廣西地區克氏原螯蝦繁育技術及展望

袁 暢，陸專靈， 黃彬勝，王大鵬*， 李文紅*

（1.廣西大學動物科學技術學院，廣西南寧 530004；2.廣西水產科學研究院，廣西水產遺傳育種與健康養殖重點實驗室，廣西南寧 530021）

克氏原螯蝦（Procambarus clarkii），俗稱小龍蝦，由于國內市場的持續火爆，其養殖范圍已擴大至全國各地，據《中國漁業統計年鑒》顯示，僅2020年，克氏原螯蝦在全國養殖總面積就達到1 456×104km2，養殖產量更達到239×104t［1］。苗種是克氏原螯蝦養殖業，乃至整個克氏原螯蝦產業的基礎。當前，市場供應的克氏原螯蝦苗種來源多為地籠捕撈的自繁苗或野生苗［2－3］，存在規格大、供應期短、長途運輸困難等問題［2，4－5］，嚴重制約了外地引種、反季節養殖、一年多造養殖等新模式的發展。長期的“自繁自養”模式，也導致良種選育和優質苗種的規模化繁育滯后，逐漸表現出商品蝦個體小型化、生長速度減慢、出肉率降低和病害發生率高等問題［6］。改變苗種繁育模式，根據養殖需求批量供應人工苗種，從“放種蝦”模式轉向“放蝦苗”模式，根據水體承載量準確投苗、科學管理，是推動克氏原螯蝦養殖業標準化的關鍵，更是廣西發揮氣候優勢，實現規模化冬閑田反季節養殖的前提。本文基于克氏原螯蝦繁殖生物學現狀、親蝦選擇和繁育影響因素，分析了廣西克氏原螯蝦的育苗模式與技術，并對廣西克氏原螯蝦繁育趨勢進行了展望，以期為提高廣西克氏原螯蝦繁育技術提供參考。

1 克氏原螯蝦繁殖生物學現狀

1.1 性腺發育分期

克氏原螯蝦生產中多使用曬田脅迫方式促進性腺發育，以提升產卵的同步率。這就需要通過定期抽檢以判斷不同養殖田塊的蝦性腺發育程度，從而制定生產流程。一般把精巢發育分期分為5個階段或者6個階段，其中把精子的發育分為6個階段［7］，根據細胞核形狀和濃縮程度等進行分期的方法肉眼不易觀察，更適用于性腺學術研究。也有按時間將精巢分期分成5個階段：1—3月多為精原細胞；4—6月精子細胞生成增加；7—8月新一輪精子產生；9—10月與4—6月類似，精子細胞生成增加；11—12月與1—3月類似，多為精原細胞［8］，從生產實踐考慮，此種方法以時間為依據，更利于生產使用，但在不同地區可能存在誤差。就卵巢發育階段而論，不同的研究人員分期方式也有所差異。較普遍的是分為5個時期：卵黃發生前期、卵黃發生初期、卵黃發生中期（卵黃合成期）、成熟期和產后恢復期［9－10］。也有分為7個時期：未發育期、發育早期、卵黃發生前期、卵黃發生期（初級卵黃發生期—次級卵黃發生期）、成熟期、產卵后期（抱卵蝦期—抱仔蝦期）和恢復期［11］。這兩種分期方式共同點是根據卵巢外觀、卵徑大小等將其進行分類，但后者時間跨度更大，將未發育期與發育前期也算入其中，并且將產卵后期的抱卵蝦期—抱仔蝦期與恢復期進行了區分。也有將卵巢發育根據顏色和組織學特征分為6個時期［12－13］。總體來看，目前仍缺乏標準化的性腺發育分期方式和表觀判斷方法以指導生產。

1.2 繁殖行為學

繁殖行為學關注點主要在交配時長與交配頻率，克氏原螯蝦交配時間從十幾分鐘到幾個小時不等，且在繁殖季節內，雄蝦和雌蝦都與多尾雄蝦出現重復交配現象，以雌蝦為例，最少的交配2次，多的交配3～5次，平均每個個體交配次數至少有3次以上［14］。寇祥明等［15］發現克氏原螯蝦交配行為的持續時間在1 h左右的最多見，其平均交配頻率大于3.35次。而呂建林［16］發現克氏原螯蝦交配時間一般為30 min。可以推測，交配時長和交配頻率受環境影響較大，可能與種蝦密度和性比的控制有關。

