microRNAs在馬中的研究進展及應用

白東義 趙若陽 韓海格 陶克濤 圖格琴 芒 來

(內蒙古農業大學 動物科學學院/內蒙古自治區馬屬動物遺傳育種與繁殖重點實驗室/內蒙古農業大學馬屬動物研究中心，呼和浩特 010018)

microRNAs(miRNAs)是存在于動植物中的單鏈小RNA分子，長度約22個核苷酸，通過與mRNA互補靶序列結合來調控特定基因的表達，改變了mRNA的穩定性，導致翻譯過程受到抑制或mRNA降解，從而對翻譯產生負調節，控制基因轉錄后表達。據估計，約占30%～80%編碼蛋白的基因受miRNAs調控。單個miRNA可與一系列基因相互作用，單個基因的表達亦可受多個miRNAs控制。因此，miRNAs在個體發育、成熟和病理過程中參與調控多種生物學功能。隨著馬術、賽馬等競技項目的興起與普及，馬匹的健康狀況備受關注，尤其是優秀賽馬的疾病診斷治療方案趨向使用無創和低損傷技術，miRNAs疾病診斷治療無需進行大創面手術，便捷且見效迅速，為這一趨勢提供了無限可能性。因此，本研究以miRNAs如何調控基因表達為切入點，結合miRNAs表達在馬不同生理病理過程中的變化，旨在討論miRNAs在馬疾病診斷和治療中的應用及潛力。

1 microRNAs概述

在組織中表達的全部miRNA被稱為miRNome。目前被主要的miRNA數據庫miRBase注釋(miRBase.www.miRBase.org)的馬(

Equus

caballus

)成熟miRNA與人(

Homo

sapiens

)相比，數量并不多。miRNA可調控細胞的多個過程，包括DNA修復、代謝、應激反應、細胞增殖、凋亡、干細胞維持和組織分化，并在涉及的相關信號通路中發揮重要作用，其異常表達與多種疾病相關。

在哺乳動物基因組的表達產物中，miRNA占比很大。表達miRNA的基因序列大多位于蛋白編碼或非編碼mRNA基因的內含子或3’UTRs區內，且絕大部分存在于基因間區。典型miRNA生物合成途徑中(圖1)，上述基因序列經RNA聚合酶II轉錄，生成帶有3’帽子和5’polyA尾巴的長miRNA前體，稱為pri-miRNA。在雙鏈RNA結合蛋白Pasha存在的情況下，RNase III 內切酶Drosha將初級轉錄本裂解，產生了具有60～80個核苷酸的前體pre-miRNA，這些前體經折疊形成莖環結構(又稱“發夾”結構)。隨后pre-miRNA被exportin5蛋白轉運到細胞質中，通過RNase III 內切酶Dicer酶進一步裂解，形成一個短暫存在的21～25個核苷酸雙鏈miRNA-miRNA復合物，稱雙鏈成熟miRNA，內含的2條單鏈分別為引導鏈和過客鏈。之后，這種雙鏈結構會結合到RNA誘導沉默復合物miRISC上(該復合物由Argonaute蛋白家族成員組成)。兩條鏈中的一條miRNA鏈通常優先保留為成熟miRNA(Mature miRNA)，而第二條miRNA鏈會被降解。作為復合物的一部分，成熟的miRNA能夠與靶mRNA的互補位點結合，通過其種子序列(一般為2～8個核苷酸)識別3’UTR的目標位點誘導mRNA降解，進而抑制翻譯過程。

圖1 miRNA的生物合成途徑(改自文獻[18])

miRNAs的生物學功能并不局限于合成它們的細胞中，因為有研究表明它們可介導細胞間信號轉導。高濃度的miRNA存在于哺乳動物體液如血液、唾液和尿液中，初級miRNA轉錄本含有發夾結構，可被RNase III 內切酶Drosha和雙鏈RNA結合蛋白DGCR8的微加工復合物識別；或被包裹在囊泡中被釋放出來。在細胞外囊泡中發現的miRNA是細胞選擇性釋放的部分miRNA序列。細胞外囊泡包裹的這些miRNA可被鄰近或遠一些的細胞吸收，這些細胞具有特定的細胞表面受體，隨后這些miRNA可調節受體細胞內的基因表達。細胞凋亡后，細胞外會出現miRNA核糖核蛋白復合物。

