何立楠,石金巧,張榮全,羅桂洪,袁 騰,樊 榮,3,尹顯慧,3,吳小毛,3,龍友華,3
(1.貴州大學獼猴桃工程研究中心, 貴州貴陽 550025;2.水城縣東部農業產業園區管理委員會, 貴州六盤水 553000;3.貴州大學作物保護研究所, 貴州貴陽 550025)
獼猴桃作為我國新興的經濟林樹種之一,近年來得到了快速發展[1],然而隨著生產規模逐漸擴大,各種病害也接踵而來。其中由葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)引起的獼猴桃軟腐病在陜西、四川、貴州、江西、湖南等主產區均有發生,且發病率高達35%以上[2]。軟腐病的發生嚴重影響獼猴桃果實的品質及口感,給獼猴桃產業帶來巨大的經濟損失[3]。目前,獼猴桃軟腐病的防控主要依賴化學藥劑[4-6],如5%己唑醇ME、10%苯醚甲環唑WG、50%咪酰胺錳鹽WP、50%異菌脲SC及80%甲基硫菌靈WP等藥劑對葡萄座腔菌菌絲及孢子均具有較好的毒殺作用[4-6],但是長期使用單一化學藥劑易使病菌產生抗藥性。為了預防和減緩抗藥性的產生,開發和應用混配藥劑是重要手段之一。
戊唑醇屬三唑類殺菌劑,具有低毒、高效、低殘留、持效期長、內吸性強等特點,其通過破壞真菌體內的麥角甾醇生物合成影響細胞膜的流動性和滲透性,從而導致真菌細胞死亡[8-10]。吳文能等[11]研究發現戊唑醇對獼猴桃軟腐病主要致病菌葡萄座腔菌表現出較強的抑菌活性,莫飛旭等[12]研究發現戊唑醇和四霉素以質量比2∶1混配可用于獼猴桃軟腐病防控。氨基寡糖素提取自富含甲殼素的海洋生物外殼,具有誘導植物產生防御反應、激活植物的系統性獲得免疫反應等功能,是一種新型海洋生物源農藥[13],在棉花抗早衰、提高產量及西瓜幼苗生長等方面有顯著的促進作用[14-15]。應用氨基寡糖素對改善杧果品質和貯藏保鮮作用顯著,同時還可作為替代殺菌劑用于冰葡萄霜霉病的防治[16-17]。基于以上特點,本研究通過室內毒力測定及田間防效驗證,探究戊唑醇和氨基寡糖素復配對獼猴桃軟腐病的控制效果,以期為制定防控該病的用藥方案提供參考。
供試菌種:葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea),由貴州大學獼猴桃工程技術研究中心保藏提供。
供試藥劑:98%戊唑醇原藥(湖南比德生化科技股份有限公司);85%氨基寡糖素原藥(海南正業中農高科股份有限公司);20%丁子香酚EW (江蘇劍牌農化股份有限公司);125 g/L氟環唑SC (巴斯夫植物保護(江蘇)有限公司);500 g/L氟啶胺SC (浙江禾田華工有限公司);80%戊唑醇WG (陜西美邦農藥有限公司);75%肟菌·戊唑醇WG (拜耳作物科學(中國)有限公司);33.5%喹啉銅SC (興辰藥業(中國)有限公司);10%苯醚甲環唑WG (東莞市瑞德豐生物科技有限公司);25%粉唑醇SC (鹽城利民農化有限公司);50%嘧菌酯WG (河北冠農農化有限公司);40%嘧霉胺SC (拜耳作物科學(中國)有限公司);5%氨基寡糖素AS (江蘇克勝集團股份有限公司)。
1.2.1 室內毒力試驗
毒力測定:采用菌絲生長速率法和孫云沛共毒系數法測定[18-20]。根據預試驗結果將每種藥劑梯度稀釋,制備含藥平板。用直徑5 mm打孔器將已活化培養長勢均勻的邊緣菌落打成5 mm菌餅,接種刀取菌餅正面朝下接種于含藥平板正中央,無菌水作空白對照,每個處理設3個重復,置于28 ℃恒溫培養箱中培養,待對照培養基菌落直徑約為培養皿直徑的80%時,采用十字交叉法測量各處理菌落直徑,計算抑制率和EC50。
聯合毒力評價:將篩選所得到的最佳單劑(戊唑醇)同氨基寡糖素按照有效成分質量比1∶1、l∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶6、1∶7、1∶8、1∶9、1∶10的比例復配,采用菌絲生長速率法,評價不同配比物對葡萄座腔菌的抑制作用。計算抑制率和EC50,得到相關共毒系數(CTC),作為最后綜合評價藥劑混用增效作用的指標。指標評價標準為:80<CTC為拮抗作用,80<CTC<120為相加作用,CTC>120為增效作用。計算公式如下:
1.2.2 田間試驗
參照《農藥田間藥效試驗準則》(二) GB/T 17980.118—2004[21],試驗于2020年5-10月于貴州中康農業科技有限公司獼猴桃基地進行。將篩選出的增效作用較強的混劑(質量比1∶1、1∶9、1∶10)分別稀釋5 000、10 000、15 000倍用于田間試驗,并以對應單劑和清水作對照,分別于獼猴桃坐果期、膨大期、采收前1個月進行施藥,每個處理4次重復,每小區5株獼猴桃樹,試驗小區隨機區組排列。采收期,每個小區隨機采集50個果實,測定果實縱徑、橫徑、側徑、單果質量,并計算果形指數。隨后置于28 ℃恒溫箱內貯藏10 d待所有果實軟化,調查獼猴桃軟腐病發病情況,并計算病果率、防效。計算公式如下:
采用Excel 2016和DPS 7.5數據統計軟件進行統計分析。
由表1可知,在供試的11種殺菌劑中,以戊唑醇對葡萄座腔菌菌絲生長的抑制作用最強,其EC50為0.87 mg/L;其次是肟菌·戊唑醇和粉唑醇,EC50分別為1.07 mg/L和1.19 mg/L。氨基寡糖素的抑制效果最弱、作用最慢,其EC50為222.34 mg/L,但其作為一種植物誘抗劑,能夠激發植物體產生防御反應從而減輕病原菌對植物的侵害[12]。因此,本試驗特選用戊唑醇與氨基寡糖素進行復配。