2 克氏原螯蝦親蝦選擇

2.1 種群遺傳多樣性

目前，普遍認為國內克氏原螯蝦的種群遺傳多樣性水平較高。按地域而言，江蘇地區［17］、廣西地區［18］、安徽地區［19］克氏原螯蝦的種群遺傳多樣性都具有較高水平，期望雜合度（He）在0.6～1的范圍內。克氏原螯蝦具有較強的繁殖能力，其繁殖習性易發生近親交配，出現遺傳變異［17］，表現為雜合子缺失，影響其種群偏離平衡［19］，導致遺傳多樣性產生差異。常用于克氏原螯蝦遺傳多樣性研究的分子標記技術有AFLP分子標記技術和SSR分子標記技術。譚云飛等［20］利用8個SSR標記對長江中下游13個地域群體進行遺傳分析，檢測各群體的平均期望雜合度（He）、平均多態信息含量（PIC）后發現，具有較高的遺傳多樣性。宋亮等［21］通過AFLP技術利用5對引物，在4個中國地區的克氏原螯蝦群體中進行遺傳分析，分析擴增結果表明，其具有豐富的遺傳多樣性。但通過國內克氏原螯蝦的遺傳多樣性現狀對比原產地情況得出，國內克氏原螯蝦整體的遺傳多樣性低于原產地［22］，因此可以考慮從原產地引種改良種質。

2.2 親本規格與雌雄配比

克氏原螯蝦抱卵量與雌蝦規格呈正相關，生殖群體的抱卵指數不小于5.05粒·g－1［23］，養殖戶普遍認為體重越大的雌蝦產后恢復越慢，成活率也較低，偏好投放體重25～30 g的雌蝦，而雌蝦規格是否會影響子代的生長速度和最大規格，目前未見相關研究。在雌雄配比方面，不計較養殖成本的情況下，采用1.4：1的雌雄配比效果最好，但增加雄蝦數量就會增大養殖成本，所以根據實際生產需要，使用雌雄配比為2.5：1時，單位重量的親蝦出苗量也可以保持較高水平，滿足生產需求，從而有效節約成本［24］。此外，由于克氏原螯蝦雄蝦更為好斗，降低雄蝦比例有助于提高種蝦成活率，雌雄配比為（2～3）：1時，其自相殘食率僅為5%左右［25］。工廠化繁殖對比試驗中，雌雄配比4：1時抱卵率最高［26］。由于克氏原螯蝦交配與產卵之間具有一定間隔期，可以適當推遲購進親蝦的時間，在雌蝦多數已交配的情況下，雌雄配比對于繁殖產卵不會產生影響，可以進一步降低雄蝦投放比例以節約成本［27］。

2.3 無特定病原（SPF）親本篩選

生產上使用無特定病原（SPF）親本可以避免蝦苗攜帶病毒，從源頭上降低發病率，國內對于克氏原螯蝦SPF親本篩選報道較少。CHENG等［28］基于非抱卵孵化對于紅螯螯蝦提出了脫毒技術，首先把卵粒從母體上分離，粘附在網片上，用75%酒精消毒60 s，再用無菌富氧水清洗后分批放入孵化器，定期消毒孵化用水和卵粒，再檢測篩選出SPF蝦苗。克氏原螯蝦也有類似的離體育苗技術［29］，因此，紅螯螯蝦這種SPF親本篩選方法可對克氏原螯蝦提供借鑒。克氏原螯蝦SPF親本篩選技術并未在生產中普遍應用，一方面是該技術不如抱卵孵化方式便利，后者中母蝦游泳足劃動為卵提供的溶氧更充足，有效的振動（或刺激）經過卵膜絲到達卵膜可能啟動胚胎發育，孵化率也更高［30］；此外，在白爪小龍蝦上，通過對比SPF親蝦篩選技術與抱卵孵化方式得出，抱卵孵化更加便利［31］，這對于克氏原螯蝦也具有參考價值。另一方面是由于克氏原螯蝦懷卵數量少，種蝦需要量大，SPF親本保種成本高昂。建立種蝦是否攜帶特定病原的快速檢測技術，可能是更有效的SPF親本篩選方式。