存在于多細胞有機體中的miRNAs，通過相同的生物合成途徑產生和機制調節基因表達。miRNAs核苷酸序列變化與pre-miRNA序列變異程度低，物種間的前體和成熟miRNA序列，特別是種子序列區域保守程度則非常高。受miRNAs調控的基因表達調控網絡在進化過程中是相對保守的，同時在生物進化過程中，miRNAs通路的復雜性與表型復雜性之間存在正相關關系。且其前體和成熟序列在進化中的保守性是通過實驗鑒定未知miRNA同源物基因組的基礎。

2 馬miRNA

2.1 miRNA與馬疾病的相關性

miRNAs通過靶基因互作，在基因的表達調控中發揮重要作用。近乎所有類型的細胞均可以產生和釋放miRNAs，在腫瘤微環境下的基因調控中發揮重要作用。肉瘤是一種良性的、局部侵襲性的纖維母細胞腫瘤，是臨床常見病。到目前為止缺乏有效的治療方法，不適當的治療方法可能會導致疾病惡化。盡管研究表明牛乳頭瘤病毒(Bovine papillomavirus，BPV)是肉瘤發病機制中的關鍵因素，但其確切的作用機理尚待闡明。在馬BPV導致的成纖維細胞瘤模型中，有206個miRNAs的表達量與正常馬成纖維細胞相比存在差異。與健康皮膚組織相比，馬類肉瘤組織中有40個miRNAs上調，34個miRNAs下調，其中許多miRNA參與了已知癌癥通路。miRNA表達量的改變在診斷人類腫瘤中得到很好的應用。因此，人們對miRNA在早期癌癥診斷、亞型分類、預測和治療中的潛在應用非常感興趣，這對賽馬及馬術運動中運動馬疾病診斷與治療提供了啟示。如今對miRNA在馬疾病中作用的認知仍處于初級階段。

馬肉狀瘤(Equine sarcoid，ES)和鱗狀細胞癌(Squamous cell carcinoma，SCC)是馬最常見的2種皮膚腫瘤，馬24號染色體上的1個microRNA簇中的miRNAs差異表達與馬肉瘤和鱗狀細胞癌相關。研究表明，溫和型(ES mild，ESM)、激進型(ES aggressive，ESA)、眼部鱗狀細胞癌(ocular SCC，oSCC)和生殖器鱗狀細胞癌(genital SCC，gSCC)4個亞群中的miRNA存在差異表達，在比較腫瘤組織和對照組織時，發現ESM中有57個miRNAs，ESA中有6個miRNAs，oSCC中有47個miRNAs，gSCC中的miRNAs存在差異表達，因此可以作為診斷依據的潛在生物標志物。ES病變通常與miR-200家族的下調表達相關，而miR-200家族可能觸發上皮間充質轉化，使上皮細胞在某些生理或病理條件下失去上皮細胞特征并獲得間充質細胞特征。ESM病變與馬24號染色體上腫瘤抑制miRNA簇的上調表達相關。相反，在oSCC腫瘤中，該簇下調表達，進而miR-34家族表達下調，這可能有利于oSCC腫瘤細胞的代謝。為進一步證明篩選出的miRNA的生物學效應，還需進一步驗證，目前還沒有可以提前檢測出馬患有肉樣瘤的方法。在對健康馬和患病馬的對比研究中發現，有14個差異表達miRNAs，4個miRNAs(28.6%)上調，10個miRNAs(71.4%)下調，下調的miRNAs中，有7個miRNAs編碼在馬24號染色體上的一個miRNA簇中。它們的靶基因富集在病毒致癌相關信號通路上，表明馬24號染色體上miRNAs的異常表達可能導致ES。通過比較ES特異性血清和全血miRNA圖譜并對表達量進行關聯后分析發現，有19個差異表達miRNAs。血清中2/9和全血中7/19的差異表達miRNAs都呈現高表達，且這些miRNAs靶基因會富集到癌癥相關信號通路上。

