家兔人工授精操作技術(shù)

王華東，施海濤，楊志彬，秦曉華，謝玉林

（商丘市睢陽區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，河南 商丘 476100）

兔肉行情逐年攀升，兔肉具有高蛋白、低脂肪及低膽固醇的特點(diǎn)，非常符合當(dāng)今綠色、健康的消費(fèi)趨勢(shì)；只有提高肉兔受精率，才能更好地提高兔的繁殖能力，下面根據(jù)筆者近年來的一線經(jīng)驗(yàn)，簡(jiǎn)要介紹一下家兔人工授精技術(shù)，以供廣大養(yǎng)殖場(chǎng)戶及同行參考。

1 采精方法

采精是對(duì)家兔人工授精的首要一環(huán)。下面就手握假陰道采精和授精方法介紹如下:

1.1 假陰道的制作

用直徑5 cm 左右，長(zhǎng)度8 cm 左右的硬塑料管一支，將其兩端銼光，內(nèi)裝與塑管內(nèi)徑相仿的軟海綿一塊，將海綿沿直軸方向打一小孔，孔徑為0.5 cm，孔口呈傘形。集精裝可用大號(hào)避孕套代替。

1.2 采精前的器械準(zhǔn)備

將洗凈、消毒過的避孕套松開，裝入假陰道內(nèi)胎中，使開口的一端翻轉(zhuǎn)，固定在外殼邊緣，有囊的一端露出內(nèi)胎的另一端約1 cm，注入50～60 ℃的溫水中，使海綿吸收，用溫度計(jì)蘸取生理鹽水插入假陰道內(nèi)4 cm 處測(cè)溫。當(dāng)降至43℃左右時(shí)即可采精。測(cè)溫時(shí)要注意外界條件，如氣溫低、降溫快，內(nèi)胎溫度高些；反之可低些。對(duì)公兔采精每天僅采1 次，如果2次，第2 次的精子則不成熟。

1.3 采精

地點(diǎn)可在公兔籠內(nèi)，左手拿一只母兔誘情，待公兔“爬背”時(shí)，右手呈43°持假陰道放在母兔后腿中間，待公兔射精后，立即將假陰道孔口朝上，以防精液流失。

1.4 假陰道溫度對(duì)采精效果有直接影響

公兔陰莖對(duì)溫度極為敏感，低于40 ℃不易引起射精；過高溫度采精會(huì)養(yǎng)成嗜高溫的壞習(xí)慣，對(duì)精液品質(zhì)也有影響。由于母兔的正常體溫為39～40.5 ℃，因此，假陰道溫度以40～42 ℃為宜。

2 精液的檢查與稀釋

2.1 精液的檢查

2.1.1 外觀檢查

正常公兔的精液呈淡乳白色，具有特殊的腥味，也有少數(shù)兔的精液不正常，混入尿液的色黃有臭味；生殖器有炎癥的稍顯紅色；清水樣的為無精子。兔的精量很少，一般為0.2～2 ml，平均為0.8 ml。在實(shí)際應(yīng)用中，一般以目測(cè)估計(jì)。

2.1.2 顯微鏡檢查

主要是精子密度的檢查和活力的評(píng)定。精子密度是指單位容積內(nèi)所含有的精子數(shù)目。精子數(shù)的計(jì)算，直接關(guān)系授精劑量中含有的精子數(shù)。在實(shí)踐中常用目測(cè)法。目測(cè)法是根據(jù)精子在視野中分布的概況，即精子與精子之間的距離評(píng)定為“密”、“中”、“稀”三種等級(jí)。這種方法雖是主觀評(píng)定，但簡(jiǎn)便易行，實(shí)際工作中多采用此法。家兔的精子密度隨季節(jié)變化也十分明顯。有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)員估計(jì)的結(jié)果往往很接近實(shí)際數(shù)。兔的精子活力應(yīng)在0.5級(jí)以上方可用于授精。如在0.5級(jí)以下則受精率很低。不同季節(jié)的精子活力差異也十分明顯，9至10月平均活力僅0.15級(jí)；12月至次年2月平均活力0.51級(jí)；3至5月平均活力0.61級(jí)。

