD治療多發性骨髓瘤，取得了較好的療效，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2017-2018年在本院就診的96例多發性骨髓瘤患者作為研究對象，按照隨機數字表法分為對照組和觀察組，每組48例。觀察組男31例，女17例；年齡48～86歲，平均(65.31±12.76)歲；病程9～36個月，平均病程(21.38±6.27)個月；腫瘤分期：Ⅰ期18例，Ⅱ期16例，Ⅲ期14例。對照組男28例，女20例；年齡46～85歲，平均(64.89±11.29)歲；病程7～36個月，平均病程(22.16±7.15)個月；腫瘤分期：Ⅰ期16例，Ⅱ期18例，Ⅲ期14例。納入標準：所有患者均符合多發性骨髓瘤的診斷標準。排除標準：預期生存時間不超過6個月的患者；已經診斷為漿細胞白血病的患者；智力障礙和精神障礙患者；合并心、肝、腎等重要臟器疾病患者；其他惡性腫瘤患者；對藥物過敏的患者。2組的性別、年齡、病程和腫瘤分期比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。所有患者均簽署了知情同意書。本研究經醫院醫學倫理委員會審核通過。

1.2方法

1.2.1治療方法 所有患者入院后完善各項檢查，如血常規、凝血功能和肝腎功能檢查，排除化療禁忌，對于白細胞計數小于1×109/L者，予以集落刺激因子治療；血紅蛋白小于60 g/L者予以紅細胞懸液治療。對照組采用PAD治療方案：硼替佐米注射液，按照1.3 mg/m2，皮下注射給藥，在第1、4、8、11天給藥；脂質體阿霉素，25～30 mg/m2，靜脈滴注，在第1天給藥；地塞米松40 mg，靜脈滴注或者口服，在第1～4天給藥。觀察組在對照組的治療基礎上，予以脾多肽注射液10 mL靜脈滴注，在化療前1 d開始用藥，連續使用5 d。2組均以28 d為1個療程，連續治療3個療程后評價療效。

1.2.2療效評價 參照國際骨髓瘤工作組的標準[6]，尿液和血清中無M蛋白，骨髓漿細胞不超過5%，溶骨性病變數量和大小未改變為完全緩解(CR)；血清和尿液中的M蛋白呈陽性，其他與CR完全一致為接近完全緩解(nCR)；M蛋白減少≥50%為部分緩解(PR)；M蛋白減少在25%～<50%為輕微緩解(MR)；M蛋白減少<25%為無變化(NC)；M蛋白增加≥25%，漿細胞增加≥25%或者出現新的溶骨性病變或原有病變增大為疾病進展(PD)?？傆行?(CR例數+nCR例數+PR例數)/總病例數×100%。

1.2.3標本留取和指標檢測 患者入院時和3個療程結束后抽取肘靜脈血10 mL，分裝于干燥管和抗凝管內。抗凝管內血液標本用于血常規檢測，血常規采用日本日立公司7600-020自動生化儀進行檢測。干燥管內血液標本以3 000 r/min，半徑15 cm，離心15 min，抽取上清液放置在除酶管內，置于-70 ℃冰箱中保存。血清M蛋白、β2-微球蛋白檢測采用免疫擴散電泳法，血清骨特異性堿性磷酸酶(BALP)、β-骨膠原交聯(β-CTX)和護骨素(OPG)水平采用酶聯免疫法進行檢測，試劑盒來自上海森玨公司，并根據試劑盒說明書進行操作。患者治療前和治療3個療程后在無菌操作下經髂骨骨髓穿刺采集骨髓液0.2 mL，在骨髓涂片下觀察骨髓瘤細胞和漿細胞比例、成骨細胞和破骨細胞個數。

1.2.4觀察指標 觀察2組療效，治療前后血清M蛋白、β2-微球蛋白水平，骨髓瘤細胞比例、成骨細胞個數、破骨細胞個數、漿細胞比例，血小板計數、中性粒細胞絕對值、血紅蛋白，以及血清BALP、β-CTX、OPG水平的變化。

2 結 果

2.12組療效比較 觀察組總有效率為83.33%，高于對照組的60.42%(χ2=5.153，P<0.05)，見表1。

表1 2組療效比較

2.22組治療前后血清M蛋白、β2-微球蛋白水平和骨髓瘤細胞比例比較 2組治療前M蛋白、β2-微球蛋白水平和骨髓瘤細胞比例差異無統計學意義(P>0.05)，治療后均較治療前降低(P<0.05)，且觀察組降低程度較對照組更明顯(P<0.05)，見表2。

表2 2組治療前后血清M蛋白、β2-微球蛋白水平和骨髓瘤細胞比例比較

2.32組治療前后成骨細胞個數、破骨細胞個數和漿細胞比例比較 2組治療前成骨細胞個數、破骨細胞個數和漿細胞比例差異無統計學意義(P>0.05)；治療后成骨細胞個數較治療前增加，而破骨細胞個數和漿細胞比例較治療前降低(P<0.05)，且觀察組增加或降低的程度較對照組更明顯(P<0.05)，見表3。

表3 2組治療前后成骨細胞個數、破骨細胞個數和漿細胞比例比較

2.42組治療前后血小板計數、中性粒細胞絕對值和血紅蛋白水平比較 2組治療前血小板計數，中性粒細胞絕對值和血紅蛋白水平差異無統計學意義(P>0.05)；2組治療后血小板計數和中性粒細胞絕對值均較治療前降低，而血紅蛋白水平較治療前升高(P<0.05)；觀察組與對照組比較，對照組治療后血小板計數和中性粒細胞絕對值降低程度更明顯，而觀察組血紅蛋白水平升高程度更明顯(P<0.05)，見表4。