氣道平滑肌(Airway wall remodeling, ASM)炎癥表現為平滑肌細胞的增生和肥大，導致平滑肌群增加，是哮喘的核心起因。miR-221-3p通過抑制靶mRNA翻譯來下調P53、P21和P27蛋白的表達，成為影響肺部炎癥和修復過程的關鍵調節因子。miRNAs通過調節ASM細胞增殖并參與了哮喘過程中ASM的重建。通過對比患哮喘馬匹在疾病加重和緩解期間以及健康馬對照組在支氣管平滑肌中miRNAs的表達規律，來研究它們在ASM細胞增殖中的作用。結果顯示，馬匹中miR-26a、miR-133 和miR-221 在ASM哮喘加重組與哮喘緩解組和對照組相比明顯上調。還有研究表明miR-221-3p 在不同組織中的表達量有差異。因此，利用miR-221進行靶向治療可能是緩解哮喘的一種新方法。

馬精外泌體(Seminal exosomes，SEs)中含少量miRNAs。研究表明，馬動脈炎病毒(Equine arteritis virus, EAV)在體內的長期持續存在與SEs中eca-mir-128的表達下調以及生殖道中

CXCL16

基因的表達上調相關，同時

CXCL16

是eca-mir-128的預期靶點。表明SEs中的 eca-mir-128持續參與調控

CXCL16

表達，進而導致公馬感染病毒。目前，病毒持續存在的分子機制正在被逐步闡明，為研發有效的治療方法阻止此類病毒感染提供啟示。

2.2 miRNA與馬運動的相關性

馬的耐力訓練包括生理、生化和認知-行為反應在內的一系列適應過程。馬進行耐力運動期間，血液mRNA轉錄組、miRNome和代謝組之間的關系可以進一步揭示耐力運動的分子機理，這些分子網絡可能在調節馬匹耐力運動的代謝和免疫反應中發揮關鍵作用。運動能力是馬的一個重要特性，是篩選優質馬的標準。雖然運動影響馬體內部的分子穩態和適應性，但這些影響機制尚不明確。

研究表明，馬運動后血液白細胞中miRNAs表達譜中有6個miRNAs發生變化，這些外周血白細胞中受運動影響的miRNAs有助于闡明馬運動相關生理的分子機制。miRNAs對轉錄和翻譯過程的調控還可調節馬匹對極端耐力運動的適應性。對160 km耐力賽前后的馬血液miRNA表達譜進行綜合分析，共鑒定了167個差異表達miRNAs。其中44個差異表達miRNAs可以靶向調節總計351個基因，這些基因涉及不同的葡萄糖代謝、脂肪酸氧化、線粒體生物發生和免疫應答等信號途徑。同時證實了miR-21-5p、miR-181b-5p和miR-505-5p是馬適應耐力運動的候選調控因子。表明miRNA-mRNA協同調控網絡可能在耐力運動中控制轉錄后調控中發揮關鍵作用。血漿中細胞外顆粒(Extracellular particles，EP)中的miRNAs循環存在，參與了賽馬的運動和健康調節。進行耐力賽的賽馬是用來研究長時間/低強度運動對血漿EP 中miRNAs影響的極好模型。通過對賽馬賽前賽后節點取樣研究，miRNA差異表達分析顯示，比賽中及比賽后，aca-mir-486-5p水平升高，比賽結束后，aca-mir-9083 表達水平降低。這為后續研究低強度耐力運動中運動產生的EP miRNAs的作用提供借鑒。同時這項研究增加了關于長距離運動后血漿EP濃度變化的新數據，并對在低強度耐力運動中EP中miRNAs的作用提出新的見解。

