血清OX40和OX40配體在老年急性腦梗死病人中的表達及臨床意義

時巖 臧艷靜 王素玉 劉樹理

急性腦梗死占所有腦卒中的87%，是腦血供突然中斷后導致的腦組織壞死，常伴有免疫炎癥和氧化應激損傷、血管通透性增高和腦水腫等繼發性病變［1］。急性腦梗死后1年內的死亡及殘疾率達45%，特別對于老年病人，預后更差［2］。深入分析急性腦梗死的發病機制，并尋找潛在的生物學標志物，對改善病人預后有重要意義。越來越多的研究顯示，炎癥標志物可能是急性腦梗死的生物學標志物［3?4］。OX40是腫瘤壞死因子超家族成員之一，在B細胞、巨噬細胞和樹突狀細胞等免疫細胞中表達［5］。OX40及OX40配體（OX40 ligand，OX40L）是免疫應答中重要的協同刺激分子，在免疫性疾病、哮喘［6?7］、腦出血［6］和癌癥［8］等疾病中表達增高。OX40和OX40L在急性腦梗死中的作用既往少有報道。本研究旨在分析OX40、OX40L與老年腦梗死病人神經功能缺損及預后的關系，為臨床診治提供依據。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取2018～2019年本院收治的146例老年急性腦梗死病人為研究對象（觀察組），其中男91例，女55例；年齡60～86歲，平均（72.87±8.24）歲；BMI為25.11±2.09；TOAST分型大動脈粥樣硬化54例、心源性栓塞48例、小動脈閉塞44例；有吸煙史43例，飲酒史34例，房顫史41例，高血壓史67例，糖尿病史52例，冠心病史58例。納入標準：（1）符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》診斷標準［9］；（2）年齡≥60歲；（3）病例資料完整。排除標準：（1）入組前1個月內服用瑞舒伐他汀；（2）合并急慢性感染性疾病；（3）出血性腦卒中；（4）腫瘤性疾病；（5）免疫性疾病。另選取同期在本院體檢的50例健康老年人為對照組，其中男38例，女12例；年齡60～80歲，平均（70.12±12.73）歲；BMI為24.17±3.78；高血壓史14例，吸煙史9例，糖尿病史11例，飲酒史7例。2組年齡、性別、BMI、高血壓史、糖尿病史、吸煙史和飲酒史比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。本研究經本院倫理委員會批準，所有受試者均簽署知情同意書。

1.2 神經功能缺損評價方法 入院時采用NIHSS對老年急性腦梗死病人進行評價，該量表總分為42分，評分4～7分為輕度缺損，8～14分為中度缺損，≥15分為重度缺損［10］。

1.3 預后評價 出院3個月時，采用改良Rankin量表（mRS）對老年腦梗死病人的預后進行評價，mRS評分0～2分為預后良好，3～6分為預后不良［11］。

1.4 血清OX40和OX40L檢測 入院時采集所有研究對象肘靜脈血3 mL，2500 r／min離心15 min后收集血清。采用ELISA法檢測血清OX40和OX40L表達水平，試劑盒均購于上海科順生物科技有限公司，操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.5 統計學方法 應用SPSS 20.0軟件進行統計分析，計量資料采用均數±標準差（±s）表示，2組間比較采用t檢驗；多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD?t檢驗；計數資料采用頻數和百分比表示，組間比較采用χ2檢驗；血清OX40、OX40L與NIHSS評分的相關性用Pearson相關系數描述；繪制ROC曲線分析血清OX40和OX40L預測老年急性腦梗死病人預后的價值，計算AUC、靈敏度和特異度。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清OX40和OX40L比較 觀察組血清OX40、OX40L水平分別為（76.12±12.13）pg／mL和（84.02±13.01）pg／mL，均高于對照組。神經功能輕度缺損組、中度缺損組、重度缺損組血清OX40和OX40L水平均高于對照組（P＜0.05），且病情越重，OX40和OX40L水平越高（P＜0.05），見表1。

