尿TRF、NAG1和血清CysC對早期糖尿病腎病的診斷價值

劉 芳，李揚宇，毛起官，林 青

福建中醫藥大學附屬人民醫院檢驗科，福建福州 350004

糖尿病腎病(DN)是糖尿病的常見微血管并發癥之一，晚期可以出現嚴重的腎衰竭，是導致糖尿病患者死亡的主要原因[1]。據統計，DN患者進展至終末期腎病的速度比一般腎小球疾病患者快約14倍[2]，DN患者約占開始血液透析腎病患者的25%[3]，因此，尋找早期敏感生化指標對DN的早期診斷及預防具有十分重要的意義。目前臨床上常用肌酐和尿素氮作為腎功能檢測指標，但是早期診斷的靈敏度較差[4]。本研究對90例2型糖尿病(T2DM)患者和30例健康者的尿轉鐵蛋白(TRF)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG1)和血清胱抑素C(CysC)水平進行觀察比較，旨在探討尿TRF、NAG1和血清CysC水平在DN早期診斷中的意義，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2020年9-11月本院內分泌科及腎病科門診和病房收治的T2DM患者90例，其中男60例、女30例，平均年齡(54.43±1.46)歲；另選擇同期本院體檢健康者30例作為對照組，其中男19例、女11例，平均年齡(52.15±2.31)歲。T2DM患者與體檢健康者的性別和年齡比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2納入標準 (1)T2DM納入標準：入選患者均符合2014年美國糖尿病協會(ADA)糖尿病診療指南的糖尿病診斷標準[5](即空腹血糖≥7.0 mmol/L，口服糖耐量試驗2 h血糖≥11.1 mmol/L)，除DN外所有入選患者均排除腫瘤、妊娠、心臟病、泌尿系統疾病、血液系統疾病、其他內分泌疾病、肝臟疾病及其他腎臟疾病。(2)DN納入標準：符合2009年美國腎臟病基金會(NKF)和美國食品藥物監督管理局(FDA)制定的DN診斷標準[6]。(3)對照組納入標準：受試者及直系親屬既往無糖尿病史，且排除肝臟、腎臟、心血管和內分泌系統等疾病，肝功能、腎功能、血糖、血脂、血壓及尿常規均正常。

1.3T2DM患者分組標準 按照2009年NKF和FDA制訂的尿清蛋白分級系統[6]，依據尿微量清蛋白(mAlb)/肌酐比值(ACR)水平，將糖尿病患者分為無腎病的單純糖尿病組(DM組，30例，男23例、女7例，ACR<10 mg/g)、早期DN組(30例，男16例、女14例，10 mg/g≤ACR≤29 mg/g)和DN組(30例，男21例、女9例，ACR>29 mg/g)。

1.4方法 所有受試者均清淡飲食3 d，空腹8 h后于早晨采集靜脈血5 mL置于無抗凝劑的抽血管內，同時采集新鮮中段晨尿10 mL于采尿管內，尿mAlb、肌酐檢測采用酶法，使用雅培C16000全自動生化分析儀及配套試劑完成測定。采用散射比濁法在西門子BNⅡ System特定蛋白分析儀上測定尿TRF，試劑由西門子醫學診斷產品(上海)有限公司提供。尿TRF的正常參考值為0～0.20 mg/dL；尿NAG1采用MNP-G1CNAc底物法，血清CysC采用散射比濁法，均使用雅培C16000全自動生化分析儀及配套試劑完成測定。尿NAG1的正常參考值為0～11.50 IU/L，CysC的正常參考值為0.56～1.22 mg/L。均按照儀器、試劑說明書及相關標準操作規程進行檢測。

2 結 果

2.1尿TRF、NAG1和血清CysC水平比較 4組尿TRF、NAG1和血清CysC水平比較，差異均有統計學意義(P<0.05)；兩兩比較，早期DN組的尿TRF、NAG1和血清CysC水平高于DM組及對照組，DN組高于早期DN組、DM組及對照組(P<0.05)，見表1。

