健康人群血清CA125、HE4 及ROMA 指數水平的調查

于麗麗

（內蒙古赤峰學院附屬醫院檢驗科，內蒙古 赤峰 024000）

0 引言

卵巢癌是最常見的婦科惡性腫瘤之一，發病率僅次于子宮頸癌和子宮體癌。由于卵巢癌早期缺少癥狀，自己就診的70%以上都是晚期的患者[1]，而晚期病例又療效不佳，因此，卵巢癌的早期發現對于其診斷、治療及預后都至關重要。血清學腫瘤標志物因升高早，檢測便捷，檢測優勢明顯，常用于卵巢癌篩查。CA125 是較早的臨床公認的上皮性卵巢癌血清學最佳腫瘤標志物，但CA125 假陽性率高，診斷早期卵巢癌敏感性和特異性降低。HE4 是一種比較新的卵巢癌特異性腫瘤標志物，其特異性和靈敏度高于CA125。當CA125 和HE4 檢測聯合使用時，構成卵巢惡性對數風險（ROMA，Risk Of Ovarian Malignancy Algorithm)模型，該公式包括對絕經狀態進行區分，改進HE4 和CA125 的敏感性和特異性，同時降低了CA125 的假陽性率，提高了CA125 的特異性[2],可達到76.4%的最高靈敏度和95%的最高特異性。近年來，許多地區開展了對健康成年女性CA125、HE4 和ROMA 參考區間的研究，研究表明種族、地域、年齡、絕經狀態、檢測方法等多種因素導致其參考區間的異質性[3-4]，本研究旨在對赤峰地區健康成年女性不同年齡段CA125、HE4 和ROMA 指數水平進行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020 年2 月至2021 年1 月期間赤峰學院附屬醫院各項體檢指標均正常的410 例表面健康女性作為研究者，分為未絕經組（≤50 歲）和絕經組（>50 歲），兩組再以5 年為一個年齡段分為9 個組：31-35 歲(第1 組)，36-40 歲(第2 組)，41-45 歲(第3 組)，46-50 歲(第4 組)，51-55 歲(第5 組)，56-60 歲(第6 組)，61-65 歲(第7 組)，66-70 歲(第8 組)，71-75 歲(第9 組)組。

1.2 入選標準

根據體格檢查、胸部平片檢查、腹部B 超檢查、婦科內診、實驗室檢查（包括血液腫瘤標志物、生化指標、血細胞分析，糞便常規，尿液分析）等，確定所選研究對象為無內科疾病及婦科良惡性疾病的表面健康人群。

1.3 標本的采集處理

所有體檢者禁食8h 后于早晨空腹抽取靜脈血，標本收集于5mL 分離膠試管內，于2h 內離心測定，標本無溶血、凝血和黃疸，使用德國羅氏e602 全自動電化學發光儀及配套試劑質控品檢測CA125、HE4，系統自動計算ROMA。

1.4 統計學處理

采用SPSS 21.0 統計軟件進行數示據分析,利用Dixon 檢驗剔除離群值，正態計量資料采用±s 表，各年齡組間比較采用t檢驗及相關分析，以P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清CA125 在不同年齡段的分布情況

CA125 在絕經前第1 組與第3 組（t=2.534，P=0.015）、第1 組與第6 組（t=3.450，P=0.001）、第1 組與第7 組（t=2.788，P=0.007）、第2 組 與 第4 組（t=2.325，P=0.025）、第3 組與第4 組（t=2.69，P=0.006）年齡組之間差異有統計學意義（P<0.05）；在絕經后組間差異無統計學意義，見表1。

表1 不同年齡分組CA125 檢測結果（±s，U/mL）

表1 不同年齡分組CA125 檢測結果（±s，U/mL）

年齡 例數 CA125 31-35 歲(第1 組) 56 12.943±4.264 36-40 歲(第2 組) 48 14.548±4.047 41-45 歲(第3 組) 56 14.397±4.155 46-50 歲(第4 組) 36 13.990±5.252 51-55 歲(第5 組) 40 10.094±6.372 56-60 歲(第6 組) 44 9.216±3.083 61-65 歲(第7 組) 56 10.073±3.390 66-70 歲(第8 組) 38 11.163±4.472 71-75 歲(第9 組) 36 12.526±7.606

2.2 血清HE4 在不同年齡段的分布情況

HE4 在絕經前組間差異無統計學意義（P>0.05）；在絕經后組第5 組與第7 組（t=3.205，P=0.003）、第5 組與第8組（t=3.441，P=0.003）、第5 組與第9 組（t=5.595，P<0.000）、第6 組 與 第7 組（t=2.833，P=0.007）、第6 組 與 第8組（t=3.280，P=0.004）、第6 組與第9 組（t=5.416，P<0.000）、第7 組 與 第9 組（t=3.793，P=0.001）間 差 異 有 統 計 學 意義（P<0.05），且隨著年齡的增長而增大（r=0.297，P<0.05）。見表2。

表2 不同年齡分組HE4 檢測結果（±s，pmol/L）

表2 不同年齡分組HE4 檢測結果（±s，pmol/L）

年齡 例數 HE4 31-35 歲(第1 組) 56 45.075±8.577 36-40 歲(第2 組) 48 44.430±6.254 41-45 歲(第3 組) 56 42.537±7.575 46-50 歲(第4 組) 36 43.154±5.886 51-55 歲(第5 組) 40 49.914±7.223 56-60 歲(第6 組) 44 51.606±9.775 61-65 歲(第7 組) 56 58.783±13.869 66-70 歲(第8 組) 38 70.194±25.651 71-75 歲(第9 組) 36 83.392±25.180

