甲磺草胺液相色譜通用分析方法研究

孫鈺潔，陳 陽

(1.江蘇省農產品質量檢驗測試中心，江蘇南京 210013；2.江蘇省農產品品牌發展中心，江蘇南京 210036)

甲磺草胺又名磺酰唑草酮，為原卟啉原氧化酶抑制劑，主要通過抑制雜草葉綠素生物合成，致使葉片迅速干枯死亡來滅殺雜草[1]。甲磺草胺除草譜廣，適用于防治多種農作物田中一年生闊葉雜草﹑禾本科雜草和莎草等[2]。在美國﹑巴西等國家，甲磺草胺已經取得登記并廣泛使用，國內市場也逐步打開[3]。國內已登記的甲磺草胺制劑有懸浮劑和水分散粒劑。甲磺草胺的檢測方法有高效液相色譜法[4]、液質聯用法[5]，其制劑的分析國內文獻沒有報道。液質聯用儀價格昂貴，不適于實際生產中推廣，因此開發一種分析方法檢測不同制劑中甲磺草胺含量，對于甲磺草胺的生產和質量控制具有重要意義。 本試驗選取40%甲磺草胺懸浮劑和75%甲磺草胺水分散粒劑作為試樣，開發了一種液相色譜通用方法分析已登記的甲磺草胺懸浮劑和水分散粒劑。

1 試驗部分

1.1 試劑和溶液

乙腈：色譜純(德國Merck公司)；水：超純水；磷酸，分析純(國藥集團化學試劑有限公司)；磷酸溶液：Ψ(水∶磷酸)＝1 000∶1；甲磺草胺標樣：含量98.5%，白色粉末(上海市農藥研究所)；40%甲磺草胺懸浮劑(江蘇省蘇州富美實植物保護劑有限公司)；75%甲磺草胺水分散粒(瀘州東方農化有限公司)。

1.2 儀器

Agilent1200高效液相色譜儀、二極管陣列檢測器、Agilent色譜工作站、色譜柱：Zorbax SB-C18(150 mm ×4.6 mm，5μm)(安捷倫公司)；Millipore超純水制備系統；超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；過濾器：濾膜孔徑0.45 μm (Millipore)。

1.3 色譜操作條件

流動相：Ψ(乙腈∶磷酸水溶液)＝60∶40，經濾膜過濾，并進行脫氣；流速：0.8 mL/min；柱溫：室溫；檢測波長：230 nm；進樣體積：5 μL；保留時間：甲磺草胺約3.1 min (圖1)。

1.4 測定步驟

1.4.1 標樣溶液的配制

稱取0.05 g(精確至0.000 1 g)甲磺草胺標樣于 50 mL容量瓶中，加入40 mL乙腈，超聲波振蕩5 min，冷卻至室溫，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。準確移取上述溶液5 mL于50 mL容量瓶中，加乙腈稀釋至刻度，搖勻。

1.4.2 試樣溶液的配制

稱取含0.05 g (精確至0.000 1 g)甲磺草胺的試樣于50 mL容量瓶中，加入40 mL乙腈，超聲波振蕩 5 min，冷卻至室溫，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。準確移取上述溶液5 mL于50 mL容量瓶中，加乙腈稀釋至刻度，搖勻，過濾。

1.4.3 計算

在操作條件下，待儀器穩定后，連續注入數針標樣溶液，直至相鄰2針甲磺草胺峰面積相對變化小于1.2%后，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行測定。將測得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標樣溶液中甲磺草胺峰面積分別進行平均。試樣中甲磺草胺質量分數按公式(1)計算：

式中：ω1為試樣中甲磺草胺質量分數，以%表示；A2為試樣溶液中甲磺草胺峰面積的平均值；m1為甲磺草胺標樣的質量，單位克(g)；ω為標樣中甲磺草胺質量分數，以%表示；A1為標樣溶液中甲磺草胺峰面積的平均值；m2為試樣的質量，單位克(g)。