眾所周知，賽馬過程中機體內運動相關基因表達量會發生變化，從而激活葡萄糖代謝通路進行能量消耗。純血馬賽馬運動30 min后血液中eca-miR-17 和eca-miR-33a水平升高，說明其可能在葡萄糖代謝通路中發揮重要作用。這些miRNAs可下調乳酸脫氫酶和糖原合成酶的表達，在運動后的外周血中表達量有所下降。通過比較61匹純血或半血阿拉伯馬在160 km 耐力賽后血液中的miRNAs表達水平，對馬匹極端耐力運動的適應性反應進行研究發現。在167個差異表達的miRNAs中，有44個可能參與糖代謝、脂肪酸氧化、線粒體生物過程和免疫應答通路。分別進行進一步驗證后表明，eca-miR-21-5p、eca-miR-181b-5p和eca-miR-505-5p可能是馬耐力運動適應能力的候選miRNAs。隨后的一項研究表明，這5個miRNAs(包括miR-21-5p)可靶向263個基因和影響11種代謝產物，在馬匹適應耐力運動中發揮重要作用。

通過研究阿拉伯賽馬唾液中miRNAs的表達水平變化，可以更好地了解賽馬運動比賽期間miRNAs調控的分子機制。唾液中包含的miRNAs最多，但在馬的唾液中還沒有miRNAs的相關研究。首個從馬唾液中分離miRNAs的研究通過對差異表達miRNAs及其靶基因在脂質代謝通路的鑒定，進而了解阿拉伯賽馬在比賽中如何進行能量供應。阿拉伯賽馬有低糖原含量和高甘油三酯儲存能力，這是由于他們的肌肉組織具有豐富的氧化I型肌纖維。因此，阿拉伯賽馬可以利用更多的脂肪提供更高的能量。結果篩選到運動肌肉相關的aca-mir-33a及其靶基因

ABCA1

、

CROT

、

ABHD2

和

SATB2

，揭示了aca-mir-33a及其靶基因可能在阿拉伯賽馬在比賽中提供能量的脂質代謝中發揮重要作用。

2.3 miRNA與馬繁殖的相關性

人類染色體14 microRNA簇(Human chromosome 14 microRNA cluster，C14MC)是存在于真獸類哺乳動物中的保守miRNA簇，在胎盤發育中發揮重要作用，該簇在哺乳動物胎盤中的表達規律和功能尚不清楚，馬的C24MC與其同源性很高。妊娠識別信號(Maternal recognition of pregnancy，MRP)用于檢測懷孕，目前母馬的MRP還沒有被識別出來。胚胎-母體之間如何互相影響的高通量分子生物學有助于分析MRP過程中所涉及到的信號通路，但目前缺乏蛋白質組學、轉錄組學與miRNA表達直接關聯的集成研究。通過評估馬妊娠過程中C24MC在絨毛膜尿囊中的表達變化，發現C24MC相關的miRNAs在妊娠早期表達水平較高，在妊娠后期表達水平下降。此外，通過測序分析了C24MC相關miRNAs與其預測靶點轉錄本表達量，結果表明，兩者表達水平呈負相關，推測該miRNA簇與這些靶點轉錄本相互抑制。靶點富集研究還顯示，C24MC可能在馬的胎盤發育過程中調節血管生成。C24MC還與妊娠相關，參與胚胎、胎兒和胎盤的發育。通過研究馬妊娠期母體循環中的表達譜，分析了妊娠前、妊娠中不同階段和產后母馬的血清中miRNA表達譜，在妊娠母馬的血清中發現其中4個miRNAs(eca-miR-1247-3p、eca-miR-134-5p、eca-miR-382-5p和eca-miR-433-3p)富集，這些miRNAs主要參與神經系統發育和器官發育。這些數據為今后的針對性研究提供了基礎。

