核酸檢測與酶免檢測平行篩查血液在基層血站的應(yīng)用有效性研究

曲 執(zhí)

（葫蘆島市中心血站，遼寧 葫蘆島 125000）

控制并預(yù)防血液疾病的感染、傳播是血液防控中的重點(diǎn)，其中乙型肝炎病毒（HBV）、人類免疫缺陷病毒（HIV）、丙型肝炎病毒（HCV）等，一直是臨床血液疾病預(yù)防中被關(guān)注的重點(diǎn)問題。在輸血前，對(duì)血液中傳播病原體進(jìn)行有效的篩查，是保證輸血與治療安全性的關(guān)鍵。在臨床中，對(duì)于血液的傳染性病毒檢測多采用酶免檢測（enzyme-linked immuno sorbent assay，ELISA，又稱酶聯(lián)免疫吸附測定法），主要針對(duì)乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、艾滋病毒（HIV）常見性的傳播性病毒進(jìn)行檢測、篩查。雖然該檢測方式具有一定的準(zhǔn)確性、靈敏度，能控制并預(yù)防輸血過程中的疾病傳播，但在臨床篩查中依舊存在局限性。近年來，隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展與變化，核酸檢測（nucleic acid amplification techniques，NAT）逐漸應(yīng)用于臨床血液疾病檢測中，具有較高的特異性與靈敏度，可在短時(shí)間內(nèi)對(duì)乙型肝炎病毒、丙肝病毒、艾滋病毒等進(jìn)行快速的篩查檢測，進(jìn)一步保障輸血中的血液質(zhì)量與安全[1]。為了進(jìn)一步探究血液檢測的靈敏度與有效性，本文針對(duì)本站2019年4月至2020年5月100名無償獻(xiàn)血者的血液樣本，探討在基層血站中采用酶免檢測與核酸檢測平行篩查血液的應(yīng)用效果，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 基本資料 本次100例試驗(yàn)數(shù)據(jù)均選取于在本血站進(jìn)行無償獻(xiàn)血者，所選時(shí)間區(qū)間為2019年4月至2020年5月，所有無償獻(xiàn)血者均符合我國《獻(xiàn)血者健康檢查要求》，所有無償獻(xiàn)血者在血液采集時(shí)，均保留酶免檢測與核酸檢測兩種不同的血液樣本。

1.2 方法 血液樣本采集后4 h之內(nèi)，將樣本進(jìn)行20 min的低溫離心處理，完成后，放置于2～8 ℃的溫度中進(jìn)行保存，同時(shí)需保證在3 d內(nèi)完成需要進(jìn)行的核酸檢測。①儀器選用：酶免檢測選用TECANFREEDOM EVOLYER-200；核酸檢測所選用的機(jī)型為型號(hào)浩源ChiTas BSS1200+ABI7500。②試劑選用：HBsAg試劑（北京萬泰生物藥業(yè)有限公司）、抗-HCV試劑（北京萬泰生物藥業(yè)有限公司）、抗-HIV-1/2（北京萬泰生物藥業(yè)有限公司）、HBsAg試劑、抗-HCV試劑、抗-HIV試劑核酸檢測試劑（珠海麗珠試劑股份有限公司）[2]。③檢測方式：對(duì)血液樣本進(jìn)行酶免檢測與核酸檢測，并根據(jù)試劑盒中所附帶的說明書按流程進(jìn)行操作。酶免檢測：在丙型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、艾滋病毒的試劑檢測中，若試驗(yàn)結(jié)果有雙陽或單陽現(xiàn)象，則判定為陽性；若為灰區(qū)樣本，則需要重新進(jìn)行雙孔再檢測，若雙孔或一孔中有陽性現(xiàn)象，則判定為陽性，作為檢測試驗(yàn)不合格。若檢測結(jié)果中有陰性樣本，則需進(jìn)行核酸檢測。此外，在HBsAg、抗-HCV、抗-HIV-1/2檢測中，若有2種反應(yīng)試劑呈陽性狀態(tài)，則為陽性，若顯現(xiàn)為陰性狀態(tài)，則為陰性；若反應(yīng)中僅存在1種反應(yīng)為陽性狀態(tài)或反應(yīng)均為陰性狀態(tài)，則實(shí)施核酸檢測[3]。核酸檢測流程嚴(yán)格按照核酸試劑說明書中的詳解步驟進(jìn)行，若檢測結(jié)果中有單個(gè)陽性現(xiàn)象的Pool，則需要將其拆分后重新進(jìn)行檢測。若混合的樣本中呈陽性，但拆分后為陰性的樣本，為判定為陰性；若混合樣本中呈陽性，且拆分后也有陽性的樣本，則判定為陽性[4]。

