原發性高血壓老年患者血清富含半胱氨酸酸性分泌蛋白、DFR、半乳糖凝集素-3與頸動脈粥樣硬化的相關性分析

李芳，郝杰，劉金明，杜珍，祖秀光

1. 河北醫科大學第二醫院心內三科，河北石家莊050000；2. 海軍軍醫大學第一附屬醫院心血管外科，上海200433

原發性高血壓為常見的心血管疾病，在中老年人中多見。該病不僅是一個獨立疾病，而且是其他心腦血管疾病發生的高危因素[1]。在高血壓疾病的病理生理進程中機體體循環動脈處于高壓狀態，可引起頸動脈粥樣硬化，繼而增大心腦血管事件風險[2]。因此，早期識別高血壓患者頸動脈粥樣硬化，有利于提前制定預防措施，提前干預。富含半胱氨酸酸性分泌蛋白（cysteine rich acidic secretory protein，SPARC）是1 種由多種細胞分泌的鈣結合蛋白，與器官發育、細胞粘附、組織修復、慢性炎癥和血小板聚集等相關[3]。半乳糖凝集素-3（Galectin-3，Gal-3）是1 種多功能蛋白質，參與細胞生長、凋亡及炎癥損傷等[4]。血漿D-二聚體（D-dimer, D-D）和纖維蛋白原（fibrinogen,FIB）作為纖溶和凝血標志物，與高血壓發生和發展密切相關[5]。D-二聚體與纖維蛋白原之比（ratio of Ddimer to fibrinogen，DFR）為臨床新型指標之一，可反映纖溶/凝血平衡，該數值增高可提示平衡向纖溶偏移，血栓風險增高[6]。已有研究表明[7-9]，SPARC、DFR、Gal-3 與動脈粥樣硬化關系密切，但與高血壓患者頸動脈粥樣硬化關系鮮見報道。因此，本研究分析原發性高血壓患者血清中上述3 個指標與頸動脈粥樣硬化的關系，以期為臨床診治提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2019年8月—2020年8月于河北醫科大學第二醫院收治的原發性高血壓患者132 例設為觀察組，將同期健康體檢合格者90 例設為對照組。觀察組中男性78 例，女性54 例；年齡60～80 歲，平均年齡（70.5±4.2）歲；病程1～10年，平均病程（6.32±1.11）年；平均體質量指數（22.41±2.70）kg/m2；吸煙52 例。對照組中男性55 例，女性35 例；年齡61～82 歲，平均年齡（71.1±4.1）歲；體質量指數（22.27±2.62）kg/m2；吸煙37 例。2 組患者的體質量指數、年齡及性別構成比差異無統計學意義（0.05）。本研究經本院倫理委員會批準（批準號為YGY20181109），參與研究者簽署知情同意書后實施。

1.2 納入和排除標準 納入標準：（1）符合《中國高血壓防治指南2018年修訂版》中診斷標準[10]；（2）年齡≥60 歲；（3）病案信息完整；（4）病情可控制；（5）依從性好，可配合完成本次研究；（6）凡符合上述所有標準的病例方可納入本研究。排除標準：（1）繼發性高血壓；（2）知曉本研究，簽署知情同意書。合并嚴重的肝臟、心臟、腎臟等臟器疾病、精神疾病、免疫缺陷疾病、腫瘤性疾病或血液系統疾病。具有上述任意1 項標準的病例不納入本研究。

1.2 觀察指標與方法

1.2.1 血清學指標檢測 治療前采集觀察對象的外周靜脈血5 mL，3 000 r/min 離心10 min，取血清，采用酶聯免疫吸附法[11]檢測血清SPARC 和Gal-3 水平。試劑由上海江萊生物科技有限公司和上海富雨生物科技有限公司提供，批號分別為 1534870226 和FY-04137H2。采用全自動凝血分析儀（上海玉研科學儀器有限公司）測定D-D與FIB 水平，試劑由上海晶抗生物工程有限公司和上海江萊生物科技有限公司提供，批號分別為JK- (a) -E02586 和1533551594。計算D-D與FIB 之比，即DFR。所有操作均按儀器以及試劑說明書進行。

1.2.2 高血壓分級 治療前進行分級，1 級，舒張壓（diastolic pressure，DBP）在90～99 mmHg 和收縮壓（systolic pressure，SBP）在140～159 mmHg；2 級，DBP在100～109 mmHg 和/或SBP 在160～179 mmHg；3 級，DBP≥110 mmHg 和SBP≥180 mmHg[12]。

