類風濕關節炎患者關節腔積液特征分析

莊麗花，楊清蘭，饒華春，郭慶昕△，許超塵，鄭輝福

福建省泉州市正骨醫院：1.檢驗科；2.內科，福建泉州 362000

類風濕關節炎(RA)是一種以侵蝕性關節炎為主要臨床表現的自身免疫性疾病，常見的病變有類風濕結節、滑膜炎癥改變、脈管炎等，后期的致殘率特別高[1-2]。健康人關節腔積液可以少量(<4 mL)存在，具有潤滑、保護關節的作用，當關節滑膜炎癥改變時，關節腔積液量增多，關節穿刺抽取關節腔積液并通過檢查關節腔積液中細胞成分、生化及免疫學指標，可以幫助臨床認識關節損傷的原因及關節腔積液產生的機理，為疾病的診斷與治療提供實驗室依據，且具有快速、簡便、價格低廉等優點。本文統計分析本院170例RA患者關節腔積液檢查結果，現報道如下。

1 材料與方法

1.1一般資料 收集2016年1月至2020年12月170例RA患者的病歷資料，其中男46例，年齡22～77歲，平均(56.0±8.0)歲；女124例，年齡25～85歲，平均(41.0±7.0)歲。納入標準：所有患者診斷符合1987年美國風濕病學會制訂的RA診斷標準且僅一個關節受累。排除標準：合并腫瘤、其他自身免疫性疾病患者；合并急性感染患者；RA累及2個以上關節患者；孕期或者哺乳期婦女。

1.2儀器與試劑 儀器：BC-6900全自動血液細胞分析儀(深圳邁瑞公司)、Eclipse E100普通顯微鏡(日本尼康公司)、7180生化儀(日本日立公司)、DM LB2偏振光顯微鏡(德國萊卡公司)、Cobas e601電化學發光免疫分析儀(羅氏公司)、雙相培養瓶(鄭州安圖公司)、TDZ5離心機(湖南湘儀公司)；試劑：瑞氏-姬姆薩染色試劑購自珠海貝索公司，所有生化、血液試劑及質控品均購自深圳邁瑞公司，抗環瓜氨酸肽(CCP)抗體試劑購自羅氏公司。

1.3方法 關節腔積液由臨床醫生抽取，行一般性狀檢查(包括顏色、送檢量、透明度、黏稠度、黏蛋白凝集試驗)，采用偏振光顯微鏡查找結晶。抽取肘正中靜脈血，抗凝管2 mL，促凝管3 mL?？鼓苎捎肂C-6900全自動血液細胞分析儀進行細胞計數。關節腔積液、促凝管血靜置20 min，以3 000 r/min離心5 min，取上清液儲存于-20 ℃冰箱備用。采用7180生化儀及其配套試劑檢測關節腔積液類風濕因子、葡萄糖、總蛋白、尿酸、腺苷脫氨酶，檢測血清類風濕因子、總蛋白、尿酸；采用Cobas e601電化學發光免疫分析儀及配套試劑檢測抗CCP抗體(>17 U/mL為陽性)。關節液中各指標參考值為：類風濕因子0～30 U/L、葡萄糖4.30～5.56 mmol/L、總蛋白10～30 g/L、尿酸119～446 μmol/L、腺苷脫氨酶4～24 U/L。

2 結 果

2.1關節腔積液一般性狀檢查 RA患者關節腔積液外觀均渾濁，以淡黃色為主，少數呈淡紅色、紅色、乳白色，黏稠度降低，少數可形成凝塊，黏蛋白凝集試驗大多形成不良。

2.2關節腔積液細胞學檢查 白細胞計數為23.0(13.3,35.5)×109/L，中性粒細胞百分比為80.0(64.0,86.0)%；常見的細胞有中性粒細胞、淋巴細胞、單核吞噬細胞及滑膜細胞；病理細胞有Reiter細胞21例，狼瘡細胞3例，類風濕細胞2例；檢出紅細胞103例、檢出結晶7例。

2.3關節腔積液及血清生化和免疫學檢查 RA患者關節腔積液中葡萄糖4.3(3.2,5.5)mmol/L、腺苷脫胺酶33.6(25.2,45.3)U/L；關節腔積液中總蛋白水平低于血清，差異有統計學意義(P<0.05)；尿酸和類風濕因子水平與血清比較，差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