通過對母馬卵泡液中miRNA水平的定量分析，可以發現腔液與顆粒細胞組分具有相似性，證明腔液miRNA指標可代表卵泡。研究還發現，卵泡液miRNA表達譜隨母馬年齡的變化而變化。一些miRNAs表達量與卵巢卵泡發育的不同階段有關，miRNAs在參與卵泡的分選、促成熟和排卵，同時調節其存活和分化的過程中表達量均有變化。此外，已經有報道馬的排卵卵泡和無排卵卵泡之間miRNAs存在表達差異，母馬季節性停止排卵與卵泡中miRNAs表達量增加存在著某些生理聯系。這些結果的意義尚不清楚，但抽吸母馬卵泡液進行miRNA分析可以幫助分析其不孕的原因。

研究表明，miRNAs對睪丸發育和精子生成至關重要。對從種公馬附睪不同區域分離出來的精子中miRNAs表達量進行鑒定，得到23個miRNAs在不同區域表達水平存在差異，提示miRNA可能參與精子成熟過程。對蒙古馬未成熟和成熟睪丸進行RNA測序分析，鑒定出了531個成熟miRNAs，其中包括46個新的miRNAs，這些miRNAs之前都沒有明確的功能。在531個miRNAs中，421個在未成熟和成熟的miRNA文庫中均有表達，65個單獨在未成熟的睪丸文庫中，45個單獨在成熟的睪丸文庫中。這些差異表達的miRNAs在睪丸發育和精子發生中起重要作用。這些發現確定了miRNAs調控在蒙古馬睪丸發育和精子發生中起關鍵作用，有助于對哺乳動物生育機制的理解。

3 miRNA在馬中應用的未來趨勢

3.1 miRNA用于馬外科手術

外科手術中，無創miRNA治療方案備受青睞，可以最大程度上減小患者的治療創面，也利于術后恢復，但目前miRNA治療手段并不成熟，因而用于臨床的案例較少。賽馬是歷史最悠久的運動之一，賽馬運動決定了馬匹健康方面常出現的疾病集中在骨骼、肌肉和蹄部，無創miRNA治療方案實施起來較簡便，對馬匹傷害最小，并且起效快，具可操作性。

在對健康馬駒軟骨和軟骨下骨質中miRNAs的表達與患有軟骨和骨合并軟骨癥的馬駒比較可以看出，miRNA表達量在馬駒正常骨、軟骨和異常骨、試驗中載荷作用下的軟骨中均有差異。這表明在病理生理學中，miRNA對軟骨病有很重要的作用，同時影響著軟骨和骨對生物壓力的應激反應。eca-miR-140在正常馬關節軟骨中高表達，被鑒定為軟骨特異性miRNA；此外，馬臍帶血來源間充質細胞在軟骨分化14 d后eca-miR-140上調表達。在這些細胞中，miR-140的表達模式與軟骨特異性轉錄因子

sox9

十分相似，表明miR-140可能受

sox9

的調控。還有研究比較了患蹄葉炎馬與健康馬間的miRNAs水平，發現3個miRNAs(eca-miR-23b-3p、miR-145-5p和miR-200b-3p)在治療前表達量增加，而治療后miR-200b-3p表達量降低。此外，eca-miR-145-5p和eca-miR-200b-3p表達在蹄葉炎急性發作疼痛馬和健康對照組馬中表達量也不同。

