小反芻獸疫、山羊痘二聯活疫苗對羊只的免疫效果評價

張海霞，張 蓉

（甘肅省瓜州縣畜牧獸醫技術服務中心，甘肅 瓜州 736100）

小反芻獸疫病毒屬副黏病毒科麻疹病毒屬，主要感染山羊、綿羊等小反芻動物，俗稱“羊瘟”，非人畜共患傳染病，病畜的排泄物與分泌物是主要傳染源。該病潛伏期一般為4～5 d，最長可達21 d。山羊感染該病后臨床癥狀猶為嚴重，綿羊偶有嚴重病例發生。被感染的動物體溫急劇上升，口腔黏膜內充血，煩躁不安、食欲減退，背毛粗糙無光澤，鼻液呈膿性，呼出惡臭氣體，從而使養殖企業及養殖戶遭受巨大的經濟損失[1]。

羊痘病毒是一種脫氧核糖核酸病毒，對乙醚敏感，具有極強的感染力與傳播力，俗稱“羊天花”，是一種人畜共患的急性、熱性、高接觸性傳染病[2]。羊群一旦感染該病，放牧人員應高度重視，立即采取防控措施。該病潛伏期為4～20 d，初期病羊體溫升高至40～42℃，呼吸加快，精神極度沉郁，食欲減退，伴以可視黏膜卡他、膿性炎癥，經1～2 d后皮膚少毛或無毛處開始發痘，如綠豆或豌豆大的淡紅色圓形充血斑點，而后凸出于皮膚表面形成堅實的結節，再經5～7 d變為灰白色扁平、中央凹陷的水泡。此時病羊體溫下降，水泡很快化膿，而后漸漸干涸，形成黃黑褐色痂皮，約7 d痂皮脫落，留有蒼白瘢痕。該病病期長達3～4周，多以痊愈告終。在發病過程中，最忌并發其他疾病，如在膿泡期有壞死桿菌繼發感染，病變部就會泡痘融合，形成壞疽性潰瘍，發出惡臭氣味，此為惡性病變，容易造成病羊死亡。羔羊、體弱羊易并發眼結膜炎、鼻炎、咽炎，并可繼發肺炎、胃腸炎和膿血癥等。綿羊中細毛羊比粗毛羊或土種羊更易感染。羊痘對成年羊危害較輕，死亡率為1%～2%，對羊羔危害嚴重，死亡率達20%～50%，從而使養殖企業及養殖戶遭受巨大的經濟損失。

對以上2種疫病進行免疫接種是預防和控制疫病發生的最主要手段，但仍存在很多免疫難題，如疫苗種類過多、接種強度大、抗體持續時間短、免疫程序繁瑣、經費及人力緊張等。與單獨疫苗相比，聯合疫苗防疫效果更好。因為聯合疫苗可以同時預防多種疾病，可減少動物的接種次數，有效避免漏種情況的發生，提高疫苗接種率，同時可減少接種后的不良反應。因此，為了探討小反芻獸疫、山羊痘二聯活疫苗的免疫效果，同時加強對小反芻獸疫和羊痘的防控，及時掌握這兩種病的流行病學動態，在瓜州縣鎖陽城鎮某養殖場開展了小反芻獸疫、山羊痘二聯活疫苗對羊只的免疫效果試驗，以期為養殖企業及養殖戶選擇最佳疫苗和制定科學的免疫程序提供依據。

1 試驗材料

1.1 試驗動物

在瓜州縣鎖陽城鎮某養殖場選擇未接種小反芻獸疫和羊痘疫苗的4月齡健康羊60只。按照正常的飼喂方法，由專人負責飼養管理。

1.2 試驗疫苗

小反芻獸疫、山羊痘二聯活疫苗（Clone9株+AV41株），由華派生物工程集團有限公司生產（批號獸藥生字221014035），甘肅省酒泉市動物疫病預防控制中心提供。

1.3 其他

450 nm、630 nm波長的酶標儀，37℃恒溫設備，可調微量移液器，加樣槽，酶標儀，離心機等。

1.4 主要試劑

酶標板、20X濃縮洗滌液、陰陽性對照血清、抗體工作液、酶標記物、TMB底物液、終止液（試劑全部由深圳芬德生物技術有限公司生產，批號020016）。

GPV抗原包被板、GPV陰性血清、GPV陽性血清、酶標抗原（Ⅶ）、20X濃縮洗滌液、底物液、終止液（試劑全部由青島立見診斷技術發展公司生產批號20312102）。

2 試驗方法

2.1 試驗分組及免疫

選擇4月齡無小反芻獸疫、羊痘抗體的健康羊只60只，按疫苗說明書規定，皮內注射小反芻獸疫、山羊痘二聯活疫苗[3]（Clone9株+AV41株）0.5 ml/只。

2.2 抗體監測

對免疫前及免疫后21 d、42 d、63 d、84 d、105 d羊只頸靜脈采血，共60份，分離血清，按照GB/T 27982-2011小反芻獸疫診斷技術和NY/T 576-2015綿羊痘和山羊痘診斷技術要求進行。

3 結果

3.1 不同劑型小反芻獸疫、山羊痘二聯活疫苗（Clone9株+AV41株）的免疫效果對比

從表1可以看出，在2組監測的60份樣品中，免疫前的抗體均呈陰性，免疫后小反芻獸疫抗體存在，羊痘抗體不存在。

表1 不同劑型疫苗的免疫效果對比 單位：只

3.2 不同劑型小反芻獸疫、山羊痘二聯活疫苗免疫后產生抗體保護情況

小反芻獸疫、山羊痘二聯活疫苗（Clone9珠+AV41珠）皮內注射后再隔21 d分別進行5次采血檢測，每次檢測出羊只體內有小反芻獸疫抗體形成，但羊痘抗體沒有形成。

4 小結與討論

小反芻獸疫、山羊痘二聯活疫苗（Clone9株+AV41株）免疫效果不理想，兩者不能混在一起接種，重組使用會降低兩者抗體效價。

免疫反應是一個復雜的生物學過程，免疫效果會受到多種因素的影響，如環境因素、免疫抑制性疾病、營養因素、免疫方法及應激因素等。同時，疫苗使用不當、未按要求使用指定的稀釋劑、注射器定量控制失敗、針頭過短過粗、免疫程序不當、接種時間和次數安排不當等，也會影響免疫效果。需要注意的是，幼齡動物免疫器官尚未成熟，免疫應答能力不完全，免疫過早時，免疫效果也不好。遺傳因素和品種不同，個體對疫苗的反應能力也不同。當環境中存在大量病原微生物時，任何一種疫苗注射都不能達到最佳免疫效果，環境衛生不良會降低動物的抵抗力。此外，飼養密度過大、室內濕度高、室內通風不良、噪音嚴重、突然換料等因素會對畜禽造成不同程度的應激，從而在降低抵抗力的同時影響免疫效果。因此，在免疫過程中應避免應激因素。