3 克氏原螯蝦繁育影響因素

3.1 水溫

水溫是影響克氏原螯蝦胚胎發育和幼體生長速度的最關鍵因素，適宜溫度范圍內，隨溫度的升高，受精卵孵化時間也隨之縮短［32］。對克氏原鰲蝦受精卵發育的溫度因素建立數學模型，進行分析后得出，當水溫超過35℃或低于7℃時，受精卵孵化后，其幼體容易死亡，最適溫度和最高臨界溫度分別為30.3℃和40.3℃，其最低有效積溫和平均有效積溫分別為731℃·d和765℃·d［33］。研究發現，水溫控制在21℃～25℃，最利于胚胎發育［34－35］，但水溫28℃時，克氏原螯蝦的性腺成熟系數較高；綜合考慮成活率和性腺成熟系數，親蝦培育水溫宜控制在25℃～28℃［36］。在水溫誘導雌蝦產卵方面，研究表明水溫16℃～18℃為最佳誘導溫度，持續5～14 d可促進卵巢成熟的克氏原螯蝦產卵［37］。

3.2 水質與水深

克氏原螯蝦苗種繁育池的水體一般較淺，溶解氧、水溫、pH極易受氣象變化的影響［38］。關鍵在于保持水質的穩定，每次換水量不宜超過水深的1／3，換水后用0.2×10－6濃度的二氧化氯消毒，第三天再使用微生態試劑調節水質［39］。最適水深因繁殖模式而異，對比試驗結果表明，克氏原螯蝦土池繁育模式最適水深為0.5～1 m［39－40］，小型塑料育苗池室內繁育最適水深為15 cm［41］，大型育苗池室內繁育水深保持在1 m左右為宜［42］，室內網箱繁育最適水深則為0.6 m左右［43］。

3.3 隱蔽場所與密度

提供隱蔽場所和優化放養密度是在育苗期間減少克氏原螯蝦自殘的有效手段。研究表明，遮光和添加隱蔽物有利于提高克氏原螯蝦的交配和抱卵［44］，但在洞穴類的隱蔽所環境下生長的克氏原螯蝦蝦苗，在存活率提高的同時，規格會遜于沒有隱蔽所的克氏原螯蝦［45］。育苗期間可選擇伊樂藻、馬來眼子菜、水花生、水葫蘆和菱等水生植物作為隱蔽所，面積占池塘總面積的2／3以上［46］。隨著水生植物覆蓋度的增加，克氏原螯蝦蝦苗的生長和蛻皮頻率有所提高［47］。育苗期間使用其他材質的遮蔽物則重點應考慮遮陰性和透氣性，可選擇一些遮蔽物組合如“水草＋石棉瓦＋磚塊”［48］或“磚塊＋集成塑料杯”［43］。隨著放養密度的增加，克氏原螯蝦蝦苗的成活率、生長速度和蛻皮率均下降；50 ind·m－2左右的放養密度和大約50%的遮蔽物覆蓋率對于室內培育克氏原螯蝦苗種是最佳的［49］。

3.4 投飼物

改善投飼物的營養成分對克氏原螯蝦繁殖性能至關重要。克氏原螯蝦卵巢在發育中會利用肝胰腺中已存儲的脂肪，發育后期營養物質的積累存在一定比例，在卵巢發育及胚胎發育過程中脂肪酸C18：2n6有重要作用［50］。隨著飼料脂肪水平的升高，性腺指數、抱卵率、抱卵量均呈現先上升后降低的變化規律，在飼料脂肪水平為7.89%時達到最大［51］。隨著飼料中植物蛋白水平的提高，克氏原螯蝦增重率和繁殖能力均顯著下降［52］。且投喂草魚肉比投喂植物性飼料更能促進克氏原螯蝦親蝦性腺發育［53，36］。可見加強營養對克氏原螯蝦繁育具有明顯作用，但生產中由于投喂動物性飼料容易造成水質惡化，限制了養殖戶的使用，急需開發應用新型、安全、高效、優質、價廉的親蝦催熟培育可替代餌料。維生素E能促進性腺激素的產生，李銘等［54］研究也證實，在飼料中添加0.02%的維生素E可提高克氏原螯蝦雌蝦的繁殖力。宋光同等［55］認為，在飼料中同時添加維生素C、維生素E和高度不飽和脂肪酸能提高克氏原螯蝦的抱卵率、孵化率。

4 廣西克氏原螯蝦的育苗模式與技術

4.1 半人工育苗模式

當前廣西使用最廣泛的池塘育苗模式和稻田育苗模式均屬于半人工方式育苗模式，技術關鍵點主要在于通過種蝦密度、水位、水草、飼料等條件的控制，提高抱卵率和苗種生長速度，實現苗種批量上市和提前上市。

