益生菌在口腔中的應用研究

張 環 尹利娟 陸 瑜 鄧全富 何家俊 陳 欣

(重慶登康口腔護理用品股份有限公司，重慶 400025)

引言

隨著科技的不斷發展，工藝裝備的不斷改進和完善，口腔護理產品形式由單一的清潔型牙膏發展成為功能多樣，能滿足不同層次消費水平的各種品類[1]。而其中功效成分是幫助功效型牙膏或者其他類型口護產品實現除基本功能之外的一種或者多種功效的原料成分，有防齲劑、脫敏劑、除漬美白劑、抗牙結石劑、口氣清新劑、植物提取成分和生物活性成分等[2]。益生菌作為新型的抗菌功效型成分現已得到越來越多的應用，制備成多種產品方式發揮有效護理口腔的作用。因此，口腔護理產品通過添加益生菌，起著有效控制口腔中細菌，平衡口腔菌群。在細菌層面健康平衡了，口腔問題自然就迎刃而解了[3-4]。

1 益生菌與口腔

口腔中有幾百種細菌，這些細菌與我們的口腔是相生相依的。依據這些細菌對人體口腔作用簡單被劃分為有害菌和有益菌。有害菌是對我們口腔造成危害的細菌，主要有變異鏈球菌、遠緣鏈球菌以及具核梭桿菌等。這些有害菌存在于我們的口腔中，并能將口腔中殘留的食物殘渣分解成酸，或者其他有害物質，進而腐蝕我們的牙齒和牙齦，同時還會釋放硫化氫氣體——一種導致我們口臭的病因。而有益菌則是對口腔有益處的一類菌，故被稱作益生菌，比如副干酪乳桿菌、鼠李糖乳桿菌等。這一類益生菌主要通過與口腔中有害菌競爭黏膜表面的結合位點，減少致病菌的定植，并能分泌有機酸、過氧化氫和細菌素等多種抗菌物質，從而抑制致病菌的生長[5]，達到平衡口腔菌群，預防口臭和口腔疾病，清新口氣的作用。

益生菌本身是一類定植于人體，能改善宿主微生態平衡，發揮有益作用的活性微生物的總稱，主要來源于乳桿菌屬、乳球菌屬、鏈球菌屬、雙岐桿菌屬和酵母菌屬等。口腔內定植的細菌達700多種，可致多種感染性疾病的發生。而多項體外及臨床試驗表明有益生作用的常駐菌在預防口臭、牙周疾病、口腔念珠菌病等口腔疾病中發揮著重要的作用，而這與益生菌能在口腔中定植有直接關系[6]，研究顯示鼠李糖乳桿菌經口攝入后可在口腔粘膜定植兩周，唾液鏈球菌K12對多種口腔細胞有粘附性，容易在口腔內定植。其研究表明在口腔內更易定植的菌發揮的有益效果會更佳明顯。

2 益生菌與清新口氣

目前國內外的眾多研究表明，益生菌在清新口氣方面具有一定的作用。口氣的產生主要由口腔內細菌，尤其是由聚集在舌后1/3處的革蘭陰性厭氧菌發酵產生的揮發性硫化物所引起的。90%的口臭根源來自口腔，也有部分是由腸道的問題導致的。Delanghe G等[7]報道，益生菌能同時解決口腔和腸道問題，有效防治口臭。Kang等[8]報道使用含益生菌的漱口水漱口能顯著降低揮發性硫化氫的產生。Iwamoto等[9]給口臭患者服用益生菌后，發現口臭的各項指標明顯下降，患者口臭的感官評分降低，牙周探針時出血減少。另有研究發現健康年輕人早晚嚼服益生菌的口香糖后，口臭的感官評分降低[6]。

刷牙已經成為維護人類口腔健康的主要方式。陸藝峰等[2]在研究中通過優化益生菌添加量制作含益生菌的牙膏，采用吸光度法(以△OD值表示)表示益生菌對致病菌的影響。其中△OD值增長越慢，表明益生菌對致病菌的生長抑制效果越好，△OD值為負表明有殺菌作用。經含益生菌牙膏對變異鏈球菌、遠緣鏈球菌和具核梭桿菌進行抗菌測試結果顯示：①6h時，對照組△OD值為0.11，含益生菌的牙膏實驗組的△OD值為-0.06，表明含益生菌牙膏的實驗組能有效抑制變異鏈球菌的生長；②6h時，對照組△OD值為0.1，含益生菌的牙膏實驗組的△OD值為-0.03，表明實驗組能有效抑制遠緣鏈球菌的生長；③6h時，對照組△OD值為0.01，含益生菌的牙膏實驗組的△OD值為-0.01，表明實驗組能有效抑制具核梭桿菌的生長，而具核梭桿菌是口臭的主要致病菌之一。該研究表明，含益生菌牙膏相比空白對照組能夠平衡口腔菌群，強化口腔自我清新能力，清新口氣，祛除口腔異味。

