氣相色譜-三重四極桿質譜法測定辣椒中咪鮮胺及其代謝物殘留量

吳曉娜，董 娟，董雪峰

（聊城市食品藥品檢驗檢測中心，山東聊城 252000）

咪鮮胺是一種被廣泛使用的咪唑類殺菌劑，主要的作用機理是抑制細胞膜的重要成分麥角甾醇的生物合成，從而達到鏟除病害的目的[1]，它廣泛用于大田作物、水果蔬菜及各種經濟作物病害的防治[2]，其對于辣椒的枯萎病也具有很好的防治效果[3]。通過對咪鮮胺的大量研究，普遍認為咪鮮胺在進入環境后最終會降解成2,4,6-三氯苯酚[4-5]，而2,4,6-三氯苯酚的毒性較強，且不易降解，對環境安全會造成潛在隱患。目前對于咪鮮胺及2,4,6-三氯苯酚的檢測方法，樣品的前處理不僅復雜煩瑣，而且還會用到毒性較大的吡啶鹽酸鹽，不利于檢驗人員的健康和環境的安全。本文通過研究構建了QuEChERS-氣相色譜-三重四極桿質譜法測定辣椒中咪鮮胺及2,4,6-三氯苯酚殘留的方法，處理過程簡單快速，并具有較高的靈敏度和選擇性。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

乙腈、丙酮、醋酸、無水硫酸鎂、氯化鈉、PSA、C18、咪鮮胺標準品（北京海岸鴻蒙標準物質技術有限責任公司，標準物質編號：GBW(E)081565，濃度100 μg/mL）、2,4,6-三氯苯酚標準品（北京海岸鴻蒙標準物質技術有限責任公司，標準物質編號：SB05-059-2008，濃度100 μg/mL）。分析中所有試劑為分析純試劑，水為一級水。

1.2 儀器與設備

7890B-7000C氣相色譜-三重四極桿質譜聯用儀（AgilentTechnologies）、±0.01 g電子天平、均質器、離心機和氮吹儀。

1.3 儀器條件

（1）色譜條件。色譜柱：VF-1701MS石英毛細管柱 （30 m×0.250 mm×0.25 μm）；柱箱程序升溫：40 ℃保持 1 min，然后30 ℃/min升溫至130 ℃，再以5 ℃/min升溫至250 ℃，10 ℃/min升溫至300 ℃保持5 min；進樣口溫度：280 ℃；碰撞氣為氮氣，載氣為氦氣，純度≥99.999%；流速：1.2 mL/min；進樣量1 μL；進樣方式為不分流進樣。

（2）質譜條件。離子源溫度：230 ℃；傳輸線溫度： 280 ℃；電離方式：EI；溶劑延遲：5 min；測定方式：多反應監測。

1.4 方法

稱取15 g試樣于50 mL離心管中，加入15 mL 1%醋酸乙腈溶液進行均質提取，在離心管中加入鹽（6 g無水硫酸鎂，2 g氯化鈉），迅速混勻，渦旋振蕩1 min，4 000 r/min離心5 min。吸取離心結束的上清液8 mL進行凈化處理，加入凈化劑（1 500 mg硫酸鎂，400 mg PSA及400 mg C18），渦旋振蕩1 min，4 000 r/min離心5 min。吸取凈化完的溶液 2 mL于離心管中，進行濃縮，氮吹至近干，加入1 mL丙酮復溶，過濾膜，上機。

2 結果與分析

2.1 質譜條件的優化

對咪鮮胺以及2,4,6-三氯苯酚標準溶液進行全離子掃描。選擇碎片中豐度比較高的碎片離子作為定性定量母離子。咪鮮胺母離子碎片為：180（定量離子）、196（定性離子）；2,4,6-三氯苯酚母離子碎片為：196（定量離子）、132（定性離子）。檢測在不同碰撞能量下，母離子碎片的碰撞情況，得到母離子-子離子對，表1為優化后的母離子-子離 子對。

表1 咪鮮胺及其代謝物多反應離子監測條件

2.2 咪鮮胺及2,4,6-三氯苯酚定性、定量離子圖譜

圖1和圖2為優化質譜條件下咪鮮胺及2,4,6-三氯苯酚的定性、定量離子圖譜。

圖1 咪鮮胺定性、定量離子圖譜

圖2 2,4,6-三氯苯酚定性、定量離子圖譜

2.3 建立基質校正曲線

吸取一定量的2,4,6-三氯苯酚和咪鮮胺標準溶液，以凈化后的辣椒基質溶液為溶劑，配制基質混合標準溶液使其終 濃 度 為0.1 μg/mL、0.2 μg/mL、0.5 μg/mL、1.0 μg/mL、 2.0 μg/mL。繪制標準曲線得到線性回歸方程，結果見圖 3和圖4。R2都在0.999以上，表明咪鮮胺及2,4,6-三氯苯酚在0.1～2 μg/mL范圍內線性關系良好。以10倍信噪比計算方法的定量限(S/N=10)，咪鮮胺為0.006 6 mg/kg，2,4,6-三氯苯酚為0.000 4 mg/kg。

圖3 2,4,6-三氯苯酚的基質校正曲線

圖4 咪鮮胺的基質校正曲線

2.4 回收率和精密度的測定

對辣椒樣品進行3水平，6平行實驗，選擇低、中、高3個不同濃度進行加標實驗。計算加標回收率以及精密度，結果見表2。

表2 咪鮮胺及其代謝物在3個添加水平下的平均回收率及其相對標準偏差

咪鮮胺的平均回收率在91.9%～118.3%，相對標準偏差在1.82%～6.95%；2,4,6-三氯苯酚的平均回收率在85.1%～118.0%，相對標準偏差在1.22%～7.64%。結果表明該方法具有較好的回收率及精密度，能夠滿足辣椒中咪鮮胺及代謝物殘留量的檢測。

3 結論

本文建立了辣椒中咪鮮胺及其代謝產物2,4,6-三氯苯酚殘留量的檢測方法。通過操作簡單的QuEChERS前處理方法，利用氣相色譜-三重四極桿質譜儀對咪鮮胺及其代謝產物2,4,6-三氯苯酚殘留量進行了定性和定量分析。避免了復雜煩瑣的前處理程序以及毒性試劑的使用。通過該方法檢測，咪鮮胺和2,4,6-三氯苯酚的定量限分別為 0.006 6 mg/kg和0.000 4 mg/kg，檢測靈敏度高；繪制的5個點的濃度曲線，線性良好；在3個不同添加水平下，均獲得了良好的回收率。因此，可采用該方法檢測辣椒中咪鮮胺及其代謝物2,4,6-三氯苯酚殘留量。