一般稻田育苗模式每畝放養親蝦30～40 kg［56－57］，池塘育苗模式則可增加至80～100 kg［40］。使用開溝或堆土方式設置深水區和淺水區，滿足種蝦和苗種對水深的不同需求，也便于排水曬田，促進種蝦同步性腺成熟。水草多選用輪葉黑藻，輔以水花生、水葫蘆等漂浮植物，其他如苦草、菹草等沉水植物與輪葉黑藻套種后多數被輪葉黑藻壓制。有企業嘗試從外省引進伊樂藻，但夏季生長不佳。廣西克氏原螯蝦養殖業起步較晚，養殖企業首先從外省引進種蝦，經一到兩年的適應期，形成自有種群。每年9月至10月從外省引進部分種蝦作為補充，避免種蝦近親交配。由于長途運輸成活率較低，企業選擇體重20～30 g之間的小規格種蝦，不符合親本選優原則。

近年來，廣西已逐漸形成了一批能夠批量供應苗種和種蝦的養殖企業，育苗模式也由最初的原塘繁育模式轉向繁養分離模式，即苗種繁殖與成蝦養殖分開進行，繁育稻田專注生產蝦苗，養殖稻田專門把蝦苗培育成商品蝦出售，改“一次放苗、多年養殖”的粗放式種養為“繁養分離、精準放養”高效養殖，從增產向提質轉變［58－60］。這種模式較“繁養一體”模式在苗種上可合理布局繁養配比，就近生產苗種；在池塘育苗和稻田育苗上操作簡便，曬田時間更充足，養殖池塘（稻田）不用開挖溝坑，可減少成本，解決因土質原因無法改造池塘（稻田）的問題；更重要的是，這種模式下，繁育稻田的種蝦就近選自養殖田塊，可以精準控制投放數量和投放規格，便于建立標準化生產管理，即親本定向選配、強化培育、控制密度、精準管理等［58，61－62］。廣西繁育稻田只種植一季中稻，即每年5月初插秧，9月上旬收割完畢，9月至11月為育苗期，苗種在12月起基本售完，存塘苗種可進行冬養，到第二年4月份售完，曬田后，開始下一年度水稻種植。成蝦養殖稻田則可種植兩季水稻，或一季選擇生長周期長的品種，延長成蝦養殖時間，增加大規格蝦比例［58］。繁育稻田每667 m2（畝）投放種蝦40 kg以上，曬田促熟后回水，10月下旬即可見大量蝦苗出現。此時應及時采苗［39］，通過不斷捕撈減少大規格苗種對小苗的殘食，提升苗種產量。一般稻田育苗畝（667 m2）產可達100～150 kg［56－57，63］，而池塘育苗則在200～300 kg［4，64］，其產量受放養密度、飼料供給、水質調控和敵害殺滅情況等管理水平的影響。由于捕撈方式主要為地籠捕撈，因此苗種至少需達到3 g體重以上，才能被批量捕撈上市。通過科學管理，11月中旬苗種可達到捕撈規格，持續出苗到次年3月。

4.2 車間育苗模式

車間育苗模式又稱工廠化育苗模式，屬于全人工方式育苗，是將已抱卵或性腺基本成熟的親蝦移入車間進行親本培育和幼苗管理，具有規格整齊、品質好、計數準確、方便捕撈和運輸的優點。

早期的工廠化育苗是將棚舍架設在面積100～300 m2的水泥池或土池上，水泥池高1 m，池中水深60～80 cm，棚舍內設有進排水設施和增氧設施［65］。主要采用控制光照、流水刺激、增氧泵增氧、投喂飼料和設置水草等方法人工誘導克氏原螯蝦同步自然交配產卵，再收集抱卵蝦在孵化溫室內孵化和進行幼蝦培育［66］。此種方法成本較高，首先親蝦在繁育池培育至抱卵的過程中死亡率較高；其次要保證同步出苗，需定期將胚胎發育期接近的抱卵蝦挑選至同一培育池。苗種售價高達1 500元·（萬尾）－1，缺乏競爭優勢，因此發展緩慢。

近年來，在廣西地區隨著克氏原螯蝦養殖區域的快速擴增，尤其是反季節養殖模式（冬閑田養殖模式）的興起，工廠化育苗模式因其出苗早、苗種運輸方便又受到重視。盡管相關研究報道不多，但許多廣西本地企業做出了嘗試，使用小規格分層育苗箱、帆布桶等作為育苗容器，降低設施成本；將幼蝦放置在低溫水中抑制其生長，待累積到一定數量后再集中中培，以解決出苗不同步的問題等。工廠化育苗可在10月份出苗約0.45萬尾·m－2［67］，冬閑田養殖10月多放苗2萬尾·667m－2即可［68］，故每5 m2的產量即可供應667 m2稻田，因此可推廣在庭院內的小規模工廠化育苗，養殖戶自繁自用，可大幅度降低育苗成本。總體來看，工廠化育苗單位面積出苗量高［69］，出苗時間早，苗種可以提前1個月以上進入養殖塘，是反季節養殖模式的供苗首選方法。

