馬 軍
(寧夏回族自治區固原市原州區彭堡畜牧獸醫工作站,寧夏 固原 756000)
牛體內生長大量的牛黏膜病毒是產生牛病毒性腹瀉的主要原因,它對牛的免疫機制造成了一定程度上的破壞,是一種熱性傳染病。牛病毒性腹瀉不僅具有高感染率,并且還常年發生,具有1~2周的潛伏期,大多數都是隱性感染。通常情況下,感染BVDV的牛普遍沒有明顯的癥狀與特征,但是一旦發病,極有可能發生死亡的現象。尤其是牛犢在發病后會出現急性癥狀,給養殖戶造成嚴重的損失,大大地降低了經濟效益。為了確保能夠及時發現病毒感染源,并采取有效的措施防止其大規模擴散,對于牛病毒腹瀉診斷與治療要進行全面、深入地研究。
牛病毒性腹瀉病毒是引起牛的病毒性腹瀉疾病的主要病原體。牛病毒性腹瀉病毒屬于黃病毒科、瘟病毒屬,被國際獸疫局定位B類傳染病。牛在感染該病毒后通常會表現出胃腸炎、血小板減少、免疫力下降、繁殖障礙等癥狀。尤其是在孕牛感染BVDV后,其生出的牛犢也會受到感染,并持續性向外界散毒,最后導致疾病的流行。BVDV具有囊膜,是單股正鏈的RNA病毒,它的病毒粒子近球形,直徑約50nm。BVDV對熱、胰酶等較敏感,在溫度達到56℃時會被滅活,在PH低于3時有較高的概率被破壞。通常來說,判斷病毒類型的重要依據是BVDV是否會引起病變,有非致細胞病變與致細胞病變兩種生物類型,目前常用牛腎細胞株MDBK培養增殖病毒。牛病毒性腹瀉病毒的檢測在疾病防控中有著重要的意義與價值。
牛病毒性腹瀉病毒呈世界性分布,具有非常高的感染率。本病易感染的動物有牛、羊、豬、鹿等,一般是通過呼吸道與消化道感染該病毒。在牛養殖中,BVDV會通過牛的分泌物不斷地向外界排毒,并且還會通過胎盤垂直傳播給下一代。如果牛胚胎的免疫系統還未完全發育,那么在小牛出生后就會大概率發生持續感染的現象,而持續感染的動物也會傳播病毒,是重要的傳染源。健康牛在接觸患病牛或者是患病牛的分泌物后,都會有很大的概率被感染,并且在人工授精或是自然交配中也會出現BVDV的傳播。此外,BVDV也可以通過昆蟲進行傳播。牛的任何生長周期都有可能遭受到BVDV的感染,尤其在牛處于6~18個月這一期間。雖然牛病毒性腹瀉病毒常年發生,但是大部分還是集中在春季和冬季。如果牛養殖處于封閉的狀態,那么一旦有牛感染并發病,就會產生爆發式疾病,并且致死率高達90%~100%。如果是牧區養殖的話,通常都是個體感染,并且大部分都是隱性的。
針對牛病毒性腹瀉的流行特點來看,牛在不同生長階段均表現為易感染階段,但是通過調查表明,幼年牛發病率要高于成年牛,同時在臨床癥狀中表現的也更加明顯。當母牛患有病毒性腹瀉后,經常會伴隨母牛流產等現象,而成年牛病毒性腹瀉患病時大部分都為隱性經過。牛病毒性腹瀉一般的傳播途徑都為病牛體傳播,牛病毒性腹瀉病毒為致病源菌體,通過成年牛的消化道或者呼吸道傳給健康母牛或幼牛。母牛感染牛病毒性腹瀉會直接垂直感染幼牛。牛病毒性腹瀉一般患病沒有明顯的季節性,在四季均可發病,大多數牛病毒性腹瀉病都為流行性經過,流行特征表現為傳播迅速,本地牛病毒性腹瀉還會出現交通干線傳播的現象,同時牛病毒性腹瀉病毒傳播方向與風的走向較為相近,對于牛病毒性腹瀉老疫區常常存在隱性感染源,新牛病毒性腹瀉疫區還會出現急性流行性經過現象。