2.2 精液的稀釋

精液稀釋的目的首先是為了擴(kuò)大精液量，增加輸精母兔只數(shù)，同時(shí)也是為了延長(zhǎng)精子存活時(shí)間。在配制稀釋保存液時(shí)應(yīng)當(dāng)考慮下列因素。

2.2.1 營(yíng)養(yǎng)成分

精子在代謝過程中主要是單方面的分解作用。成熟的精子不能通過同化作用將外界物質(zhì)變成本身的成分。因此為了補(bǔ)充精子的能量消耗，需用最簡(jiǎn)單的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，目前常用的是:果糖、山梨醇、甘油磷酸膽堿（GPC）和磷脂。

2.2.2 保護(hù)成分

緩沖物質(zhì)——為了保持精液適當(dāng)?shù)膒H，常用檸檬酸鈉、酒石酸鉀鈉、磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉等。防冷保護(hù)劑——常用的有卵磷脂、卵黃、蛋白胨、乳類。制菌物質(zhì)——常用青霉素（每毫升稀釋液加入500～1 000 國(guó)際單位）、鏈霉素（每毫升稀釋液加人500～1 000 μg）。家兔精子的理想稀釋液廣泛應(yīng)用的是0.9%的氯化鈉或5%的葡萄糖溶液，稀釋倍數(shù)一般為9 倍。稀釋時(shí)稀釋液的溫度應(yīng)與精液等溫。稀釋液注入集精瓶（袋）的速度不能過快。注入后再用玻璃棒輕輕攪動(dòng)，使其均勻混合。稀釋后的精液應(yīng)作一次顯微鏡檢查，發(fā)現(xiàn)活力不強(qiáng)或死亡過多的精子則不能用作輸精。

3 輸精方法

輸精就是將精液注入母兔的生殖道內(nèi)，是人工授精的最后一環(huán)。

3.1 輸精器

可用玻璃輸精器，前端長(zhǎng)l0 cm 左右的空心小玻管與2 ml 注射器相連，也可用實(shí)驗(yàn)用滴管代替，每輸精1 次應(yīng)更換1 支無菌輸精器。

3.2 輸精母兔的選擇

應(yīng)選擇健康無病，處于發(fā)情期的母兔進(jìn)行授精，這對(duì)提高受胎率有很大益處。

3.3 刺激母兔排卵

母兔發(fā)情后，如無交配或其他蘊(yùn)含物刺激則不會(huì)排卵。人工授精缺乏交配的刺激性。然而對(duì)母兔注射促排卵素3 號(hào)卻有較好的促排卵效果，每只兔注射0.5 μg，母兔輸精前后注射同樣有效。

3.4 輸精

由助手抓住母兔的背部，使母兔臀部略朝上，輸精員持輸精器(如一人操作可一手抓兔，一手持輸精器）。取經(jīng)過稀釋的精液O.5 ml（約含精子1 000 萬個(gè)以上）慢慢插入母兔陰道內(nèi)約6～7 cm 處即可輸精。輸精器及精液必須加溫至與兔體溫接近，輸精前可放在35℃的溫水中保溫。插入時(shí)應(yīng)輕輕向前上方旋動(dòng)，要邊旋邊進(jìn)，切不可硬插，以免損傷生殖道。插入后可來回輕輕抽動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)幾次，有助于刺激子宮頸。抽出輸精器時(shí)也應(yīng)慢慢地邊轉(zhuǎn)動(dòng)邊抽出，以防精液隨輸精器溢出。抽出輸精器后，即由助手拍打一下兔的臀部，使母兔受驚，以便精子吸入。每次輸稀釋過的精液0.8 ml，1 只種公兔的精子稀釋后可輸入10 只母兔。整個(gè)人工授精過程要求動(dòng)作準(zhǔn)確，無菌操作。