在膠原酶誘導的馬肌腱病變模型中eca-miR-29a下調表達是病變過程中膠原蛋白3(Col3)過量表達導致。同樣，人hsa-miR-29a在肌腱疾病中與IL33介導的組織重建和Col3表達量增加有關。這表明，將miR-29a重新導入受損肌腱是一種可行的新治療方案。有針對于miRNA表達水平在馬匹糖原累積性肌病(Polysaccharide storage myopathy，PSSM)和反復勞損性橫紋肌溶解綜合征(Recurrent exertional rhabdomyolysis，RER)的對比性研究，結果顯示，miRNAs表達量在患病馬與對照馬及患PSSM馬與患RER馬之間均有差異。在RER中檢測到eca-miR-23a、miR-30b、miR-133、miR-195和miR-339表達量增加，而在PSSM中檢測到eca-miR-193表達量增加。此外，eca-miR-181、eca-miR-188和eca-miR-206表達量在French Trotters和Norman Cobs馬品種之間存在差異。肌腱損傷在運動員和賽馬中非常常見，是膠原基質紊亂導致的肌腱損傷。在小鼠和人類肌腱損傷中miR29a轉錄后調節表達Ⅲ型膠原蛋白。在肌腱病變馬匹采用局部注射miR29a或類似物安慰劑治療。治療后在第2周Ⅲ型膠原轉錄水平降低，而Ⅰ型膠原沒有顯著變化。與對照組相比，miR29a治療后的肌腱相對損傷橫斷面積明顯降低。這些數據支持了miRNAs可介導促進損傷后肌腱組織重塑的早期病理生理調節機制，證實miR-29a治療可促進肌腱愈合。

3.2 miRNA 在馬疾病診斷中的潛在應用

自從miRNAs在疾病中基因表達的負調控功能被證實，學者們就在不斷研究其在疾病診斷中的潛在應用，但由于過程復雜，應用起來較為困難。miRNA生物標志物位于調控的上游，容易在早期診斷出來。同時，在細針穿刺抽吸物、血液以及唾液和尿液等體液中均發現了高濃度的miRNAs，容易檢測出來。并且miRNAs非常穩定，不易降解，為隨時檢測提供了可能性。

血清中的miRNAs在高溫煮沸、極端pH和凍融條件下具有耐受性，在儲存10年的標本中仍可檢測到。人類血清或血漿中miRNome的改變與癌癥等疾病有關，雖然血漿中與病變相關的microRNA表達譜會受到所含血小板的干擾，但仍可用于早期診斷，甚至幫助檢測癌變。與腫瘤極其相關的miRNA在福爾馬林固定的石蠟組織標本中表達量仍具有穩定性，這是診斷中提取的最常見的組織活檢標本。這些標志物在治療馬癌癥檢測中可以起到一定的借鑒。某些miRNAs已證實可在組織中特異表達，例如馬血漿，這可能會增加未來miRNAs在診斷中潛在應用的可能性。相同miRNA在不同品種間的表達也存在差異，根據在矮種馬和溫血馬血清中檢測到的差異miRNAs，有50個miRNAs可作為潛在的種特異性生物標記。值得關注的是，全血中表達的miRNAs僅有33%可在血清中檢測到，說明全血中檢測到的大部分miRNAs并沒有被運輸到細胞外，這一發現值得進行深入研究。

亨德拉病毒(Hendra virus，HeV)通過蝙蝠傳播，是一種新型人畜共患病原體，可導致人類和其他哺乳動物產生致命疾病。迄今為止，人類戊型肝炎病例大多是由于接觸了已經感染HeV的馬所致，人類HeV病的所有病例都是由于與受感染馬密切接觸而導致的，病毒傳播是由于接觸受感染馬的鼻分泌物、血液、唾液或尿液而引起的。受感染的馬在分泌物中檢測到病毒基因組后才會表現出疾病癥狀(例如心率升高、體溫升高)，馬在潛伏期后期和臨床發病后都有傳播風險。目前，對馬急性HeV感染的診斷還依賴于感染初始階段可能發生的病毒脫落，這樣的方式發現時間較晚，如果可以盡早確診并隔離患病馬匹，可大幅降低人畜共患病毒傳播的風險。在運用常規手段確診病毒之前就開始進行檢測，HeV感染的馬匹血液中miR-146a會上調，說明測量宿主miRNAs表達水平可能有助于及早進行感染性疾病的診斷。miR-181可促進HeV感染，感染主要是通過miR-181抑制EPHB4(EPH receptor B4)蛋白表達，最終增強了HeV病毒與宿主細胞間的膜融合。因而調控miR-181表達進而抑制病毒融合，抑制感染可能是未來抗病毒治療的有效方案。