NCPE型BVDV是造成牛感染急性病毒腹瀉的主要原因。病毒通常會寄生在具有持續性和急性感染的牛中,起初是由牛的呼吸道、消化道進入其體內的,然后在牛的口、喉、胃等器官的黏膜上,以及鼻竇等細胞進行復制,最后再流入牛的血液中,導致淋巴組織被感染。病毒會在牛的淋巴、脾、腎等多處進行繁衍,對牛的白細胞造成破壞,從而出現綜合性白細胞減少的癥狀。并且病毒在牛黏膜上的大量復制與繁衍,會使其壞死,出現黏膜糜爛的癥狀。急性感染的牛一般會出現低燒、腹瀉等較為溫和的癥狀。但是有些急性感染的牛會體現出比較劇烈的臨床表現,出現致死性出血腹瀉,其主要是因為免疫系統被病毒侵害而發生紊亂,從而引起其他病毒的繼發感染,具有較高的死亡率。由于胎盤也是病毒傳播的載體,所以對于妊娠牛的身體健康要做出積極的檢查與防護。如果孕牛在早期時就感染上了病毒,那么就會發生牛胚胎流產、死亡、畸形等現象,即使正常存活也會帶有持續性病毒感染。持續性感染的牛犢會有二次病變,發生致死性粘膜病的可能。如果孕牛在后期感染病毒,那么出生的牛犢一般無明顯的癥狀,但是會具有病毒與抗體。
在自然狀態下感染病毒的牛,具有較長的潛伏期,一般是7~10天,而人工感染的牛潛伏期只有2~3天。被病毒感染的牛表現出的臨床癥狀分為急性和慢性兩種。青年牛會更容易感染急性型病毒,并且會出現突然發病、發熱、體溫升高、白細胞減少等癥狀,在短時間內體溫可達到40~42℃。患病牛的精神會比較沉郁,不喜食料,呼吸頻率加快并伴有劇烈的咳嗽。與此同時,患病牛的眼睛和鼻腔內會產生較多的分泌物,口腔粘膜潰爛,一些感染期較長的牛口腔內會產生大量的壞死上皮組織,如同被煮一般。患病牛伴有嚴重腹瀉甚至是便血,消化道變得糜爛,很可能在發病后的1~2周內出現急性死亡,很難完全康復。
慢性BVD和ND是持續感染的接續。孕牛在早期受到病毒感染會使體內的胎兒受到持續性的感染。MD的臨床癥狀一般是突發病、伴有嚴重的腹瀉、流淚、黏膜潰爛、萎靡不振、厭食等。慢性的BVD通常是間歇性的腹瀉,在發病后期的階段,患病牛的糞便中出現血液和粘液。患病牛在發病后會出現嚴重的脫水,然后導致體重不斷降低,直至死去。雖然感染慢性型病毒的牛發病幾率較小,但是一旦發病就有90%的可能性會死亡。
急性病毒性腹瀉時,會具有較高的致死率,如果沒有經過有效的治療,一般患病30天內會出現病牛死亡。當發現急性病毒性腹瀉初期,病牛一般表現為體溫異常升高,并伴有呼吸不暢、流淚、咳嗽、精神萎靡等狀況。當患病后期牛的常年也會出現血跡,大便惡臭帶血,口腔內粘膜糜爛等現象,同時會伴隨腐蹄病以及皮膚潰爛等癥狀出現。通過具體患病牛分析,急性牛病毒性腹瀉常見呼吸急促,同時伴有鼻液流出,鼻液性狀呈膿性,隨后還會發生體溫急速上升,最高可以升高至42°C,同時出現垂涎與咳嗽現象,黃牛感染急性牛病毒性腹瀉喉還會發生食欲不振,精神狀態不佳。通過對病牛觀察分析,鼻腔干裂,并在牛的結膜出現潮紅現象,測量病牛白細胞明顯低于正常值。特殊的患病牛還會出現走路困難,無法進食,和拱背努責等現象,同時伴有間歇性腹瀉、脈搏加快,腸蠕動減弱。在急性牛病毒性腹瀉排便過程中還會伴有陣陣惡臭和竄稀,患病后期出現排便濃稠伴有血紅粘稠液。如果沒有及時治療會出現病情惡化,牛體快速消瘦,最終脫水而亡。急性牛病毒性腹瀉一般多發于幼牛期,而成年牛患有急性牛病毒性腹瀉的癥狀有所緩解,母牛也會受到急性牛病毒性腹瀉影響,患病時還會伴有泌乳減少,妊娠期感染還有可能造成母牛流產。牛病毒性腹瀉體重明顯下降,特殊的急性牛病毒性腹瀉還會出現牛行走困難,經常出現蹄葉炎現象,一般可持續5個月病程。
