血清同型半胱氨酸、膽紅素及巨噬細胞炎癥蛋白1α與早發冠心病的關系

李立鵬，王寶典，陳素芹，邵 靜

冠心病是目前全球死亡率和發病率最高的心血管疾病之一，其死亡率和發病率呈逐年增長趨勢，并且呈現年輕化趨勢[1]。早發冠心病是指男性發病年齡<55歲或者女性<65歲的冠心病，此類病人的預后較差且生活質量下降[2]。早發冠心病主要由冠狀動脈粥樣硬化引起，血管堵塞引起心肌缺血和壞死，心臟功能嚴重下降[3]。早發冠心病的診斷主要依賴于病人的心電圖變化以及臨床表現，近年來，隨著心臟生化標志物的不斷發現及應用，心臟生化標志物在早發冠心病診斷中的作用逐漸引起廣泛關注[4]。同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)是甲硫氨酸和胱氨酸的代謝中間產物，正常生理條件下Hcy能夠被分解代謝，使Hcy濃度維持在較低水平[5]。病理條件下，Hcy分解受抑制，使Hcy水平迅速升高，與腦卒中和腦梗死等心腦血管疾病的發生密切相關[6-7]。膽紅素主要由單核巨噬細胞吞噬分解衰老的紅細胞產生，在體內主要起抗氧化作用，在高血壓和缺血性腦卒中等心腦血管疾病病人中均能夠檢測到膽紅素水平升高，在高血壓和缺血性腦卒中的診斷中具有一定臨床價值[8-9]。巨噬細胞炎癥蛋白1α(macrophage inflammatory protein 1α，MIP-1α)主要由單核巨噬細胞分泌產生，能夠激活中性粒細胞、自然殺傷性細胞和T細胞，與高血壓和腦卒中等心腦血管疾病的發生密切相關，在高血壓和腦卒中病人預后預測中具有一定臨床意義[10-11]。目前，早發冠心病仍然缺乏有效的心臟生化標志物，本研究旨在探討早發冠心病病人血清Hcy、膽紅素及MIP-1α的變化及其與病人預后的關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2016年2月—2019年10月洛陽市第三人民醫院診治的75例早發冠心病病人作為早發組。納入標準：①病人均符合美國紐約心臟病學會制定的冠心病診斷標準[12]；②女性<65歲，男性<55歲；③臨床資料完整。排除標準：①合并腫瘤；②存在肝腎功能損傷；③存在自身免疫性疾病；④存在全身感染性疾病；⑤入院前3個月內接受過抗炎抗菌治療。其中，男41例，女34例；體質指數(body mass index，BMI)19～25(23.36±2.44)kg/m2；18例有吸煙史，10例有酗酒史，44例有高血壓史，24例有糖尿病史。根據是否發生不良心血管事件將病人分為預后良好組(59例)和預后不良組(16例)。選取同期我院診治的75例非早發冠心病病人作為對照組(女性≥65歲，男性≥55歲)，其中，男44例，女31例；BMI 19～24(23.01±2.59)kg/m2；17例有吸煙史，11例有酗酒史，42例有高血壓史，22例有糖尿病史。兩組性別、BMI和吸煙史等一般資料比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。病人均簽署知情同意書，本研究經醫院倫理委員會審核通過。

1.2 血清Hcy、膽紅素、MIP-1α水平及相關指標檢測 病人入院后抽取空腹靜脈血5 mL，室溫靜置30 min后，5 000 r/min離心20 min，離心半徑12.5 cm。將上清液轉移至另一潔凈離心管中，-80 ℃凍存用于后續檢測。采用全自動生化分析儀(美國貝克曼庫爾特科技有限公司，型號：AU5800)檢測總膽固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、載脂蛋白、白蛋白、血清Hcy和膽紅素水平，采用酶聯免疫吸附法，應用MIP-1α檢測試劑盒(美國Abcam科技有限公司，貨號ab214569)檢測血清MIP-1α水平，實驗操作嚴格按照試劑盒說明書進行。采用血糖檢測儀(美國羅氏診斷科技有限公司，型號：2519069)檢測血糖水平。

