一例蘇尼特綿羊副結(jié)核病的診斷

付 勝 ，李彥軍 ，劉佳利 ，張承天 ，高 雅 ，滿(mǎn)達(dá) ，孟克 ，郝學(xué)峰 ，王金玲 *

（1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院和農(nóng)業(yè)農(nóng)村部動(dòng)物疾病臨床診療技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018；2.內(nèi)蒙古阿拉善右旗動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，內(nèi)蒙古 阿拉善盟 737300；3.鄂爾多斯市烏審旗農(nóng)牧局動(dòng)物疫病防控控制中心 ，內(nèi)蒙古 鄂爾多斯 017300；4.鄂爾多斯市伊金霍洛旗動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，內(nèi)蒙古 鄂爾多斯 017200）

副結(jié)核病（Paratuberculosis）是由副結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium paratuberculosis）引起的多種動(dòng)物共患的一種慢性傳染病。牛、羊等很多反芻動(dòng)物易于感染，甚至馬、驢和豬等單胃動(dòng)物也可感染。該病在許多國(guó)家被發(fā)現(xiàn)，遍布全世界，呈地方性流行，常以散發(fā)形式出現(xiàn)。另外該病潛伏期長(zhǎng)，病程長(zhǎng)，有些患病動(dòng)物臨床表現(xiàn)不明顯，防控困難，對(duì)畜牧業(yè)的危害嚴(yán)重[1-2]。世界衛(wèi)生組織（OIE）將本病列為B類(lèi)動(dòng)物疫病，我國(guó)將其列為二類(lèi)多種動(dòng)物共患傳染病。本研究通過(guò)臨床病史、尸體剖檢、組織病理學(xué)和抗酸染色方法綜合診斷了1例綿羊副結(jié)核病，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 臨床病史

1只送檢的2歲蘇尼特綿羊于1歲左右開(kāi)始發(fā)病，主要癥狀為頑固性腹瀉和進(jìn)行性消瘦，初期食欲正常，后期食欲逐漸減退，體溫?zé)o明顯變化，病程1年。發(fā)病期間用各種抗細(xì)菌和抗病毒藥物治療后無(wú)明顯效果。

2 尸體剖檢

嚴(yán)重腹瀉，肛門(mén)周?chē)⑽膊亢秃笾蛎暇街罅肯”悖▓D1）。嚴(yán)重消瘦，全身脂肪完全萎縮消失。皮下干燥，淺表淋巴結(jié)輕度水腫，腹腔內(nèi)可見(jiàn)較多清亮腹水。空腸后段大部分和中段局部腸管明顯增粗，腸壁增厚（圖2），腸黏膜增厚明顯，黏膜形成明顯的腦溝回樣褶皺（圖3）；回腸和盲腸壁增厚，黏膜形成明顯的大腦溝回樣褶皺；腸壁淋巴結(jié)明顯腫大（圖4），腸系膜和腸漿膜淋巴管擴(kuò)張。胸腔和心包積有較多清亮的腹水，肝、脾和腎等器官體積明顯縮小，且?guī)в泻稚Ｆ渌M織器官眼觀(guān)無(wú)明顯病變。

