2015年至2019年遼寧省麻疹實驗室網絡運轉和監測效果分析

段亞彤，王燕，郝爽，王艷

（遼寧省疾病預防控制中心免疫規劃所，沈陽 110005）

麻疹是由麻疹病毒引起的常見的兒童急性呼吸道傳染病，具有很強的傳染性，容易在人口密集且未普種疫苗的地區流行。隨著公共衛生事業的進步及宣傳力度的加大，人們對麻疹的危害有了深刻認識。2006年至2012年中國消除麻疹行動計劃［1］指出提高疫苗免疫覆蓋率與進行麻疹流行病學監測的同時，也要加強實驗室監測。2000年，WHO全球麻疹和風疹實驗室網絡（WHO Global Measlesand Rubella Laboratory Network，GMRLN）正式成立，為監測工作提供高質量的實驗室支持［2］。遼寧省麻疹實驗室網絡于2001年建立，包括1個省級及14個市級疾病預防控制中心麻疹實驗室，每年接受WHO及省級實驗室考核。本研究分析了2015年至2019年遼寧省麻疹實驗室網絡運轉情況及監測效果，旨在為做好麻疹實驗室網絡監測工作，結合流行病學有效控制麻疹提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 材料

麻疹疑似病例血清標本、尿液及咽試子標本均由縣（區）級采集，血清標本由市級麻疹實驗室檢測。遼寧省2015年至2019年麻疹實驗室網絡監測數據來自遼寧省疾病預防控制中心麻疹專報系統。病毒分離標本由省級麻疹實驗室檢測，尿液及咽試子標本均由市級麻疹實驗室提供。麻疹和風疹IgM抗體檢測試劑盒購自德國維潤（塞潤）試劑研發公司，檢測按照試劑盒說明書進行。

1.2 方法

1.2.1 疑似病例血清IgM抗體檢測：采集遼寧省2015年至2019年疑似麻疹病例血標本，分離血清。采用酶聯免疫吸附試驗（enzyme-linleed immunosorbent assay，ELISA）分別對麻疹IgM和風疹IgM抗體檢測，麻疹和風疹IgM抗體檢測方法和步驟參照試劑盒說明書進行，測定結果以酶標儀讀數為準。判定標準：檢測樣本光密度（optical density，OD）值Cut-off上限為陽性（+），檢測樣本OD值＜Cut-off 下限為陰性（-），檢測樣本OD值Cut-off下限～Cut-off上限為可疑（±），在7～10 d后采第二份血復測。

1.2.2 病毒分離和基因分型：省級實驗室承擔疑似麻疹病例標本病毒分離工作，采集疑似麻疹病例尿液和咽拭子標本，利用Vero-Slam細胞，對市級麻疹實驗室分子生物學檢測陽性標本進行病毒分離。采用反轉錄聚合酶鏈反應（reverse transcriptase polymerase chain reaction，RT-PCR）和核酸測序對分離物進行病毒基因序列測定及基因分型。

1.2.3 麻疹IgG抗體水平監測：省級疾病預防控制機構根據麻疹發病趨勢，在常規免疫規劃工作薄弱和流動人口聚集的地區開展健康人群免疫水平調查。按照預防接種工作規范及監測工作計劃，2015年在遼陽市、盤錦市開展健康人群麻疹抗體水平監測，年齡分組為＜1歲、1～2歲、3～4歲、5～6歲、7～14歲、15～19歲、≥20歲，每組采集血樣≥30份，每份血清≥1 mL。采用ELISA檢測血標本麻疹IgG抗體，檢測試劑由德國維潤（塞潤）試劑研發公司提供，檢測結果的判定以酶標儀讀數為準。判定標準：檢測樣本OD值≥Cut-off上限為陽性（+），檢測樣本OD 值＜Cut-off下限為陰性（-）。

1.2.4 實驗室考核及質量控制：國家麻疹實驗室網絡由國家、省、市三級疾病預防控制中心麻疹實驗室組成，國家實驗室每年對省級實驗室進行考核及質量評估，麻疹、風疹盲樣考核標本量為20份，由WHO提供；省級實驗室每年對市級實驗室進行考核及質量評估，麻疹、風疹盲樣考核標本量為10份。省級對市級實驗室采集的麻疹、風疹疑似病例標本進行麻疹、風疹血清IgM抗體復核。通過即刻法結合質控圖進行內部質量控制，檢測標本正確率為100%，并且在規定時間內反饋結果為合格。

1.3 統計學分析

采用 Excel 2010 軟件進行數據整理，應用 SPSS 22.0軟件進行統計學分析，計數資料采用率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，P＜ 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清IgM監測結果

2015年至2019年遼寧省14個市共報告麻疹疑似病例5 774例，采集血標本5 395份，采集率為93.44%；共檢測血標本5 345份，麻疹IgM陽性365份，陽性率為6.83%，風疹IgM陽性670份，陽性率為12.54%，見表1。