表1 RA患者關節腔積液及血清總蛋白、尿酸和類風濕因子水平比較[M(P25,P75)]

2.4抗CCP抗體陰性組與陽性組RA患者關節腔積液和血清總蛋白、尿酸、類風濕因子水平比較 170例患者關節腔積液中有151例行血清抗CCP抗體檢測，根據抗CCP抗體檢測結果將患者分為抗CCP抗體陰性組(22例)與抗CCP抗體陽性組(129例)。2組間關節腔積液和血清中總蛋白、尿酸水平比較，差異均無統計學意義(P>0.05)；無論在關節腔積液還是血清中，抗CCP抗體陽性組的類風濕因子水平均高于抗CCP抗體陰性組，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 抗CCP抗體陰性組與陽性組關節腔積液及血清檢測指標比較[M(P25,P75)]

3 討 論

RA由于自身免疫反應，導致關節內的炎癥發生，是臨床上最多見的骨關節疾病，其特征性表現為反復發作的對稱性累及外周關節的持續性關節炎。本研究顯示，RA患者的關節腔積液外觀渾濁，這與炎癥導致的中性粒細胞為主的細胞數量增加有關：一方面是由于中性粒細胞釋放的中性粒細胞脂酶降解透明質酸，另一方面關節炎癥導致滑膜通透性增加，大量積液形成，關節腔積液黏稠度低、黏蛋白凝集不良；同時凝血因子及纖維蛋白原釋放入關節腔積液，易使之出現凝塊。中性粒細胞激活后釋放多種炎癥細胞因子是許多炎性反應的特征，這與抗CCP抗體的免疫和效應功能集中在關節處有關[3]，也有報道中性粒細胞通過合成前列腺素、蛋白酶和活性氧中間體而導致關節炎[4-5]。

RA患者的關節腔積液中常見的細胞有中性粒細胞、淋巴細胞、單核吞噬細胞、滑膜細胞。本研究中部分患者關節腔積液中檢出病理細胞，如Reiter細胞21例、狼瘡細胞3例、類風濕細胞2例；還有部分患者可見到少量結晶。

本研究RA患者的關節腔積液中腺苷脫氨酶升高，有研究表明腺苷脫氨酶在RA患者的關節腔積液中表達水平明顯升高，腺苷脫氨酶可反映炎癥的嚴重性，并在某種程度上參與了關節部位軟骨組織的損傷[7-8]。SARI等[9]研究發現腺苷脫氨酶水平與RA密切相關，且可作為評估RA炎癥活動的一種重要指標。RA患者的關節腔積液總蛋白水平升高，但與血清中總蛋白含量相比較低，這與蛋白質的分子量大小有關，血漿中有不同成分不同大小分子的蛋白，正常關節腔積液中，大分子蛋白質的數量較少，小分子蛋白質可存在于所有關節腔積液中，當關節出現炎癥時，由于血液流動性及滑膜通透性增加，許多大分子量的蛋白(如類風濕因子)進入關節腔積液中，使得關節腔積液中蛋白水平升高[6]。YANG等[10]研究表明，RA患者關節腔積液蛋白質水平增高，與本研究一致。類風濕因子是針對免疫球蛋白Fc部分的高親和力自身抗體，長期以來一直作為RA的診斷標志物，并參與其發病機理[4]。本研究顯示，RA患者關節腔積液和血清中的類風濕因子差異無統計學意義(P>0.05)，這與張靜等[11]研究相符。抗CCP抗體陽性組的類風濕因子水平無論在關節腔積液還是在血清中均比抗CCP抗體陰性組的高(P<0.05)?？笴CP抗體具有活化破骨細胞的作用，對于早期發現RA有重要的意義[3]，其水平與RA的發展及疾病輕重程度相關，抗體陽性的RA患者比抗體陰性患者的骨破壞更嚴重，滴度水平的高低可有助于預后的判斷，高水平通常表明預后不好、關節侵蝕危險性大，導致關節炎的概率增加，從而使關節腔中積液形成增多[12-13]。

綜上所述，RA患者關節腔積液中以中性粒細胞為主的大量炎癥細胞集聚，總蛋白、腺苷脫氨酶水平升高，而類風濕因子、尿酸等與外周血相近。抗CCP抗體陽性患者的關節腔積液及血清中類風濕因子水平較抗CCP抗體陰性者高，部分患者關節腔積液中可檢出Reiter細胞、狼瘡細胞及類風濕細胞等病理細胞。