圖1 嚴(yán)重腹瀉，肛門(mén)周?chē)⒚亢秃笾っ街罅肯”?/p>

圖2 空腸局部腸管增粗，管壁增厚

圖3 空腸黏膜增厚，形成腦回樣褶皺

圖4 腸系膜淋巴結(jié)腫大

3 組織病理學(xué)變化

剖檢時(shí)取全身各組織器官，特別是病變部位，取材大小約為1.5 cm、1 cm、1 cm，立即放入10%的福爾馬林溶液浸泡固定。將已固定24 h的組織修成約為1.5 cm、1 cm、0.3 cm大小的組織塊，再經(jīng)過(guò)脫水、透明、石蠟包埋、切片（約4 μm厚）和蘇木精-伊紅染色（H.E.染色），封片后進(jìn)行觀(guān)察。結(jié)果顯示，空腸后段（圖5）、回腸和盲腸（圖6）出現(xiàn)嚴(yán)重的增生性腸炎，空腸黏膜固有層和黏膜下層增厚，內(nèi)有大量的上皮樣細(xì)胞和少量淋巴細(xì)胞增生。肝細(xì)胞普遍脂肪變性，肝小葉內(nèi)可見(jiàn)多個(gè)上皮樣細(xì)胞和淋巴細(xì)胞增生灶 （圖7）。腸系膜淋巴結(jié)皮質(zhì)可見(jiàn)上皮樣細(xì)胞增生灶（圖8）。腎小管上皮細(xì)胞明顯壞死，肺臟輕度淤血。其他組織器官無(wú)明顯的特征性病理變化。

圖5 空腸黏膜固有層上皮樣細(xì)胞大量增生HE×400

圖6 盲腸黏膜固有層上皮樣細(xì)胞增生 HE×400

圖7 肝組織內(nèi)上皮樣細(xì)胞結(jié)節(jié) HE×400

圖8 淋巴結(jié)內(nèi)上皮樣細(xì)胞結(jié)節(jié) HE×200

4 抗酸染色

無(wú)菌取腸系膜淋巴結(jié)切面制備觸片，自然干燥，經(jīng)抗酸染色，用油鏡觀(guān)察。結(jié)果在觸片內(nèi)的上皮樣細(xì)胞胞漿內(nèi)外均見(jiàn)散在和成簇的典型的紅色小桿狀的副結(jié)核桿菌（圖9）。

圖9 淋巴結(jié)觸片上皮樣細(xì)胞內(nèi)紅色副結(jié)核桿菌抗酸染色法×200

5 診斷

根據(jù)典型的成年羊頑固性腹瀉和進(jìn)行性消瘦的臨床癥狀，典型慢性增生性腸炎（腸黏膜固有層和黏膜下層有大量的上皮樣細(xì)胞和少量淋巴細(xì)胞增生）、增生性腸系膜淋巴結(jié)炎（腸系膜淋巴結(jié)皮質(zhì)上皮樣細(xì)胞增生灶）以及在經(jīng)抗酸染色的淋巴結(jié)觸片內(nèi)的上皮樣細(xì)胞胞漿內(nèi)外均見(jiàn)散在和成簇的典型的紅色小桿菌，綜合診斷為副結(jié)核病。

6 防治

本病藥物治療的意義不大，沒(méi)有治療價(jià)值，預(yù)防措施主要是加強(qiáng)飼養(yǎng)管理和減少疾病誘因。要注意加強(qiáng)羊只的營(yíng)養(yǎng)，避免維生素和礦物質(zhì)缺乏，提高機(jī)體抗病能力。堅(jiān)持自繁自養(yǎng)，外來(lái)引進(jìn)羊只要進(jìn)行健康檢查，加強(qiáng)檢疫措施，防止引入病羊和帶菌羊。對(duì)已存在該病例的羊群進(jìn)行檢疫凈化，培育健康羔羊，淘汰病羊。對(duì)羊群中的疑似病例隔離飼養(yǎng)，每3個(gè)月做一次變態(tài)反應(yīng)，連續(xù)3次均為陰性的可視為健康羊，此時(shí)便可調(diào)出隔離圈舍。若變態(tài)反應(yīng)結(jié)果為明顯排菌羊，則應(yīng)立即安排撲殺。被污染的羊舍、飼槽、羊欄和運(yùn)動(dòng)場(chǎng)等要進(jìn)行嚴(yán)格消毒，用漂白粉、氫氧化鈉、生石灰、來(lái)蘇兒等消毒液進(jìn)行噴霧、浸泡沖洗等[3-4]。