表1 2015年至2019年遼寧省麻疹、風疹實驗室血清監測結果

2.2 病原學監測結果

2015年至2019年全省5 774例麻疹疑似病例中，采集病原學標本1 589份，采集率為27.52%，分離到麻疹病毒226份，麻疹病毒檢出率為14.22%；省級實驗室每年對分離到的麻疹病毒進行基因測序，2015年至2019年麻疹病毒基因型鑒定共90株，其中H1a基因型87株，占96.67%，其他基因型3株，占3.33%。2015年基因測序24株，基因型均為H1a；2016年測序4株，基因型均為H1a；2018年測序7株，基因型為4株H1a、1株D8、2株A；2019年測序55株，基因型均為H1a，見表2。

表2 麻疹、風疹實驗室病原學監測結果

2.3 麻疹IgG抗體水平監測結果

遼陽和盤錦兩市共檢測標本430份，陽性標本385份，陽性率為89.53%。其中遼陽市檢測標本210份，陽性標本188份，陽性率為89.52%；盤錦市檢測標本220份，陽性標本197份，陽性率為89.55%。

1～2歲組抗體陽性率最高，為96.67%，其次是3～4歲組、＜1歲組，陽性率分別為95%、90%。按學齡前后年齡組進行比較，差異有統計學意義（χ2=5.253，P＜0.05）見表3、4。

表3 遼寧省健康人群麻疹抗體監測

表4 遼寧省健康人群學齡前后麻疹抗體比較

2.4 實驗室考核及質量控制

2015年至2019年遼寧省疾病預防控制中心麻疹實驗室每年接受國家麻疹實驗室組織的麻疹、風疹血清盲樣標本職能考核，結果符合率均為100%；遼寧省14個市級麻疹實驗室每年接受省級麻疹實驗室盲樣標本職能考核，結果符合率均為100%；2015年至2019年省級麻疹實驗室對市級麻疹實驗室共抽樣復檢血清672份，其中 2015年至2017年每年抽樣復檢120份、2018年抽樣復檢125份、2019年抽樣復檢187份，結果符合率均為100%。

3 討論

WHO西太平洋地區確定消除麻疹目標以來，我國將消除麻疹作為擴大國家免疫規劃的一項重要內容，WHO監測數據顯示，2020年1月至4月全球仍有166個國家和地區報告麻疹病例［3］。本研究結果證實我省仍有麻疹病例發生，麻疹病毒基因型以H1基因型的 H1a基因亞型為主，這與H1a在國內外廣泛分布且逐漸成為優勢亞型的流行病學特征一致［4-7］。

健康人群抗體陽性率1～2歲組最高，分析可能與麻疹類疫苗接種的免疫程序有關，麻疹類疫苗8月齡接種第1劑次，18月齡接種第2劑次，接種疫苗后抗體水平增高，說明疫苗免疫效果良好，0～1歲年齡組抗體陽性率維持較高水平可能與接種第一劑次的麻疹類疫苗及母傳抗體有關。本研究結果顯示學齡后人群抗體陽性率低于學齡前人群，說明麻疹抗體隨著年齡增長會下降，但也可能有部分人群恢復到之前水平。我國＜8月齡的嬰兒是麻疹發病的主要人群，鑒于現有免疫策略是對8月齡兒童開始首劑次含麻疹成分疫苗的接種，因此，降低＜8月齡兒童麻疹發病只能通過減少傳染源，提高含麻疹成份疫苗接種覆蓋率和提高母傳抗體的方式進行防控［8-9］。有研究［10］表明，人群中95%具備麻疹免疫力才可有效阻斷麻疹傳播，通過提高疫苗接種率維持高水平人群免疫力是實現消除麻疹的基礎，也可降低發生大范圍暴發或流行的風險，所以全人群高質量麻疹疫苗接種是消除麻疹的重要策略。研究［11-12］顯示，根據各地區的麻疹發病趨勢，定期開展健康人群抗體水平調查，針對重點年齡組和薄弱地區適時開展含麻疹成分疫苗補充免疫可減少易感人群。

實驗室質量控制是現代實驗室管理的重要組成。質量控制體系健全的病原微生物實驗室檢測結果可靠、特異性和靈敏性高，能及時診斷傳染病疫情，對預防和及時控制相關病原微生物引起的傳播和疫情暴發起重要作用［13］。我省通過開展麻疹實驗室網絡質量控制，判斷常規監測工作符合率及準確性，保證了實驗室檢測質量及檢測結果準確可靠，同時定期開展了實驗室內部質量控制，保證不同時間和地點的檢測結果具有可比性。本研究結果顯示，我省麻疹實驗室網絡運轉良好，實驗室檢測質量維持較高水平。

綜上所述，Hla基因型為2015年至2019年遼寧省麻疹的優勢基因型。遼寧省麻疹實驗室網絡運轉良好，建立了高質量的疑似病例血清學監測、病毒分離及實驗室網絡質量控制體系，為結合流行病學有效控制麻疹提供了科學依據。目前，麻疹監測工作已經進入以個案為基礎、流行病學和實驗室監測相結合的監測階段，血清學監測和病毒學監測是麻疹實驗室監測的重要組成部分，不僅要保持監測系統高質量運轉狀況和高靈敏性，同時也要保證實驗室的監測質量，最終消除麻疹有賴于麻疹實驗室監測質量的不斷提高［14-15］。