1.3 評價指標 比較對照組和早發組的血清Hcy、總膽紅素及MIP-1α水平，收集預后良好組和預后不良組的基本資料，包括性別、年齡、BMI、吸煙史、酗酒史、高血壓史、糖尿病史，檢測兩組生化指標，包括血糖、總膽固醇、三酰甘油、LDL-C、HDL-C、載脂蛋白、白蛋白、血清Hcy、總膽紅素及MIP-1α水平，確定早發冠心病病人預后的影響因素。

2 結 果

2.1 對照組與早發組血清Hcy、總膽紅素和MIP-1α水平比較 早發組血清Hcy和MIP-1α水平明顯高于對照組，而總膽紅素水平明顯低于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。詳見表1。

表1 對照組與早發組血清Hcy、總膽紅素 和MIP-1α水平比較(±s) 單位：μmol/L

2.2 預后良好組與預后不良組臨床資料比較 預后良好組與預后不良組性別、年齡、BMI、吸煙史、酗酒史況、高血壓史、糖尿病史、血糖、三酰甘油、LDL-C、HDL-C、載脂蛋白和白蛋白水平比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。預后不良組總膽固醇、Hcy和MIP-1α水平明顯高于預后良好組，而總膽紅素水平明顯低于預后良好組，差異均有統計學意義(P<0.05)。詳見表2。

表2 預后良好組與預后不良組臨床資料比較

2.3 早發冠心病預后影響因素的Logistic回歸分析 以病人是否發生不良心血管事件為因變量，0=不發生，1=發生，以表2中有統計學意義的變量為自變量進行多元逐步Logistic回歸分析(α入=0.05，α出=0.10)，結果顯示，血清Hcy和MIP-1α是早發冠心病病人預后的獨立危險因素(OR值分別為1.496、1.806，P均<0.05)，總膽紅素是早發冠心病病人預后的保護因素(OR=0.737，P<0.05)。變量賦值情況見表3，結果見表4。

表3 變量賦值

表4 早發冠心病預后影響因素的多元Logistic回歸分析

2.4 血清Hcy、總膽紅素及MIP-1α對早發冠心病病人預后的診斷價值 采用ROC曲線評估血清Hcy、總膽紅素及MIP-1α對早發冠心病病人預后的診斷價值，結果顯示，血清Hcy、總膽紅素聯合MIP-1α對早發冠心病病人預后的診斷價值高于各項指標單獨檢測，詳見表5，ROC曲線見圖1。

表5 血清Hcy、總膽紅素及MIP-1α對早發冠心病病人預后的診斷價值

圖1 血清Hcy、總膽紅素及MIP-1α對早發冠心病病人預后診斷價值的ROC曲線

3 討 論

目前認為早發冠心病的發病機制是由于脂質分子在血管內壁沉積造成冠狀動脈硬化，心肌功能不足而引發心肌缺血，病情嚴重時病人出現心臟衰竭而死亡[13]。心臟生化標志物在早發冠心病的診斷中具有重要作用，因此，探究與早發冠心病發病密切相關的生化標志物并將其應用于冠心病的診斷尤為必要。

本研究發現早發冠心病病人血清Hcy水平明顯升高，Hcy水平升高與早發冠心病的發生發展存在一定相關性。分析其原因可能是由于Hcy會誘導心肌纖維化的發生，Han等[14]研究發現Hcy通過誘導經典瞬間受體電位通道蛋白3的表達，活化去乙酰化酶1信號通路，進而促進心肌纖維化的發生。因此，在早發冠心病病人中Hcy水平升高會活化乙?；?和腫瘤生長因子-β等心肌纖維化相關信號通路，使心肌纖維化水平提高，進而導致早發冠心病的發生[15]。進一步研究發現高血清Hcy水平病人的預后較差，分析其原因可能是由于Hcy會促進氧化應激的發生，Kumar等[16]研究結果顯示Hcy水平升高會引起細胞中的線粒體功能障礙，最終導致氧化應激的發生。而Ma等[17]研究發現Hcy能夠活化核因子-κB信號通路，進而誘導氧化應激的發生。線粒體是細胞內調節氧化還原反應和進行電子傳遞鏈的重要細胞器，線粒體功能紊亂會導致電子傳遞出現障礙，富余的電子與氧氣反應產生大量的過氧離子和超氧離子而形成氧自由基，導致氧化應激的產生。由于心肌細胞中的線粒體極為豐富，氧自由基會對病人的心肌造成嚴重損傷，最終引起病人心臟衰竭而導致死亡[18]。