為了研究益生菌和口臭致病菌直接作用的效果，楊雯潔等[10]通過體外培養益生菌對代表型口臭致病菌牙齦卟啉單胞菌(P. gingivalis，Pg)、具核梭桿菌(F. nuclearum, Fn)抑菌作用。該實驗將益生菌與上述兩種有害菌進行混合厭氧培養6h、12h、24h和48h，觀察其競爭排斥實驗結果。下表1中的實驗結果表明益生菌對代表型口臭致病菌牙齦卟啉單胞菌(P. gingivalis，Pg)、具核梭桿菌(F. nuclearum, Fn)具有顯著拮抗作用，同時益生菌的代謝產物中存在有效的抑菌物質，特別是對Pg生長具有顯著的拮抗作用，而這進一步表明益生菌作為對宿主有益的菌，對口臭致病菌有良好的抑制作用有望應用于今后的口臭臨床治療。文中選擇益生菌中兩種代表菌保加利亞乳桿菌菌( Lactobacillus delbrueckii subsp. Bulgaricus，Lb)和唾液鏈球菌( Streptococcus salivarius, Ss)與口臭致病菌混合培養，有害菌數量明顯降低，具體結果見表1[10]。

表1 各時間點益生菌與Fn、Pg混合培養時的生物量

通過大量的文獻研究顯示[11-12]，益生菌對致臭菌的作用機理可能在于：無論是添加在牙膏、漱口水、口香糖中或直接作用的益生菌可與致臭菌競爭口腔粘附位點或產生細菌素(即益生菌的副產物)抑制產生揮發性硫化物細菌的量，減少致臭菌定植，從而降低口腔揮發性硫化物量。

3 益生菌與牙周健康

牙周病發生的外在表現形式主要為牙菌斑、牙結石。有研究表明益生菌可通過降低口腔pH值，防止牙菌斑和牙結石的形成，同時抑制有害菌，以防止牙周病的發生，維護牙周健康。

益生菌在牙周健康方面的研究有很多。Gruner等[13]、Gungor等[14]、Matsubara等[15]、Twetman and Keller等[16]的研究先后得出適量的益生菌能治療牙周病的結論。Matsubara等證實益生菌能改善牙周病患者的牙周狀況。Gungor等采用益生菌干預后，探測出血、牙齦指數和探測袋深度明顯減少。對于牙周病原菌，現有的實驗和臨床研究發現，益生菌菌株可以減少牙周病原菌數量，包括聚集放線菌、牙齦卟啉單胞菌、中間普雷沃特菌和具核梭桿菌。其中牙齦卟啉單胞菌和具核梭桿菌是口臭的主要致病菌。還有研究發現，牙齦健康者服用益生菌飲品28d后，可以降低因碳水化合物飲食產生的牙齦炎癥反應[6]。但Slawik S等[17]的研究發現牙周病患者服用羅伊氏乳桿菌含片后，牙菌斑的組成和炎癥因子同安慰劑組相比并無明顯差異。

Honkala2. A等[18]通過臨床試驗研究鼠李糖乳桿菌和乳酸雙岐桿菌含片對青少年牙齦健康、牙菌斑和牙周病原的影響，測定益生菌干預組和空白對照組對青少年牙齦健康和牙菌斑以及四種可能的牙周病原的影響。研究結果表明，與對照組相比，益生菌組的牙齦指數明顯降低，菌斑水平受牙齦指數影響也明顯降低，從而能改善牙周健康。

一些臨床研究表明，益生菌還能減少口腔念珠菌的數量。Hatakka等[19]發現一組老年人在使用了含有鼠李糖乳桿菌LC705株以及丙酸菌的奶酪16周后，口腔中的念珠菌計數明顯下降。42名健康老年人服用含干酪乳桿菌和短雙岐桿菌的益生菌飲料，念珠菌數量亦明顯下降，抗念珠菌lgA水平明顯升高[20]。

此外，變異鏈球菌是齲病發展過程中的主要致病菌，臨床研究顯示鼠李糖乳桿菌、雙岐桿菌、嗜酸乳桿菌等益生菌對致齲菌有抑制作用。Aminabadi等[21]給105名兒童使用含鼠李糖乳桿菌GG株的酸奶后，口腔致齲菌的數量很快明顯下降。Jindal等[5]給予150名7～14歲的硬度兒童服用兩種含益生菌的粉劑14 天后，含鼠李糖乳桿菌、長雙岐桿菌及釀酒酵母菌和含有凝結芽孢桿菌的兩組益生菌組的變異鏈球菌數目均較安慰劑組明顯下降。

4 展望

當前，益生菌作為一種新的健康維護的概念引發越來越多的關注，益生菌對人類口腔健康的促進及調節作用也已逐漸被認知，并已開始在包括口腔護理等領域得到了諸多應用實踐。如今市面上已有大量的含益生菌的口腔護理產品，包括益生菌牙膏，益生菌含漱水，益生菌含片等多種形式。

綜述了益生菌對口腔發揮有益作用的主要原理，即益生菌能發揮有益作用在于其能定植于口腔粘膜細胞，并與口腔致病菌競爭粘附點，其次表明益生菌的代謝產物也能發揮有益作用。大量的研究結果表明益生菌能抑制口臭致病菌，清新口氣，維護牙周健康。雖然大多數情況下益生菌對人體是安全的，致病可能性非常低，但為了保證益生菌的安全使用，仍需對益生菌的有效性和安全性進行長期深入研究和持續評估。