大部分感染BVDV的牛都不會表現出具有特征性的臨床癥狀與病理變化,所以人們很難通過臨床表現和病理剖檢診斷牛的感染情況。而牛病毒性腹瀉疾病的臨床表現與口蹄疫、腸炎、水泡性口炎等疾病的臨床表現都有相似之處,所以需要通過實驗室診斷方法確定牛是否被BVDV感染。常用的實驗室診斷方法有:細胞培養法、病毒分離鑒定、免疫學檢測、血清學檢測、瓊脂擴散實驗、RTPCR等,并且為了為保證結果的可靠性與準確性,一般使用2種或2種以上的方法。
經典的檢測方法是進行細胞培養分離到病毒后在通過免疫學方法鑒定病毒,但是由于BVDV有非致細胞病變基因型,影響了該方法的檢測率。
瓊脂擴散實驗是對病毒抗原的檢測,通過采集牛的粘膜,并將其與抗體進行反應,根據瓊脂內是否出現沉淀的變化來確定感染結果。據統計,60%的被BVDV感染的牛,在經過瓊脂擴散實驗方法檢測后,都出現了陽性結果。瓊脂擴散實驗具有操作簡單、成本低、速度快的特點,不過這也造成了它檢測較為粗略的弊端,只是對牛的血清進行檢測,不具備較高的敏感性和準確性。中和實驗的精確程度就要比瓊脂擴散實驗高得多,它能更敏感地檢測出牛的血清中的抗體,具有良好的重復性。中和試驗主要是利用細胞培養技術,將血清與BVDV進行反應,然后再將其接種在牛的細胞當中,通過觀察病毒對細胞的作用來判斷牛的感染情況。不過由于一些患病牛會有一個免疫耐受期,血清中沒有抗體,導致檢測結果呈現陰性,存在漏檢的現象。我國在對進口牛的檢疫中,不僅要通過中和試驗診斷牛是否患病,還要通過免疫熒光實驗檢測牛的病毒抗原高熱、腹瀉是臨床診斷牛是否被病毒感染的主要依據。對于一些病情較輕的牛,它們不會表現出明顯的癥狀,所以需要使用具有針對性的檢測方法來確定病變類型。在實際的情況中,大多數牛都只是輕微的感染,黏膜糜爛通常只出現在持續感染的牛身上,一些急性感染的牛也不會有這種現象,或者是表現得不明顯。所以,在對牛進行診斷的過程中,一旦發現疑似病毒的存在,就要對牛的口腔進行詳細地檢查,觀察是否出現了口腔粘膜糜爛的問題,并運用血清學檢驗進行診斷。血清檢驗雖然無法很好地檢測一些持續性感染的牛,但是卻為分辨急性感染與持續惡性感染方面提供了重要的支持。不過在運用血清學診斷的過程中,要注意將病毒感染與正常的腸炎疾病進行正確地區分,以免誤診。
患有急性感染BVDV的牛,它的分泌物以及排泄物中會有大量的病毒,這時就可以采用病毒分離鑒定的診斷方法判斷牛的感染情況。慢性感染時,最好是在患病牛發熱期間進行樣品的采集與病毒的分離,可以采集牛的血液、尿液、黏液等。在剖檢的過程中,病毒分離的病料可以使用牛的脾臟、骨髓等。也可以通過人工的方法使易感染動物受到感染,然后再收集病毒。值得注意的是,由于BVDV有兩種生物型,所以如果不能通過肉眼觀察細胞的病變,就需要使用其他方法進行二次診斷。