3.3 miRNA 在馬疾病治療中的潛在應用

miRNAs在許多細胞過程中通過轉錄后調控調節基因表達來發揮關鍵作用，從而利用miRNAs的這一特性來抑制疾病的發生和發展是一種可行的治療方案。從理論的角度看，miRNA可使誘發疾病的相關靶點mRNA降解或翻譯過程受到抑制，而miRNA抑制劑anti-miRs則可與成熟miRNA序列互補結合，從而降低過表達miRNA的活性，這種調控與整個疾病過程息息相關。但目前使用miRNA進行靶向治療面臨重大挑戰，無法保證足夠數量的治療藥物特異性遞送到目標組織，因為這些RNA分子可能受體內血清核酸酶降解和內吞作用的影響。

miRNA被抑制的方式可分為3種，其中前2種方式均以mRNA充當誘餌，減少miRNA與靶mRNA相互作用的數量；而第3種方法則為一段寡核苷酸序列占據了靶mRNA與miRNA的結合位點，屏蔽了miRNA與靶mRNA的相互作用。當miRNA基因表達下調有助于疾病發展時，通過設計合成miR-mimics可與內源性受抑制的miRNA的靶mRNA結合來模擬發揮同樣的作用。一些化學物質也會改變miRNome的表達，反之，miRNA也會改變細胞對藥物治療的敏感性。同時調節多個miRNA可能比靶向單個miRNA更有效。然而，由于miRNA可能靶向不同途徑中涉及的多個mRNA，因此在臨床應用前應仔細檢測選擇治療方案中的miRNA，可預防有害“靶外效應”。

針對miRNA靶向治療的相關研究表明，通過化學修飾法合成的RNA穩定性有所提高，后續逐步研發出的膠囊緩釋方法，使得少量基于miRNA的治療方法得以進行臨床試驗。在成功進行臨床研究后，制藥公司正在針對丙肝感染病例進行Ⅱ期anti-miRs試驗，利用miR-122結合丙肝病毒RNA基因組，使其降解無法繼續進行感染。在miR-155依賴型淋巴瘤和非小細胞肺癌的小鼠模型中正在進行的I期試驗分別通過anti-miR-155和miR-16類似物減輕腫瘤癥狀。而通過miR-29 類似物治療一類硬皮病的方法也正在進行Ⅰ期試驗中，miR-29在成纖維細胞中下調表達導致膠原COL1A1和COL3A1的表達上調，最后致使蛋白纖維化。胰島素抗肥胖小鼠模型的臨床前研究證實了anti-miR如何沉默miR-103/107表達對胰島素敏感性產生作用，進而推廣運用anti-miR降低胰島素敏感性II型糖尿病患者發展為非酒精脂肪肝類疾病的幾率。這些治療方案不斷完善，可為將來馬疾病miRNA治療方案提供參考。

4 結 語

miRNA通過轉錄后調控基因表達，在多種細胞過程中發揮關鍵作用。特異性miRNA的失調與疾病的發生發展有關，因而監測或調節miRNA在多種疾病中的表達對人類醫學臨床診斷、預測和治療非常重要，是一個具有研究價值的領域。隨著我國馬科學研究的深入及馬產業發展的壯大，miRNA在馬體內的表達分析也必將成為一個非常活躍的研究領域，隨著對miRNA在馬健康和疾病機制了解的增加，miRNA在馬中的應用也會相應增加。臨床診斷樣本中的miRNA有很好的穩定性，在不同疾病間存在特異性，以及進行無創取樣時有很大優勢，意味著使用單個動物的miRNA圖譜來進行疾病診斷是一個非常有趣的新概念。目前miRNA用于治療人類疾病已發展到臨床試驗階段，利用miRNA靶向治療馬疾病也在不斷探索中。