有些地區(qū)疫病流行嚴(yán)重，全部撲殺將會(huì)面臨巨大經(jīng)濟(jì)損失，經(jīng)各項(xiàng)調(diào)查和長(zhǎng)期試驗(yàn)論證認(rèn)為，對(duì)新生羔羊進(jìn)行免疫接種，配合獸醫(yī)公共衛(wèi)生措施是控制該病最有效的辦法，但因免疫效果不佳和接種變態(tài)反應(yīng)呈陽(yáng)性等問(wèn)題未能在全世界范圍推廣。

7 討論

副結(jié)核病由副結(jié)核分枝桿菌引起，主要通過(guò)消化道感染，又稱(chēng)為副結(jié)核性腸炎，幼畜最容易感染。其特征性癥狀為頑固性腹瀉和進(jìn)行性消瘦，剖檢時(shí)可見(jiàn)腸黏膜增厚，形成腦回狀皺褶。該菌損傷宿主的免疫系統(tǒng)，使病畜對(duì)其他病原微生物的抵抗能力下降，進(jìn)而導(dǎo)致機(jī)體進(jìn)一步消瘦和虛弱。本病例送檢的2歲蘇尼特綿羊于1歲左右開(kāi)始發(fā)病，病程較長(zhǎng)，主要臨床癥狀也有嚴(yán)重的腹瀉和進(jìn)行性消瘦，初期食欲正常，后期逐漸減退。剖檢見(jiàn)皮下干燥，淺表淋巴結(jié)輕度水腫，腹腔內(nèi)可見(jiàn)較多清亮腹水，這與營(yíng)養(yǎng)不良導(dǎo)致的進(jìn)行性消瘦有關(guān)；空腸、回腸、盲腸腸壁和腸黏膜明顯增厚，且黏膜有明顯大腦溝回樣褶皺，多組織體積萎縮變小。病理組織學(xué)觀(guān)察也可見(jiàn)空腸黏膜固有層和黏膜下層有明顯增厚，大量上皮樣細(xì)胞和淋巴細(xì)胞增生，肝細(xì)胞脂肪變性及多個(gè)器官發(fā)生變化。這與許多報(bào)道和專(zhuān)業(yè)課本描述一致。

副結(jié)核分枝桿菌為革蘭氏陽(yáng)性菌，短桿狀，無(wú)鞭毛，不形成芽孢和莢膜，大小為0.2～0.5 μm×0.5～1.5 μm，在病料和培養(yǎng)基上呈縱排列，抗酸染色呈陽(yáng)性。細(xì)菌分型上一般將該菌分為I型、II型和III型，分別為羊型、牛型和生物中間型[5]。不同反芻家畜分離的副結(jié)核分枝桿菌的菌落形態(tài)、顏色及生化特性有一定的差異。本病例中淋巴觸片經(jīng)抗酸染色呈陽(yáng)性反應(yīng)，觸片見(jiàn)散在和成簇的典型的紅色小桿狀的副結(jié)核桿菌。

副結(jié)核分枝桿菌對(duì)自然環(huán)境的抵抗力比較強(qiáng)，可較長(zhǎng)時(shí)間存活于糞便、土壤和飲水中[6]；且幼畜從感染到出現(xiàn)臨床癥狀的潛伏期很長(zhǎng)，往往癥狀不明顯，不能及時(shí)發(fā)現(xiàn)并隔離，所以對(duì)畜牧業(yè)危害巨大。但其對(duì)熱比較敏感，60℃經(jīng)30 min或80℃經(jīng)1～5 min即可被殺死。在日常飼養(yǎng)過(guò)程中盡量自繁自養(yǎng)，引進(jìn)新羊時(shí)要加強(qiáng)檢驗(yàn)檢疫，若發(fā)現(xiàn)變態(tài)反應(yīng)為陽(yáng)性的羊要及時(shí)隔離，并對(duì)畜舍進(jìn)行消毒處理，平時(shí)及時(shí)清理糞便，更換潔凈的飲用水等。