在檢測BVDV的過程中,主要會用到RT-PCR、核酸雜交實驗等分子生物學檢測技術。核酸雜交技術的原理是堿基互補的兩條單鏈經退火形成雙鏈,它可以直接地檢測到牛細胞中是否含有BVDV,從而展開定量的分析與判斷。核算雜交技術的敏感性與準確性要比一般的免疫學方法高,具有安全快速且經濟的優勢。RT-PCR是將反轉錄反應與cDNA與PCR反應合并的一個反應技術,它也具有速度快、敏感性高、準確性高的特點。
牛在感染BVDV后,會產生特異的抗體,根據該特異性可以對其進行免疫學檢測。常見的免疫檢測方法有:酶聯免疫吸附試驗、免疫熒光實驗。在檢測大量的血清樣品中,通常會使用酶聯免疫吸附試驗方法。酶聯免疫吸附試驗操作比較簡單,但準確率卻很高,可以用來檢測持續性感染的牛以及對牛群的抗體水平進行有效的監控。
病原學診斷主要是在無菌的狀態下,收集牛的骨髓與血液,并將其進行處理,與牛源細胞接種。完成接種后再進行培養操作,如果細胞未發生病變,為了提高診斷的準確性,可以使用免疫熒光抗體技術進行二次確定,最后再通過中和試驗診斷牛的病情。由于牛病毒性腹瀉的癥狀與牛沙門氏菌病的癥狀有很多相似之處,所以在診斷的過程中要注意進行區分鑒別。
只有做好相關的防護措施,才能夠有效地避免BVDV感染、擴散的發生。牛養殖戶在引進牛群之前,要對養殖基地進行詳細地考察,并選擇資質較好的養殖基地。與此同時,牛養殖戶也要確保牛種來源的正規性,向動物衛生監督機構申報檢疫,將牛群隔離觀察,并在觀察期間進行定期的檢測,對于孕牛生產的小牛也要繼續保持隔離狀態。在牛養殖的過程中,最好是采取封閉式的管理,以免有外來的傳染源進入養殖基地。牛養殖地要保持通風、干凈的狀態,通過定期的消毒與清潔與喂養新鮮的飼料,為牛的健康生長打下基礎。與此同時,牛養殖戶也要定期的為牛接種疫苗,疫苗可以選擇BVDV-1與BVDV-2型黃建滅活疫苗,使牛可以具備良好的機體抵抗能力。在發現患病牛后,要將其進行及時地隔離或者是淘汰,防止病毒的大規模擴散。牛場最好是自繁自養,避免在與外部接種后,受到感染。如果選擇在外接種這種繁殖方法,那么最好選擇非疫區、防護措施到位的牛種。各地區動物防疫部門也要提高對BVDV感染的重視度,通過舉行培訓活動、開展普及工作等方法,提高牛養殖戶的預防意識與預防能力。對于一些非法疫苗接種中心也要加強檢查與打擊的力度,為牛群的健康成長創造有利的支持條件,助力畜牧業的良好發展。
在具體的牛病毒性腹瀉預防工作中,要本著“預防為主,防治聯合”的基本原則,加強牛病毒性腹瀉的預防工作重視度,同時做好牛養殖環境的管理與檢驗檢疫工作。在針對牛舍開展管理工作時,首先要構建一套完善的牛舍檢驗檢疫工作體系,嚴格遵照國家標準,配合牛舍的檢驗檢疫工作,有效降低發病概率。對牛病毒性腹瀉的抗體和血清情況進行摸排,如果發現牛舍中存在陽性病毒,要及時進行處理,避免病毒廣泛傳播,及時了解牛病毒性腹瀉流行表現,還要制定好生牛疫苗接種工作,實現良好的預防效果。現階段在我國牛病毒性腹瀉的防治中常用黏膜疫苗和滅火疫苗兩種,可以對妊娠期的母牛以及幼牛起到良好的預防牛病毒性腹瀉效果。通常情況下成牛每年至少接受一次疫苗接種,而新生幼牛一般在2個月左右開展疫苗注射,成牛后再次進行注射,在接種一次后14d會產生病毒抗體,一般能夠持續22個月的免疫病毒功能。另外,也要嚴格做好牛養殖活動的疫苗檢查和管理工作,有效預防牛病毒性腹瀉的傳播。