表4 2組治療前后血小板計數、中性粒細胞絕對值和血紅蛋白水平比較

2.52組治療前后血清BALP、β-CTX和OPG水平比較 2組治療前血清BALP、β-CTX和OPG水平差異無統計學意義(P>0.05)，2組治療后BALP和OPG水平均較治療前升高，而β-CTX水平較治療前降低(P<0.05)，且觀察組升高或降低程度較對照組更明顯(P<0.05)，見表5。

表5 2組治療前后血清BALP、β-CTX和OPG水平比較

3 討 論

多發性骨髓瘤約占全部惡性腫瘤的1%左右，占血液系統惡性腫瘤的10%，以中老年患者為主。隨著我國老年化社會進程的加快，其發病率呈上升趨勢。多發性骨髓瘤早期癥狀常常不明顯，待確診時多數屬于Ⅱ期以上，未治療患者中位生存期僅為6個月，常規化療僅有10%的生存率，中位生存期不超過3年[7]。臨床上其治療以PAD化療方案為主，近期有效率為60%～70%[8]。本研究發現觀察組的療效明顯優于對照組(P<0.05)，可能與脾多肽能夠激活非特異性的免疫功能，加速T細胞成熟，促進淋巴細胞的免疫水平，激活自然殺傷(NK)細胞活性，同時具有抑制腫瘤細胞的糖酵解，導致腫瘤細胞的能量代謝發生障礙[9]，從而達到抑制腫瘤的作用有關。

多發性骨髓瘤主要的病理生理改變是破骨細胞異?；钴S，破骨細胞是來源于單核巨噬細胞，對骨質具有再吸收作用的細胞。當機體受到惡性漿細胞侵犯和骨髓微環境改變時，由于各種細胞因子和微環境的刺激，破骨細胞出現異常增殖和功能活躍，并破壞骨質。M蛋白是B淋巴細胞和漿細胞異常增殖分泌的一種蛋白質，其水平的高低與骨髓瘤的嚴重程度密切相關[10-11]。β2-微球蛋白是骨髓漿細胞分泌的單鏈低相對分子質量蛋白，當骨髓瘤負荷增加時，漿細胞比例明顯升高，β2-微球蛋白水平也出現相應升高，而且隨著骨髓瘤分期嚴重程度的升高，血清β2-微球蛋白水平也會出現明顯升高[12]。本研究顯示，治療后觀察組與對照組比較，M蛋白、β2-微球蛋白水平，骨髓瘤細胞比例、破骨細胞個數和漿細胞比例降低程度更為明顯(P<0.05)，可能與脾多肽能夠提高機體免疫力，改善骨髓的微環境，降低骨髓瘤的負荷，改善成骨細胞和破骨細胞的紊亂，達到骨質重建的效果有關。這說明脾多肽提取物能夠改善骨髓細胞的比例，改善骨髓功能，從而提高機體的免疫力。骨髓抑制是化療藥物常見的不良反應，可出現骨髓抑制、血小板計數和中心粒細胞絕對值的降低。本研究中，對照組治療后血小板計數和中性粒細胞絕對值降低程度更為明顯，而觀察組血紅蛋白水平升高程度更為明顯(P<0.05)，說明脾多肽能夠改善化療后的骨髓抑制，增加骨髓儲備能力，改善患者的癥狀，一定程度上減輕化療的不良反應。脾多肽不僅能夠提高非特異性免疫功能，而且能夠激發骨髓的增殖功能，提高機體的造血功能，從而達到改善化療引起的機體的骨髓抑制的目的[13]，這與本研究結果一致。

在骨質轉換過程中，可以在血液和尿液中檢測到一些反映骨代謝速率、破骨細胞和成骨細胞功能的物質。骨基質90%以上為Ⅰ型膠原，是骨和軟骨中的主要膠原。β-CTX是骨質吸收的特異性標志物，破骨細胞活躍，骨質破壞增強，Ⅰ型膠原降解明顯增高，血清β-CTX是最具有代表性的骨質吸收標志物[14]?，F有研究表明，骨質破壞和骨轉移灶數目增加，多發性骨髓瘤分期就越晚，而β-CTX水平也越高，故認為β-CTX是反映骨質吸收的特異性指標，有助于了解骨質損害和病情嚴重程度[15]。本研究表明，脾多肽能夠明顯增強PAD對多發性骨髓瘤的療效，緩解腫瘤對骨質的破壞，從而降低血清β-CTX水平。OPG是成骨細胞分泌的糖蛋白，對骨破壞和吸收具有明顯抑制作用，保護骨的完整性。在骨髓瘤的發生、發展過程中，各種細胞因子作用于成骨細胞和破骨細胞，抑制成骨細胞活性，增強破骨細胞的作用，降低機體OPG水平，OPG水平降低與骨損害程度密切相關，是反映骨質破壞程度的指標[16]。另一個指標BALP是由成骨細胞產生，是成骨細胞成熟和活性的重要指標，該指標可反映成骨細胞的狀態[17]。本研究證實，觀察組治療后血清OPG和BALP水平升高程度較對照組更為明顯(P<0.05)，說明脾多肽聯合PAD治療多發性骨髓瘤可保護成骨細胞，抑制破骨細胞的活性，從而使機體的OPG和BALP水平升高。

綜上所述，脾多肽聯合PAD治療多發性骨髓瘤的療效更佳，可改善骨髓細胞的比例，促進骨髓造血功能恢復。