不同前處理方法對蔬菜、水果農藥殘留 GC-MS/MS檢測結果的影響分析

張文文，殷錫峰，張麗穎，董 科，盧小燕

（1.鎮江市農產品質量檢驗測試中心，江蘇鎮江 212009；2.句容市農業農村局，江蘇句容 212400）

農藥殘留指的是一定時期內殘留于農產品和環境中的微量農藥原體及其有毒降解物和代謝產物[1]。隨著人們生活水平的提高，農藥殘留作為蔬菜、水果的主要污染來源，成為整個社會的關注熱點。農藥殘留對人體的危害主要是農藥殘留在體內會發生蓄積和慢性中毒[2]。常用的農藥有有機磷類、有機氯類、菊酯類等多種農藥，其中部分農藥已被列為禁用或限制使用農藥，但是受利益的趨勢，加之農戶的用藥意識淡薄，可能存在違規使用的情況[3]。農藥殘留檢測中的前處理技術主要有液液萃取、索氏提取、固相萃取、凝膠滲透色譜技術等[4]，部分前處理技術有機試劑使用量大、操作過程復雜、提取率低、對檢測人員的身體損害大[5]，亟待研究人員對其進行優化，以減少對檢測人員身體的危害。本文以青菜、蘋果為基質，采用氣相色譜-串聯質譜法（GC-MS/MS），選擇3種不同的前處理技術，對兩種基質中農藥殘留的回收率進行分析，確定了最優的前處理技術，為農產品農藥殘留快速檢測提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

青菜、蘋果（購于本地超市）。

1.2 試劑

乙腈（國藥、默克）、無水硫酸鎂（國藥）、氯化鈉（國藥）、檸檬酸三鈉（國藥）、檸檬酸氫二鈉（麥克林）、PSA（安捷倫）、硫酸鎂（國藥）。

1.3 農藥標準物質

殺螟硫磷、甲基對硫磷、對硫磷、甲基異柳磷、醚菊酯、氯菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氟氯氰菊酯、聯苯菊酯、溴氰菊酯、氟氰戊菊酯、氟胺氰菊酯、異菌脲、百菌清、腐霉利、乙烯菌核利、三氯殺螨醇、五氯硝基苯、蟲螨腈、α-666、β-666、γ-666、δ-666（以上標準品均為農業部環境保護科研監測所生產）。

1.4 儀器設備

氣 相 色 譜-串 聯 質 譜 儀（Agilent7890B+7000C）、AH-30勻漿機（睿科儀器廈門有限公司）、WH-861渦旋混合器（太倉華利達實驗設備有限公司）、HHS型電熱恒溫水浴鍋（上海博訊實業有限公司）、Centrifuge 5804R冷凍離心機（德國eppendorf公司）、TTL-DCII氮吹儀（北京同泰聯科技發展有限公司）、QUICLEAR多功能針式濾器（阿爾塔科技有限公司）、固相萃取裝置。

1.5 試驗方法

1.5.1 試樣制備

購買的新鮮青菜、蘋果，分別稱取500 g，放入打漿機中打成漿狀，作為試樣。

1.5.2 標準溶液配制

（1）農藥單標準儲備溶液。準確吸取1.0 mL農藥殘留標準溶液到10 mL棕色容量瓶中用丙酮定容，配制成10 mg/L的標準溶液儲備液放-4 ℃冰箱中備用，共26種。

（2）混合標準儲備溶液。先將農藥單標儲備液隨機分為3組，分別準確吸取1.0 mL的分組標準儲備液于10 mL棕色容量瓶中，用丙酮稀釋定容，配制成各農藥組分質量濃度均為1.0 mg/L的混合工作溶液放-4 ℃冰箱中備用。

（3）基質空白標準溶液。將經過測定不含有待測農藥的青菜、蘋果作為空白對照樣。準確吸取1 000 μL、750 μL、500 μL、250 μL、150 μL和50 μL的混合標準儲備液，加入空白樣品基質中，分別配制濃度為0.2 mg/L、0.15 mg/L、0.1 mg/L、0.05 mg/L、0.03 mg/L和0.01 mg/L 6個濃度梯度的標準工作液，其中0.1 mg/L濃度作為加標回收濃度，做3個重復。

1.5.3 前處理方法

蔬菜、水果的前處理方法見表1。

表1 蔬菜、水果前處理方法表

1.5.4 儀器條件

（1）GC條件。色譜柱：HP-5 MSUI（30 m×0.250 mm× 0.25 μm，Agilent公司）；程序升溫：60 ℃保持1 min，以40 ℃/min升至170 ℃并保持0 min，再以10 ℃/min升至310 ℃保持3 min；載氣：高純氦氣（≥99.999%）；進樣口溫度：250 ℃；進樣體積：1 μL；進樣方式：不分流。

（2）MS/MS條件。離子源：電子轟擊離子化（EI）；電離能量：70 eV；離子源溫度：280 ℃；四極桿溫度：150 ℃；載氣類型：氦氣；淬滅氣類型：氦氣；碰撞氣類型：氮氣；質譜接口溫度：280 ℃；碰撞氣流速：1.5 mL/min；分析模式：MRM。26種農藥化合物GC/MS離子參數見表2。

2 結果與分析

試驗選用含水分、糖和有機酸等物質干擾多且消費量大的青菜、蘋果作為代表性蔬菜、水果，選擇26種農藥作為3種前處理方法對比的研究對象，其中包括有機磷類、有機氯類、菊酯類等多種農藥。由于GC-MS/MS檢測農藥殘留，均存在基質增強效應，因此，本文研究的3種方法標準曲線采用基質標。

由表3可知，3種前處理方法對蔬菜、水果中農藥殘留的影響不大，重現性均較好。但是采用QUICLEAR針式過濾器改進后的QuEChERS方法，樣品量、試劑量使用少，操作簡便、快速、安全，適用于大批量蔬菜、水果農藥殘留量的檢測。

表3 3種前處理方法對青菜、蘋果中26種農藥添加回收率結果

3 結論與討論

GC-MS/MS技術充分發揮了氣相色譜和質譜技術特點，可快速、準確檢測農藥及其衍生物的殘留，可準確獲取被檢組分的保留時間、含量等數據信息。曹小麗等[6]采用GCMS/MS分析技術，建立了水果、蔬菜中62種農藥殘留快速檢測分析方法，結果表明該方法快速、靈敏、重現性好。馬智玲等[7]采用QuEChERS方法結合GC-MS/MS技術建立了蔬菜、水果中129種農藥殘留檢測分析方法，結果表明，129種農藥在一定含量范圍內線性關系良好，該方法靈敏度高、簡便快捷。當前相關研究內容都證明了該技術的優越性[8-9]。

傳統前處理技術有機試劑使用量大、操作過程復雜、提取率低、對檢測人員的身體損害大，已不再適用于農產品的大批量檢測。QuEChERS方法具備快速、簡單、廉價、有效和可靠等特點，在各個檢測領域得到了廣泛的應用[10]。本研究是在NY/T 761—2008和QuEChERS前處理方法的基礎上進行了優化，其中方法1是NY/T 761—2008前處理技術的優化，方法2和方法3是QuEChERS前處理方法的優化，尤其是采用QUICLEAR針式過濾器改進后的QuEChERS方法樣品量、試劑量使用少，操作簡便、快速、安全，重現性好，可廣泛應用于日常大批量蔬菜、水果農藥殘留量的檢測。