另外,還要構建完善的生物安全體系,為牛類養殖活動提供良好的生長環境,遠離生活區域和工業區域,避免出現病毒交叉感染。在牛類養殖活動中,還要科學地選擇牛類品質,保證幼牛具有良好的抗病毒能力,養殖場應盡量做到自主繁殖和飼養活動,并對養殖環境進行全面消毒。在必要引入牛類品種時,首先要做好檢疫工作,并進行無病毒隔離后,再進行混養。另外在牛舍的出入口設置消毒設備,建立完善的健康管理體系,加強滅菌管理,避免外來生物入侵牛舍。
在牛養殖的過程中要積極地進行BVDV感染診斷工作,如果發現牛身體上的異常表現,首先就是要將其與健康牛分離開來。對于一些病情較輕的牛,要結合強心、補液、止瀉的原則,采用有效的方法對疾病進行控制。例如,將干擾素誘導劑雞新城疫I系疫苗0.5g溶于250ml生理鹽水中,對牛的肌肉進行注射給藥;或者是將鹽氯化鈉、氯化鉀、小蘇打和葡萄糖與溫水相融合,對牛進行口服給藥。患有急性感染的牛癥狀也比較輕,所以不需要特別的治療,不過要為他們提供新鮮的食物,并進行固定的隔離,最好不要運輸,防止患病牛受到外界的刺激。對于患有急性感染的小牛,要先為他們補充電解質和水,不能使用皮質類固醇,否則會加重消化道的糜爛與潰瘍。如果患病牛仍可以進食,那么牛養殖戶可以為他們輸入適量的阿司匹林,達到降熱治療的目的。西藥可以在一定程度上調節病牛體內的酸堿平衡,避免出現繼發性感染的現象。牛養殖戶也可以選擇一些中藥治療牛的病毒性腹瀉疾病,例如柴胡、黃芪、生姜、茯苓、連翹等,將其用水煎汁,灌服給患病牛。除此以外,還可以運用中西藥結合的方法,通過選擇無毒通滅的藥物,與特效頭孢藥物和碳酸氫鈉聯合治療,提高治療效果。目前對于牛病毒性腹瀉疾病的治療還未有特效藥物,所以還是要結合著牛的病情采取相應的治療措施,如當牛脫水時,可以通過輸液的方式擴充血容量,然后選擇藥物治療。
在開展牛病毒性腹瀉治療過程中,一般根據劑量為5g磺胺脒、5g蘇打粉以及3g乳酶生進行混合口服,一日三次,連續服用5天即可達到治療效果。另外,在牛的飲用水中添加98%的鹽酸嗎啉胍粉,劑量為每100升水加入100g鹽酸嗎啉胍粉,并連續飲用7天。對于嚴重的病毒性腹瀉治療時,要對病牛進行及時補救,避免出現牛死亡,可以采用靜脈注射9%氯化鈉溶液,同時注射5%葡萄糖2000毫升,如果病牛體溫持續升高,可以注射30%的安乃近30~60毫升來緩解體溫過高。通過對病毒性腹瀉的科學治理,取得良好的質量效果,并在治療期間,給病牛補充充足的養分,使其可以快速康復。
總而言之,牛病毒腹性瀉疾病對于牛養殖業的發展產生了不利的影響,每年都有很多牛因感染BVDV而死亡,損害了牛養殖戶的根本利益。因此,一定要提高對預防牛病毒性腹瀉疾病防控的意識與能力,這樣才能采取有效的措施降低牛感染BVDV的概率。由于牛病毒性腹瀉疾病有潛伏期且無明顯的臨床癥狀的特點,牛養殖戶要對此進行深入地學習,提高選擇牛品種、管理養殖場地、治療疾病等能力,從而提升預防效果與控制效果。在牛養殖的過程中,要及時、定期地進行診斷與接種疫苗的活動,一旦發現有牛感染BVDV病毒,要盡快地將其隔離。各地的動物防疫部門要與牛養殖戶攜手并進,為牛的健康生長提供良好的保障,以此促進經濟效益的提高,為推動當地牛養殖業的發展貢獻出相應的力量。