1.3 觀察指標(biāo) 通過試驗(yàn)記錄并對(duì)比兩種檢測方式中呈陽性的概率與核酸檢測試驗(yàn)不合格的情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 本次試驗(yàn)中100例無償獻(xiàn)血者的數(shù)據(jù)均應(yīng)用于SPSS20.0進(jìn)行軟件處理，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，兩種檢測方式試驗(yàn)中呈陽性的結(jié)果，以及核酸檢測試驗(yàn)不合格用率（%）表示。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢測方式試驗(yàn)結(jié)果對(duì)比 由表1可以看出，經(jīng)過酶免檢測，將HBsAg、抗-HCV、抗-HIV-1/2無反應(yīng)性與1種反應(yīng)型試劑的樣本總計(jì)88例，通過核酸檢測后呈陽性的樣本有7例，陽性概率為7.95%。

表1 兩種檢測方式試驗(yàn)結(jié)果對(duì)比

2.2 核酸檢測試驗(yàn)不合格對(duì)比 通過酶免檢測之后，乙型肝炎病毒檢測試驗(yàn)不合格3例，艾滋病毒檢測試驗(yàn)不合格2例，丙肝病毒檢測試驗(yàn)不合格3例；經(jīng)過核酸檢測試驗(yàn)不合格的有7例，不合格的概率為7.14%。見表2。

表2 核酸檢測試驗(yàn)不合格對(duì)比[n（%）]

3 討 論

在患者輸血治療過程中，血液質(zhì)量的安全性是治療的基本與前提，而血液的安全性保障問題，在血站的工作中是最為關(guān)鍵的環(huán)節(jié)之一。血液的有效、安全篩查，是保障血液安全的重要方法，也是預(yù)防、控制血液傳播途徑的重要方式之一[5]?，F(xiàn)階段，在臨床中對(duì)于血液的篩查，多采用酶免檢測與核酸檢測方式。酶免檢測主要是針對(duì)抗體、抗原進(jìn)行篩查檢測，但病毒的抗體與抗原極易產(chǎn)生蛋白結(jié)構(gòu)上的變異，使病毒在窗口期時(shí)容易造成誤檢、漏檢的現(xiàn)象。而病毒的窗口期，主要是指被病毒感染至該種病毒可被某種檢測方式篩查、檢測出的一段時(shí)間，而處在窗口期的病毒無法被檢測到，但其依然具有一定的傳染、傳播性[6]。而核酸檢測，具有較高的敏感性與特異性，在樣本檢測過程中，即使是含量較低的病毒核酸，也可將其檢測出，能有效減短酶免檢測中的病毒窗口期。據(jù)臨床研究調(diào)查指出，核酸檢測能有效縮短乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、艾滋病毒（HIV）平均感染的窗口期，此外，核酸檢測還能有效規(guī)避病毒發(fā)生變異、隱藏性感染現(xiàn)象等，有效避免了誤檢、漏檢的發(fā)生[7]。通過本次試驗(yàn)可知，血液樣本在通過酶免檢測后，對(duì)于HBsAg、抗-HCV、抗-HIV-1/2無反應(yīng)性與只有1種試劑發(fā)生反應(yīng)現(xiàn)象的篩查。由此可說明，血液經(jīng)酶免檢測的同時(shí)，進(jìn)行核酸檢測的平行篩查，有利于避免血液檢測中的漏檢，兩種檢測方式互相補(bǔ)充不足，提高血液檢測的有效性，保障血液的安全。該結(jié)論與李燕紅等[8]學(xué)者《病毒核酸檢測在無償獻(xiàn)血者中的應(yīng)用及其質(zhì)量控制方法的探討》一文中取得的結(jié)果一致，其將19210例無償獻(xiàn)血者的血液樣本，進(jìn)行標(biāo)本采集后進(jìn)行酶免檢測，該數(shù)據(jù)也再次證明了，核酸檢測能有效彌補(bǔ)酶免檢測的不足之處，有效降低并控制血液檢測過程中的漏檢風(fēng)險(xiǎn)，阻止了血液疾病的傳播，有效保障了血液的安全性[9-10]。

綜上所述，在基層血站中應(yīng)用核酸檢測與酶免檢測平行篩查血液，能有效避免單一檢測過程中出現(xiàn)的誤檢、漏檢風(fēng)險(xiǎn)，提高血液檢測的安全、有效性，預(yù)防并控制血液的傳染，保障了臨床中血液的安全供給，值得大力推廣與應(yīng)用。