2 結果分析

2.1 色譜條件的選擇

2.1.1 檢測波長的選擇

當前，新一代信息技術不斷演進，持續與實體經濟加速融合，制造業是產業邁向中高端水平、經濟轉向高質量發展的中堅力量。為進一步推動制造業轉型升級和創新發展，我國提出了信息化和工業化融合(簡稱“兩化融合”)發展戰略，相繼出臺了“互聯網+”行動、中國制造2025、制造業與互聯網融合發展戰略等一系列相關政策規劃。如何借助兩化融合增強企業創新驅動力、推動產業結構高端化、以及經濟高質量發展成為理論研究和實踐運用亟待解決的重要問題，受到政府、學術界以及產業界的普遍關注，兩化融合績效的測算與分析是解決該問題的關鍵。

甲磺草胺的紫外光譜圖如圖4所示，從圖中可以看到甲磺草胺的最大吸收波長約230 nm，在該波長處靈敏度較高，干擾較少，能夠滿足分析的要求，故將檢測波長確定為230 nm。

2.1.2 流動相的選擇

色譜柱選擇常用的ZORBAX SB-C18反相柱。根據甲磺草胺物化性質和溶劑的紫外吸收波長，選擇乙腈作為溶劑溶解樣品，并以乙腈和水作為流動相，為了得到更好的分離效果和峰形，在1 000 mL水里加入1 mL磷酸。選擇乙腈與磷酸水溶液比例60∶40作為流動相，流速0.8 mL/min。

2.2 方法線性關系的測定

按1.4.1節標樣溶液的制備方法配制5個不同濃度的有效成分線性相關溶液。在操作條件下，待儀器穩定后，按濃度從低到高的順序測定每個溶液中甲磺草胺的峰面積，取2次測定的平均結果。以甲磺草胺質量濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標繪制標準曲線(圖5)。

從圖5可以看出，當甲磺草胺質量濃度42.87～ 117.43 mg/L (進樣體積5 μL)時，其質量濃度與相應的峰面積之間呈現良好的線性關系，計算得回歸方程為y=17.315 7x+47.107 3，相關系數r=0.999 7，完全可以滿足定量分析要求。

2.3 方法精密度試驗

按1.4.2節試樣溶液的制備方法配制5個40%甲磺草胺懸浮劑精密度溶液和5個75%甲磺草胺水分散粒劑精密度溶液。以76.83 mg/L有效成分線性相關溶液為標樣溶液，在上述操作條件下，待儀器基線穩定后，按照標樣溶液、精密度溶液、精密度溶液、標樣溶液的順序進行測定，結果見表1、表2。

表2 75%甲磺草胺水分散粒劑中甲磺草胺精密度試驗結果

表1 40%甲磺草胺懸浮劑中甲磺草胺精密度試驗結果

從表2可以看出，75%甲磺草胺水分散粒劑中甲磺草胺質量分數測定結果的RSD為0.235 0%，小于修改的Horwitz公式2(1-0.51ogC)×0.67=1.399 1，有效成分分析方法精密度的測定結果符合要求。

2.4 方法準確度試驗

稱取含0.02 g (精確至0.000 1 g)甲磺草胺的40%甲磺草胺懸浮劑于50 mL容量瓶中，再加入甲磺草胺標樣0.02 g (精確至0.000 1 g)，按1.4.2節試樣溶液的制備方法配制5個有效成分準確度溶液。

稱取含0.02 g (精確至0.000 1 g)甲磺草胺的75%甲磺草胺水分散粒劑于50 mL容量瓶中，再加入甲磺草胺標樣0.02 g (精確至0.000 1 g)，按1.4.2節試樣溶液的制備方法配制5個有效成分準確度溶液。

以76.83 mg/L線性相關溶液為標樣溶液，在上述操作條件下，待儀器基線穩定后，按照標樣溶液、準確度溶液、準確度溶液、標樣溶液的順序進行測定，結果見表3、表4。

表3 40%甲磺草胺懸浮劑回收率試驗結果

從表3可以看出，40%甲磺草胺懸浮劑中甲磺草胺平均回收率為100.30%，具有良好的準確度。

從表4可以看出，75%甲磺草胺水分散粒劑中甲磺草胺平均回收率為99.19%，具有良好的準確度。

3 結 論

本文選取國內已登記的40%甲磺草胺懸浮劑和75%甲磺草胺水分散粒劑作為試樣，建立了一種高效液相色譜方法分析不同制劑中甲磺草胺的含量，并進行了方法學驗證。試驗結果表明，方法的精密度和準確度高，分離效果好，操作簡便、快捷，為不同制劑中甲磺草胺的分析提供了參考。