2.3 ROMA 在不同年齡段的分布情況

ROMA 在絕經前組間差異無統計學意義（P>0.05）；在絕 經 后 組 第5 組 與 第6 組（t=2.063，P=0.046）、第5 組 與第7 組（t=3.577，P=0.001）、第5 組 與 第8 組（t=4.069，P<0.000）、第5 組 與 第9 組（t=4.557，P<0.000）、第6 組與 第7 組（t=2.291，P=0.026）、第6 組 與 第8 組（t=3.201，P=0.004）、第6 組與第9 組（t=3.787，P=0.001）、第7 組與第9 組（t=2.652，P=0.001）間差異有統計學意義（P<0.05），且隨著年齡的增長而呈上升趨勢（r=0.317，P<0.05）。見表3。

表3 不同年齡分組ROMA 結果（±s）

表3 不同年齡分組ROMA 結果（±s）

年齡 例數 ROMA 31-35 歲(第1 組) 56 0.360±0.272 36-40 歲(第2 組) 48 0.457±0.311 41-45 歲(第3 組) 56 0.758±0.668 46-50 歲(第4 組) 36 0.277±0.195 51-55 歲(第5 組) 40 6.183±3.339 56-60 歲(第6 組) 44 8.171±2.019 61-65 歲(第7 組) 56 10.257±3.870 66-70 歲(第8 組) 38 12.902±6.164 71-75 歲(第9 組) 36 15.878±8.439

3 討論

糖類抗原125 是來源于上皮細胞的非黏液素，在卵巢腫瘤患者血清中有很高的檢出率，但某些良性婦科疾病會引起檢測結果升高，例如卵巢囊腫或子宮內膜異位，懷孕初期和一些良性疾病(例如胰腺炎、肝硬化、肝炎、良性胃腸道疾病、腎功能衰竭和其他疾病）的C125 會輕度上升[5-6]，使診斷早期敏感性和特異性降低。人附睪蛋白4（HE4,也稱WFDC2)屬于疑似胰蛋白酶抑制劑屬性的乳清酸性蛋白質（WFDC）家族。正常情況下，HE4 在人體中的表達非常低，但在卵巢癌組織和患者血清中均高水平表達，其特異性和靈敏度高于CA125,作為一種單一腫瘤標志物，HE4 對卵巢癌檢測的靈敏度最高，尤其是在早期無癥狀階段的I 期疾病中。HE4 也可作為卵巢癌術后評估預后及監測有無復發的指標。且研究表明，在正常女性月經周期中，CA125 水平會隨月經周期有浮動，而HE4 相對穩定[7]，近年來，為了進一步早期診斷卵巢癌的準確性，有專家學者將研究結果和統計學相結合提出了羅馬指數-即卵巢惡性腫瘤風險算法（ROMA 指數)這一概念。ROMA 指數通過區分絕經狀態，彌補了HE4 所使用的臨界值沒有區分絕經狀態這一不足，提高了HE4 的敏感性，同時降低了CA125 的假陽性率，提高了CA125 的特異性[8]。

參考區間（reference intervals）是指參考下限和上限之間的分布區域，是解釋檢驗結果的基本尺度和依據，判斷所檢測指標有無臨床意義往往基于其與參考區間的比較，其準確性、適用性直接影響著疾病的診斷效率[9]，雖然試劑盒廠商通常提供參考區間，但能否適用于所有地區的人群，還有待驗證。本實驗結果顯示，CA125 在未絕經組（≤50 歲）各年齡段之間有區別，在絕經組（>50 歲）各年齡段之間無區別, 且未絕經組CA125 的表達比絕經組高；HE4 和ROMA水平在未絕經組中差異無統計學意義（P>0.05），在絕經組各年齡段間差異有統計學意義（P<0.05）, 同時經相關性分 析，血 清HE4 水 平（HE4:r=0.297,P<0.05）和ROMA 水平（ROMA:r=0.317,P<0.05）與年齡較為密切，且隨著年齡的增長而呈上升趨勢。提示年齡、人體和內環境激素的變化以及絕經狀態是影響其參考區間的重要因素。

韓國學者采集了2 182 例健康者的血清，其中97.5%的健康者的HE4 水平上限為33.2pmol/L[10]。何華等人以絕經前HE4<72.25pmol/L，絕經后HE4<82.72pmol/L 為女性血清HE4 的參考區間，診斷卵巢癌的敏感性由羅氏公司參考區間所得的65% 提高到82.5%，而特異性無明顯變化[11]。本實驗采用羅氏全自動免疫分析儀e602 對血清CA125、HE4 進行檢測，檢測方法為電化學發光法，試劑盒為配套試劑盒，參考區間來源于西班牙和德國兩家臨檢中心對896 例女性的測定結果，而基于本地人群的研究結果顯示CA125 水平[上限水平（14.548±4.047）U/mL 和HE4 水平（絕經前上限水平（43.154±5.886）pmol/L，絕經后上限水平（83.392±25.180）pmol/L]明顯低于羅氏公司試劑說明書中推薦的參考區間（CA125<35U/mL;HE4<140pmol/L），提示種族、地域、檢測方法是影響CA125 和HE4 參考區間異質性的另一個重要因素[12]，如果使用試劑說明書推薦的參考區間將會降低診斷的靈敏度。

因此，研究本地區CA125、HE4 及ROMA 在血液中的水平，特別是確定正常人群血清參考范圍，對卵巢癌的早期診斷、治療監測和預后的判斷具有重要的意義。另外其他生理指標也可能影響血清HE4、ROMA 水平的分布。因此需建立適合本地區的參考區間，為疾病的診治提供科學、準確的依據，更好地指導臨床和檢驗工作。