表1 2組血清OX40和OX40L水平比較（±s，pg／mL）

表1 2組血清OX40和OX40L水平比較（±s，pg／mL）

注：與對照組比較，?P＜0.05；與輕度缺損組比較，＃P＜0.05；與中度缺損組比較，△P＜0.05

組別 OX40 OX40L對照組（n＝50） 34.78±9.03 42.09±6.85輕度缺損組（n＝32） 63.09±12.02? 73.09±8.45?中度缺損組（n＝72） 73.23±6.34?＃ 80.34±6.03?＃重度缺損組（n＝42） 87.09±8.64?＃△102.89±20.12?＃△

2.2 血清OX40、OX40L與神經功能缺損的關系 相關分析顯示，NIHSS評分與OX40、OX40L均呈正相關（r分別為0.578和0.701，P＜0.01）。

2.3 血清OX40、OX40L與預后的關系 預后不良組有49例病人，其血清OX40、OX40L蛋白表達水平均高于預后良好組（P＜0.01），見表2。單因素及多因素Logistic分析結果均提示，OX40和OX40L是老年急性腦梗死病人預后的獨立影響因素，見表3。ROC曲線分析結果顯示，OX40、OX40L預測病人預后的AUC分別為0.793和0.854，二者聯合檢測可將AUC提高至0.914，見表4。

表2 不同預后組血清OX40和OX40L水平比較（±s，pg／mL）

表2 不同預后組血清OX40和OX40L水平比較（±s，pg／mL）

注：與預后良好組比較，??P＜0.01

組別 OX40 OX40L預后良好組（n＝97） 68.34±10.10 76.20±17.37預后不良組（n＝49） 84.03±13.87?? 92.76±22.14??

表3 預后影響因素的單因素和多因素分析

表4 血清OX40、OX40L預測臨床預后的效能分析

3 討論

腦梗死發生后，組織和外周血炎癥因子發生變化，炎癥因子可能有助于急性腦梗死預后的判斷［12］。OX40及其配體在免疫炎癥損傷中起重要作用，本研究旨在分析OX40、OX40L與神經功能缺損的關系及其預測急性腦梗死病人預后的價值。

T細胞是免疫應答過程中的重要細胞，具有免疫監視作用［13］。OX40和OX40L是一對重要的共刺激分子，能夠為T細胞活化提供刺激信號。OX40主要表達于活化的T細胞表面，而OX40L主要表達于抗原提呈細胞上，OX40／OX40L信號通路在T細胞增殖、活化和凋亡中起到重要作用，有助于放大自身免疫反應，進而影響疾病的發生和發展［14］。動脈粥樣硬化是腦梗死發生的主要原因，有研究發現，OX40L與動脈粥樣硬化相關［15］。本研究結果顯示，急性腦梗死病人血清中OX40和OX40L表達水平明顯高于健康人，提示OX40和OX40L可能參與了急性腦梗死的發生。另外，重度缺損組血清OX40、OX40L水平均高于輕度缺損組和中度缺損組，且相關分析提示NIHSS評分與OX40、OX40L水平呈正相關，說明OX40和OX40L與急性腦梗死病人的神經功能缺損嚴重程度有關。

OX40和OX40L可能是疾病預后的評價指標，有研究發現，OX40和OX40L高表達與進展期肺腺癌及非小細胞肺癌病人的不良生存預后有關［6，16］。本研究結果顯示，預后不良組血清OX40、OX40L水平均高于預后良好組，OX40、OX40L預測病人預后的AUC分別為0.793和0.854，說明OX40和OX40L對急性腦梗死病人的臨床預后有一定早期預測價值。

綜上所述，老年急性腦梗死病人血清OX40、OX40L水平明顯高于健康人，OX40和OX40L與神經功能缺損嚴重程度有關，并且有助于早期預測病人的臨床預后。本研究也存在一些局限性，例如未檢測病人血清OX40、OX40L水平的動態變化，其表達特征在未來需要進一步分析。OX40／OX40L在急性腦梗死中的具體作用機制也需要深入探討。