本研究結果發現膽紅素會抑制早發冠心病的發生，分析其原因可能是由于膽紅素對膽固醇水平具有一定調節作用，Bulmer等[19]研究顯示膽紅素能夠降低膽固醇水平、氧化型脂蛋白水平以及血壓；總膽紅素水平升高會抑制膽固醇水平，進而抑制早發冠心病的發生[20]。進一步研究表明總膽紅素水平下降與病人的不良預后密切相關。分析其原因可能是由于膽紅素能夠抑制動脈粥樣硬化以及炎癥反應。Vogel等[21]研究發現膽紅素能夠抑制血小板活化，保護心臟免受缺血再灌注損傷。血小板的過度活化使得血液處于高凝狀態，導致血液流動性下降，心臟局部微環境處于缺氧狀態，容易對心臟功能造成損傷，而膽紅素通過抑制血小板活化使得血液流動性恢復，心臟氧供應充足，從而減少早發冠心病病人的心臟負荷。同時Cheng等[22]研究發現膽紅素主要由血紅素氧化酶催化產生，并且血紅素氧化酶具有抗氧化、抗凋亡和抗炎癥等多種生物學功能。因此，早發冠心病病人血清膽紅素水平下降會導致氧化應激、心肌細胞凋亡和心臟炎癥水平升高，對心臟功能造成嚴重損傷，進而導致病人死亡[23]。

本研究發現MIP-1α會促進早發冠心病的發生，分析其原因可能是由于MIP-1α可促進炎癥反應的發生，Wu等[24]研究發現MIP-1α是一種促炎癥因子，能夠活化腫瘤壞死因子-α信號通路。由于腫瘤壞死因子-α信號通路的下游靶基因多為白細胞介素和腫瘤生長因子等促炎癥因子，因此，MIP-1α活化腫瘤壞死因子-α信號通路會促進白細胞介素和腫瘤生長因子等促炎癥因子的產生和釋放，導致心臟微環境的炎癥水平升高，促進心臟損傷而導致早發冠心病的發生。進一步發現MIP-1α水平升高與早發冠心病病人的不良預后相關，分析其原因可能是由于MIP-1α水平升高會促進血管損傷，Relster等[25]研究顯示MIP-1α會抑制血管內皮生長因子的表達。由于血管內皮生長因子在血管新生和損傷修復過程中起重要作用，因此，MIP-1α水平升高會抑制血管新生并促進血管損傷，導致心臟氧氣和營養供應不足出現衰竭[26]。

本研究結果還顯示，血清Hcy、總膽紅素聯合MIP-1α預測早發冠心病病人預后的價值較高，ROC曲線下面積為0.868，靈敏度、特異度分別為87.26%、83.79%，明顯優于血清Hcy、總膽紅素、MIP-1α單獨預測的價值。提示檢測早發冠心病病人血清Hcy、總膽紅素、MIP-1α水平，可作為臨床預測早發冠心病病人預后的重要生化標志物。

綜上所述，血清Hcy和MIP-1α水平升高以及總膽紅素水平下降與早發冠心病的發生以及不良預后密切相關，血清Hcy、總膽紅素聯合MIP-1α檢測有助于預測早發冠心病病人預后，在早發冠心病病人預后預測中具有一定臨床價值。