高速逆流色譜法在天然藥物活性成分分離中的應(yīng)用

李秋月 謝萍 申麗君 李國春

摘要：目的 研究高速逆流色譜法（HSCCC）在天然藥物分離純化領(lǐng)域中的應(yīng)用。方法 收集和整理 CNKI 數(shù)據(jù)庫中相關(guān)文獻，歸納高速逆流法在分離天然藥物成分中研究進展。結(jié)果 高速逆流色譜技術(shù)已初步形成一套比較完整的理論體系。結(jié)論 高速逆流色譜法在天然產(chǎn)物成分分離中已廣泛應(yīng)用，以期為我國藥物制備的研究提供參考。

關(guān)鍵詞：高速逆流色譜法;天然藥物;分離;應(yīng)用

【中圖分類號】R97 ? ? ? ? ? ? 【文獻標識碼】A ? ? ? ? ? ? 【文章編號】2107-2306（2021）09--01

高速逆流色譜（ high-speed countercurrent chromatography，HSCCC ）是 20 世紀 80 年代發(fā)展起來的一種連續(xù)高效的液-液分配色譜分離技術(shù)，具有樣品無損失、無污染、高效、快速和大制備量分離等優(yōu)點。HSCCC與傳統(tǒng)的分離純化方法相比具有顯著優(yōu)勢，己被廣泛應(yīng)用于中藥成分分離、天然產(chǎn)物化學(xué)等領(lǐng)域。本文綜述了近年來高速逆流色譜在天然產(chǎn)物方面的應(yīng)用。

1 應(yīng)用于天然藥物成分分離

1.1黃酮類

黃酮類化合物泛指兩個具有酚羥基的苯環(huán)通過三個碳原子相互連接而成的化合物。黃酮類化合物廣泛分布于自然界中，利用 HSCCC 分離純化對其活性具有重要意義。潘霞等[1]以蘆薈葉為原料，經(jīng)預(yù)處理得到蘆薈色酮粗提物，再采用氯仿-甲醇-水和二氯甲烷-甲醇-水為分離系統(tǒng)，經(jīng)兩次 HSCCC 分離純化，得到蘆薈色酮。CAO X 等[2]采用乙酸乙酯-正丁醇-水體系，經(jīng)HSCCC法一次分離純化得到包括葛根素在內(nèi)的6種相對純凈的異黃酮。

1.2生物堿

生物堿一般是指生物體中含一類含氮有機化合物，多具有生物活性和堿性。目前已有大量的研究結(jié)合了HSCCC技術(shù)進行生物堿的提取分離。Tang 等[3]利用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-HCl體系，從黃花烏頭中分離出 6 種生物堿。Liu 等[4]采用正己烷-乙酸乙酯甲醇-水體系，從吳茱萸中分離出 5 種生物堿。

1.3萜類

萜類化合物在植物界中廣泛存在，蘇丹等[5]在山芝麻乙酸乙酯萃取部位采用二步分離法進行 HSCCC 分離，制備得到 6 個化合物。何維[6]采用正己烷乙酸乙酯-甲醇水體系，利用 HSCCC 分離技術(shù)從雷公藤粗提物中一次性得到了五種萜類化合物。

1.4苷類

苷類又稱配糖體，是糖或糖的衍生物與另一種類型的非糖物質(zhì)通過糖端基碳原子連接形成的化合物。張敏[7]同時結(jié)合 HSCCC 與 HPD-100 大孔吸附樹脂方法分離龍膽中龍膽苦苷和當(dāng)藥苷。Huang 等[8]采用正己烷-正丁醇-水體系，從甜葉菊中成功分離得到 3 種甜菊甙。

1.5 其他

俞靜靜等[9]利用高速逆流色譜法（HSCCC 法）結(jié)合HPLC、ESI-MS等技術(shù)，以三氯甲烷-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，對何首烏粗提物中蒽醌類成分進行分離純化并進行結(jié)構(gòu)鑒定研究，分離鑒定得到了4種蒽醌類成分。

2 結(jié)論

在大量研究中發(fā)現(xiàn)，HSCCC 既適用于已知化學(xué)成分的定向分離，在新化合物的發(fā)現(xiàn)方面也有獨特優(yōu)勢，可作為篩選新成分的方法之一。HSCCC技術(shù)如今日趨成熟，其提取分離物主要以萜類、黃酮、生物堿、皂苷多酚類和蒽醌類衍生物為主。在蛋白質(zhì)等大分子的分離純化中也有大量研究，與其他技術(shù)聯(lián)用進行提取分離，進一步完善傳統(tǒng)色譜方法的不足，使高速逆流色譜技術(shù)在標準品制備、天然產(chǎn)物化學(xué)成分研究、新藥研發(fā)等領(lǐng)域得到更加廣泛應(yīng)用。

參考文獻：

[1] 潘霞， 曹學(xué)麗， 董銀卯， 等. 蘆薈色酮的高速逆流色譜分離制備方法研究[J].色譜， 2005， 23（1）： 96-99.

[2] CAO X， TIAN Y， ZHANG T Y. Separation and Purification of Isoflavones from Puera ria lobata by High Speed Counter-current Chromatography[J]. Journal of Chromatography A， 1999， 55（8）： 709-713.

[3] Tang Q F， Yang C H， Ye W C， et al. Preparative isolation and purification of bioactive constituents from Aconitum coreanum by high-speed counter-current chromatography coupl ed with evaporative light scattering detection[J]. Journal of Chromatography A， 2007， 1144 （2）： 203-207.

[4] Liu R， Chu X， Sun A， et al. Preparative isolation and purification of alkaloids from the C hinese medicinal herb Evodia rutaecarpa （Juss.） Benth by high-speed countercurrent chroma tography[J]. Journal of Chromatography A， 2005， 1074（1/2）： 139-144.

[5] 蘇丹， 高玉橋， 梁耀光， 等. 高速逆流色譜法分離制備山芝麻中的三萜類成分[J]. 中藥材， 2016， 39（05）： 1053-1056.

[6] 何維. 雷公藤初提物中萜類化合物分離及鑒別[J]. 兒科藥學(xué)雜志， 2009， 15（5）： 48-50.

[7]張敏. 高速逆流色譜分離純化人參、龍膽中的有效成分[D]. 長春師范學(xué)院， 2011.

[8]俞靜靜， 李瀚元， 樓招歡， 等. 高速逆流色譜法分離何首烏粗提物中蒽醌類化合物及組分結(jié)構(gòu)鑒定[J]. 藥物分析雜志， 2015， 35（11）： 1888-1892.