表1 不同殺菌劑對葡萄座腔菌的毒力
從表2可以看出,戊唑醇和氨基寡糖素復配對葡萄座腔菌的EC50為0.12~1.75 mg/L,共毒系數為62.33~931.99,所有配比藥劑對葡萄座腔菌均表現出較好的抑制效果,其中戊唑醇和氨基寡糖素有效成分質量比為1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶9、1∶10均有增效作用,而以1∶1混配的增效作用最為顯著,CTC達931.99。

表2 戊唑醇和氨基寡糖素復配對葡萄座腔菌的毒力
如表3所示,田間試驗中,戊唑醇和氨基寡糖素以1∶1、1∶9、1∶10混配后的不同稀釋倍數處理均可降低獼猴桃軟腐病的發病率。其中,戊唑醇和氨基寡糖素以1∶1混配的較高施用濃度(5 000倍稀釋)處理的病果率僅為6.48%,防效達87.90%,高于其他處理;中、低濃度(10 000、15 000倍稀釋)處理的防效也在78%以上。2種對應單劑的防效均低于復配,說明戊唑醇與氨基寡糖素按一定質量比復配能有效降低軟腐病病果率,提高防控效果。

表3 戊唑醇和氨基寡糖素復配對獼猴桃軟腐病的田間防效

續表3
由表4可知,戊唑醇和氨基寡糖素以1∶1、1∶9、1∶10混配的不同稀釋倍數處理及對應單劑對獼猴桃果實外觀品質均具有良好的促進作用。其中,表現最好的為戊唑醇和氨基寡糖素以1∶9混配后稀釋5 000倍液,顯著提高了獼猴桃果實平均單果質量21.18%;其次是戊唑醇和氨基寡糖素以1∶10混配后稀釋10 000倍和5%氨基寡糖素AS稀釋 5 000倍,平均單果質量分別提高了20.91%、20.79%。綜上,戊唑醇和氨基寡糖素復配可促進獼猴桃果實外觀品質的形成,提高產量。

表4 戊唑醇和氨基寡糖素復配對獼猴桃果實外觀品質的影響
本研究試驗證實戊唑醇和氨基寡糖素有效成分質量比1∶1復配對獼猴桃軟腐病有很好的防治效果,防效高達78%以上;同時減少戊唑醇的用量,可延緩其抗藥性的發生和發展;還能較好地促進獼猴桃外觀品質形成,提高產量[13,22-25],可在獼猴桃生產上進行推廣應用。