4.3 苗種中培技術

由于廣西天然水體中罕有克氏原螯蝦分布，沒有天然苗種可供捕撈，苗種供應完全依賴繁育場或外省運輸，而克氏原螯蝦的苗種運輸一直存在較大問題，研究表明，采用干法運輸時，蝦苗規格越大，存活率則越高，且霧化處理比淋水處理能更好提高蝦苗的存活率［70］。投放前，先將蝦苗在池水中浸泡3～5 min，再放池邊2～3 min，反復2～3次，讓蝦苗逐步適應，可減少鰓絲充血，提高蝦苗成活率［71］。但在運輸時間超過5 h的情況下，即使嚴格按上述操作，成活率也普遍低于60%。工廠化育苗培育出的1 cm苗，俗稱“牙簽苗”，可采用充氧帶水運輸方法，成活率超過90%，但“牙簽苗”直接下田對除清野雜敵害有很高的要求，如中培到1 g體重再下田，則可以大幅度提升幼蝦成活率，降低管理難度。苗種中培的控制條件目前尚缺乏研究，僅有資料報道溫度高于28℃會影響幼蝦存活［72］。研究發現，光照強度在124.31～195.31μmol·m－2·s－1階段，三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）幼苗存活率最高［73］。這可為克氏原螯蝦苗種中培提供借鑒。由于冬閑田養殖對早苗尤其是大規格早苗的需求，廣西一些企業開展了苗種中培試驗，借鑒南美白對蝦的育苗方式，從仔蝦離體開始，逐步投喂單胞藻、輪蟲和蝦片［74］，將仔蝦培育到1 g以上體重，但該方法成本較高。一些企業從養殖田塊改造著手，將稻田“小改大”后形成的大塊稻田重新分隔成面積為667 m2的養殖單元，可以更徹底地殺滅敵害，從而降低對仔蝦中培規格的要求。

5 廣西克氏原螯蝦繁育研究展望

廣西克氏原螯蝦養殖區最初主要分布在南寧市良慶區、上林縣，柳州市柳北區、柳江區及百色市田東縣等，主要為企業引進集中試驗養殖［75］。隨著冬閑田養殖模式的推廣，已經形成了上林縣、興賓區、桂平市等幾個主要連片養殖區。冬閑田養殖小龍蝦上市高峰期主要在3月至4月，與長江中下游地區形成錯峰上市，每667 m2增收可達4 000元以上，目前廣西已提出充分發揮氣候優勢，大力發展稻蝦綜合種養，打造百萬畝養殖面積，實現百億元產值的目標。近3年，每年新增養殖稻田養蝦十萬畝以上，苗種需求量不斷增加。

克氏原螯蝦一般每年繁殖一次，從交配高峰期到孵化的時間主要根據當地氣候、溫度等決定，短則30～40 d，長則2個月左右，孵化后到蝦苗上市一般需要1個月時間。廣西冬閑田主要養殖時間為11月至次年4月，而長江中下游主產區克氏原螯蝦的供苗高峰期為4月到6月［76－77］，不符合廣西需求。據廣西桂中地區雌性克氏原螯蝦卵巢發育初步調查結果顯示，7～8月卵巢發育迅速，8月下旬已經出現大量成熟卵母細胞，自然條件下9月中旬開始大規模抱卵［78］。推測其原因，是由于廣西夏季高溫期長，導致克氏原螯蝦性成熟提前，通過投喂優質餌料，改進捕撈方式等手段，桂中地區完全可在11月前為冬閑田養殖批量供應苗種。

目前廣西主要地級市基本都有克氏原螯蝦養殖場分布，要解決苗種供應問題，急需從以下幾個方面著手。一是開展全面調查，確定各地繁殖高峰，做好繁育場布局規劃，充分利用本地蝦苗開展養殖。二是完善反季節苗種繁殖技術，盡快突破抱卵蝦批量捕撈技術和秋繁環境控制技術，建立標準化的小規模工廠化育苗流程。三是提高小規格苗種中培技術，從運輸、溫度、光照等方面著手，減少損耗，提高苗種成活率，解決苗種供應問題，增加經濟效益。四是聯合科研院校和企業，在推動小規模工廠化育苗的同時，鼓勵專業化苗種場的建設，構建以企業為主體的商業化苗種生產體系。