1.2.3 頸動脈粥樣硬化分級 治療前頸動脈內膜中層厚度（Carotid intima-media thickness，IMT）≤1.2 mm為0 級；1.2 mm＜IMT＜2.0 mm，只有1 個斑塊為1 級；2.0 mm≤IMT≤4.0 mm，有≥1 個斑塊為2 級；多個斑塊且其中有1 個斑塊IMT＞4.0 mm 為3 級[13]。

1.3 統計學分析 采用SPSS 24.0 統計軟件分析數據。以均數±標準差（±s）表示計量資料，2 組間比較采用 檢驗，多組間比較使用AVONA 檢驗（其中兩兩比較采用snk-檢驗）；以例數和百分率表示計數資料，采用2檢驗；相關性采用Spearman 相關分析。0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 2 組患者的血清SPARC、Gal-3、D-D、FIB、DFR檢測值比較 觀察組患者的血清SPARC、Gal-3、DD、FIB、DFR 檢測值均顯著高于對照組（0.05）。見表1。

表1 2 組患者的血清SPARC、Gal-3、D-D、FIB、DFR 檢測值比較（±s）

表1 2 組患者的血清SPARC、Gal-3、D-D、FIB、DFR 檢測值比較（±s）

組別 SPARC( g/L) Gal-3(ng/L) D-D（mg/L） FIB（g/L） DFR對照組（ =90）觀察組（ =132）images/BZ_133_242_667_264_690.png3.28±0.37 4.56±0.84 15.446 0.001 32.11±5.28 41.17±9.86 8.857 0.001 0.33±0.15 1.30±0.32 30.286 0.001 2.59±0.52 3.61±0.87 10.911 0.001 0.18±0.04 0.38±0.09 22.481 0.001

2.2 高血壓分級不同的患者血清SPARC 水平、Gal-3水平和DFR 值比較 132 例原發性高血壓患者中，高血壓分級1 級34 例、2 級37 例和3 級61 例；比較高血壓分級不同的患者血清SPARC 水平、Gal-3 水平和DFR 值，發現血清SPARC 水平、Gal-3 水平和DFR值均隨著高血壓分級的增加而上升（0.05）。見表2。

表2 高血壓分級不同的患者血清SPARC 水平、Gal-3 水平和DFR 值比較（±s）

表2 高血壓分級不同的患者血清SPARC 水平、Gal-3 水平和DFR 值比較（±s）

注：與1 級比較，△.05；與2 級比較，▲0.05

高血壓分級 例數 SPARC( g/L) Gal-3(ng/L) DFR 1 級2 級3 級34 37 61 3.99±0.52 4.60±0.86△5.23±1.12△▲36.48±7.00 41.23±9.70△45.29±11.01△▲0.33±0.07 0.38±0.09△0.44±0.11△▲

2.3 頸動脈粥樣硬化分級不同的患者血清 SPARC 水平、Gal-3 水平和DFR 值比較132 例原發性高血壓患者中，頸動脈粥樣硬化分級0～1 級93 例、2～3 級39例；比較頸動脈粥樣硬化分級不同的患者血清SPARC水平、Gal-3 水平和DFR 值，發現頸動脈粥樣硬化分級2～3 級患者血清SPARC 水平、Gal-3 水平和DFR 值均顯著高于0～1 級患者（0.05）。見表3。

表3 頸動脈粥樣硬化分級不同的患者血清SPARC 水平、Gal-3 水平DFR 值比較

2.4 高血壓分級與IMT 和斑塊面積的關系 IMT 和斑塊面積檢測值均隨著高血壓分級的增加而上升（.05）。見表4。

表4 高血壓分級不同的患者IMT 和斑塊面積檢測值比較（±s）

表4 高血壓分級不同的患者IMT 和斑塊面積檢測值比較（±s）

注：與1 級比較，△＜0.05；與2 級比較，▲＜0.05

高血壓分級 例數 IMT(mm) 斑塊面積(mm2)1 級2 級3 級34 37 61 1.88±0.45 3.56±0.75△5.76±1.25△▲15.33±3.75 19.00±4.60△23.12±5.11△▲

2.5 各指標與高血壓分級及頸動脈粥樣硬化分級的相關性分析 血清SPARC 水平、Gal-3 水平、DFR 值與高血壓分級及頸動脈粥樣硬化分級均呈正相關（0.05）。見表5。

