劉鑫 安麗麗 彭瑋

摘要:細菌感染可以引起全身性感染,其中金黃色葡萄球菌和大腸桿菌是造成細菌感染的主要致病菌。中藥因其具有活性成分豐富、不易產生耐藥性等特點,已成為篩選研發新型抗菌藥物的一個重要來源。因此,本研究擬以臨床上常見的解表藥、清熱解毒藥、清熱燥濕藥等為研究對象,篩選具有抗菌活性中藥,進而以中醫基礎理論為指導,篩選具有抗菌活性組方。為中藥抗菌臨床應用奠定理論基礎。
關鍵詞:細菌感染;中藥抗菌;敗醬草
細菌感染是一種由致病菌或條件致病菌侵襲機體,產生毒素和其他代謝產物引起的急性全身性感染的疾病。
中醫藥用于治療感染性疾病有著數千年歷史,積累深厚,療效卓越。《本經》中記錄“連翹主寒熱,鼠痿,瘰疬,癰腫惡瘡,癭瘤,結熱”。隨著中醫藥現代化研究不斷深入,許多中藥在治療感染性疾病方面表現出獨特優勢,并且由于其具有來源廣、易獲取、價格低廉、活性成分豐富、不易產生耐藥性等特點,已成為篩選研發新型抗菌藥物的一個重要來源。本研究擬以臨床上常見的解表藥、清熱解毒藥、清熱燥濕藥等為研究對象,探究對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌抗菌活性,進而以中醫基礎理論為指導,篩選具有抗菌活性組方。
1 方法
1.1中藥材水提取物制備
稱取中藥材各30g,以5倍體積水150mL,回流提取三次,每次2h,合并提取液,用旋轉蒸發儀濃縮后得到濃縮膏后置于 ZK-82B 型真空干燥箱中 60℃下濃縮至浸干得半成品,檢測后經粉碎、過篩混合獲取干燥粉末3g,1g粉末相當于原藥10g,低溫干燥處儲存備用。
1.2最小抑菌濃度(MIC)測定
根據美國臨床實驗室標準化協會(CLSI)規定的肉湯稀釋法敏感性試驗執行標準,測定36種中藥水提物對金黃色葡萄球菌ATCC29213和大腸桿菌ATCC25922最小抑菌濃度(MIC)。
1.3抗菌組方篩選
根據上述抗菌篩選,對具有抗菌活性的中藥水提物進行組方篩選。
2結果
2.1 MIC結果
36種中藥水提物對金黃色葡萄球菌有不同程度的抗菌效果,具體見表1。
據目前研究表明,中藥提取物對上述兩種菌株的MIC在7.82~31.25mg/mL之間。結合本研究結果,初步判定對金黃色葡萄球球菌具有較強抗菌活性的中藥水提物為金銀花(綠原酸),連翹敗,敗醬草,金銀花(1%木樨草苷),大黃(10:1),大黃(10%大黃素),野菊花(4%黃酮),蒲公英(5%黃酮),其MIC在0.625~5mg/mL之間。
36種中藥水提物僅有2種對大腸桿菌具有抗菌作用,具體見表1。
2.2抗菌組方確定
根據上述測定結果,初步確定組方中含有7種成分即敗醬草、金銀花、連翹、黃芩、蒲公英、野菊花、牡丹皮,進而通過兩種不同得比例組方進行抑菌試驗,組方1即每種藥物1:1,測定結果為對金黃色葡萄球菌的MIC是10mg/mL,對大腸桿菌的MIC大于40mg/mL;由于對大腸桿菌的抗菌效果差,進而測定組方2即連翹占比50%,其余6種藥物比例均分,測定結果為對金黃色葡萄球菌的MIC是10mg/mL,對大腸桿菌的MIC 40mg/mL。
3討論
細菌性感染疾病在祖國醫學中多屬于濕、熱病證的范疇,且多將細菌歸屬為熱毒之邪。細菌性感染疾病涉及了呼吸、消化、泌尿等各大系統。根據證治理論,抗菌中藥多集中選取清熱解毒藥和清熱燥濕藥。本實驗選取不同種類中藥對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌進行抗菌活性的系統篩選,深入明晰不同類別中藥的具體抗菌活性。通過表1分析,大多數中藥水提物具有對金黃色葡萄球菌抗菌作用,但對大腸桿菌的抗菌效果卻不理想。從整體來分析,對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌都具有抑制效果的藥物集中在清熱解毒類,主要是連翹。因此,本研究在進行組方篩選時,著重考慮連翹得抗菌作用,提高其在組方種得占比,從而使該組方對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌均具有抗菌活性。
綜上所述,以連翹為主的中草藥組方對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌具有抑制作用,但是其具體作用機制有待進一步研究。加之,中醫方劑學特色即為運用“君臣佐使”配伍組成的處方能更好的服務臨床,因此,后期我們將深入開展機理研究的同時,考察藥物配方、劑量配比并開展劑型研究,挖掘中草藥潛力,服務人民健康。
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基金項目:貴州省科技計劃項目(黔科合基礎-ZK[2021]一般 083);貴州中醫藥大學博士啟動基金(貴中醫博士啟動[2019]123號)
作者簡介:劉鑫(1990-),女,漢族,黑龍江省北安市,講師,博士研究生,中藥藥理。