表1 4組尿TRF、NAG1和血清CysC水平比較

2.24組尿TRF、NAG1和血清CysC單獨及聯合檢測的陽性率比較 尿TRF、NAG1和血清CysC陽性率隨著疾病進展不斷升高，其中早期DN組尿TRF、NAG1陽性率均高于50.0%，而TRF、NAG1、CysC聯合檢測的陽性率高達93.3%，見表2。

表2 4組尿TRF、NAG1和血清CysC單獨及聯合檢測的陽性率比較[n(%)]

2.3尿mAlb、TRF、NAG1及血清CysC水平間的相關性分析 Pearson相關分析顯示，尿TRF、NAG1及血清CysC水平與尿mAlb均呈正相關(r=0.91、0.65、0.42，P<0.05)，其中尿TRF與尿mAlb相關性最好；尿TRF與NAG1、尿TRF與血清CysC、尿NAG1與血清CysC之間也均呈正相關(r=0.58、0.34、0.56，P<0.05)，見表3。

表3 尿mAlb、TRF、NAG1及血清CysC間的相關性

2.4尿TRF、NAG1和血清CysC單獨和聯合檢測對早期DN的診斷效能 ROC曲線分析顯示，尿TRF、NAG1和血清CysC 3項聯合檢測診斷早期DN的曲線下面積(AUC)為0.991，優于這3項指標單獨檢測的0.913、0.852、0.880(P<0.05)，見表4。

表4 尿TRF、NAG1和血清CysC對早期DN診斷的ROC曲線分析結果

3 討 論

DN發病隱匿，癥狀往往不明顯，在早期不能得到及時診斷，從而延誤治療。目前診斷DN的實驗室指標包括兩類：反映腎小球功能損傷的檢測指標及反映腎小管損傷的檢測指標[7]。DN是一種低度的炎癥性疾病，NAG1是一種在腎損傷期間釋放的分泌蛋白，可作為早期腎損傷的標志物[8]。CysC可以通過腎小球自由過濾，并被近端小管重吸收和分解代謝[9]，研究表明，CysC是早期腎功能不全的良好指標[10]。鐵作為機體的重要氧化劑,具有啟動和催化機體氧化應激反應,加速活性氧形成的作用，因此，其水平變化會對機體細胞內的物質交換產生影響,誘發腎臟血管內皮細胞功能異常，是導致T2DM血管病變的發病機制之一[11]，尿TRF水平可反映機體血液循環中蛋白結合鐵的總含量[12]。因而本研究采用上述3項指標進行觀察。

本研究結果顯示，早期DN組的尿TRF、NAG1和血清CysC高于DM組及對照組(P<0.05)，而DN組高于早期DN組、DM組及對照組(P<0.05)，說明隨著腎損傷程度的加深，尿mAlb水平不斷增加，其余各指標也相應升高。進一步分析尿TRF、NAG1和血清CysC檢測的陽性率，在早期DN組中，TRF、NAG1單獨檢測的陽性率均高于50.0%，而3項聯合檢測的陽性率高達93.3%，說明3項指標聯合檢測可減少早期DN漏診率。在相關性研究中，尿TRF、NAG1和血清CysC任意二者之間均呈現良好的正相關，其中TRF與NAG1相關性最好(r=0.58，P<0.05)。ROC曲線分析顯示，尿TRF、NAG1，血清CysC單獨檢測診斷早期DN的AUC分別為0.913、0.852、0.880，說明這3項指標對早期DN均有較好的診斷價值；本研究還分別對TRF、NAG1、CysC兩兩聯合、3項聯合檢測的診斷效能進行了分析，結果顯示，3項指標聯合檢測診斷早期DN的AUC、靈敏度及特異度均高于兩兩聯合檢測(P<0.05)。因此，TRF、NAG1、CysC 3項聯合檢測診斷早期DN的效能優于單獨檢測及兩兩聯合檢測。

綜上所述，尿TRF、NAG1和血清CysC聯合檢測具有較高的診斷價值，可提高早期DN的確診率，為DN的早期干預提供幫助，延緩DN進展，提高患者生存質量。