表5 相關性分析

3 討論

SPARC 是1 種在機體內分布廣泛的小分子酸性糖蛋白，具有促進細胞骨架重排、調節細胞增殖、抑制內皮細胞增殖、促進血小板聚集、抑制血管生成和抗細胞粘附等生物學作用。以往廣大學者對SPARC分子的研究報道多集中在腫瘤方面，近年來對其研究的重心逐漸轉移至心腦血管領域。本研究顯示，SPARC在原發性高血壓老年患者血清中呈高表達水平，提示SPARC 可能參與了原發性高血壓的發病，其機制可能與動脈粥樣硬化、血脂異常和炎癥反應等過程有關。此外，不同高血壓分級及頸動脈粥樣硬化分級老年高血壓患者血清SPARC 水平總體對比得出的差異有統計學意義，且隨著分級增加，血清SPARC 水平逐漸升高，Spearman 相關分析顯示二者具有相關性。進一步分析，SPARC 可能增強內皮細胞通透性，并破壞屏障作用，增強血管平滑肌細胞遷移能力，使平滑肌細胞在血管內膜沉積，高水平SPARC 可阻止血管內膜增生，加速血管內膜粥樣硬化形成。

FIB 是血液內常見凝血因子，與免疫和炎癥有著密不可分的關系，并與動脈粥樣硬化關系密切。D-D可反映機體高凝狀態和機體的繼發性纖溶亢進，其在臨床的應用不僅局限于排除靜脈血栓栓塞，還在心腦血管疾病發生、發展以及不良事件預測中有重要應用價值。以往研究顯示[14]，原發性高血壓患者血漿中FIB 可促進頸動脈粥樣硬化斑塊形成，D-D 與頸動脈粥樣硬化斑塊形成也有相關性，FIB 和D-D 檢測值能夠反映高血壓患者動脈粥樣硬化程度。動脈粥樣硬化為高血壓患者發生心血管事件的基本病理環節，而頸動脈為反映全身動脈粥樣硬化的窗口，因此早期評估頸動脈粥樣硬化狀況和程度對心腦血管事件的預測有重要的意義[15]。本項研究結果表明，外周血DFR 與高血壓分級及頸動脈粥樣硬化分級均呈正相關關系，提示DFR 可能與高血壓患者頸動脈粥樣硬化有關，這可為臨床提供簡單且易獲取的評估高血壓患者頸動脈粥樣硬化情況的血清學標志物。

Gal-3 為1 種分子量為31 kD 的-半乳糖苷結合凝集蛋白，由巨噬細胞、肥大細胞及中性粒細胞等炎性細胞合成并分泌，該蛋白能夠介導細胞粘附，參與機體整體或局部炎癥反應，參與心肌纖維化。有研究顯示[16]，Gal-3 血清水平變化與心室重構關系密切，而心室重構為高血壓預后不良的重要影響因素之一。研究認為[17]，2 型糖尿病患者Gal-3 與雙側頸動脈內膜中層厚度（carotid intima-media thickness，cIMT）具有正相關關系，在校正有關影響因素后發現Gal-3仍是2 型糖尿病病人左側cIMT 異常的危險因素。本研究發現，觀察組Gal-3 均顯著高于對照組，這與既往研究結果相符[18]。同時本研究發現，隨著高血壓分級及頸動脈粥樣硬化分級增高，血清SPARC 水平逐漸升高。此前已有臨床研究顯示[19]血清Gal-3 表達水平與動脈粥樣硬化密切相關，Gal-3 在動脈粥樣硬化斑塊內沉積并隨斑塊范圍增大及炎癥程度增加而上調，Gal-3 可能是管理動脈粥樣硬化疾病的分子靶點之一。Gal-3 可能通過介導巨噬細胞分化、大量泡沫細胞形成、機體血管內皮功能異常和血管平滑肌增殖而促使動脈粥樣硬化形成[20]。此外，分析高血壓分級與IMT、斑塊面積的關系，發現CIMT 和斑塊面積均隨著高血壓分級的增加而上升，提示高血壓分級和頸動脈粥樣硬化分級之間的關系密切，這與既往報道相符[21]。

綜上所述，富含半胱氨酸酸性分泌蛋白、DFR 和半乳糖凝集素-3 在原發性高血壓老年患者血清中呈高表達水平，并與頸動脈粥樣硬化關系密切。但本研究的例數相對較少，結果可靠性可能相對較弱，此外不能忽視種族差異以及各因子聯合預測作用，因而后期仍需更大規模隨訪研究，以進一步探索3 個分子指標與高血壓患者頸動脈粥樣硬化的關系及機制。