甲狀腺冰凍與石蠟切片的病理診斷價值觀察

許 研

（江蘇省淮安市淮安醫院病理科，江蘇 淮安 223200）

近年來受多種因素影響，甲狀腺疾病的發病率呈逐年上升趨勢，且該疾病的發病人群已逐漸年輕化，女性多于男性。甲狀腺癌是最常見的內分泌惡性腫瘤，臨床上甲狀腺癌的早期發現非常重要，目前超聲是甲狀腺結節的首選影像學檢查方法[1]。但是傳統影像法對患者進行診斷無法準確地判斷病因，容易導致出現癌細胞轉移等問題。為提高診斷的準確率，有學者發現通過快速冰凍法能夠有效縮短樣本檢查時間。冰凍切片是指在手術臺上取相應組織，放到冷凍機里進行冷凍成塊，并將其用于快速診斷，但最終結果仍然以石蠟切片診斷為主[2]。此外冰凍切片的種類也有很多，包括低溫恒冷箱冰凍切片法、二氧化碳冰凍切片法等，隨著醫療科技的進步，各類技術也得到推廣。冰凍切片主要用于以下幾種情況，如確定病變是否為腫瘤，判斷腫瘤的良性和惡性，同時了解腫瘤有無擴散，確定手術切緣有無腫瘤浸潤，了解手術范圍是否符合要求等[3]。冰凍切片法可幫助識別手術中的一些意外及微小可疑組織。本次臨床試驗主要探究了在甲狀腺疾病患者中快速冰凍法和石蠟切片法對于病理診斷的影響。選取本院2020年3月至2021年3月收治的108例甲狀腺疾病患者作為研究對象，對所有患者均進行冰凍切片和石蠟切片檢查?，F對調研結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2020年3月至2021年3月收治的108例甲狀腺疾病患者作為研究對象，對所有患者均進行冰凍切片和石蠟切片檢查。年齡29～77歲，平均年齡（52.17±5.01）歲，男女患者比27∶81。

納入標準：所有患者均實施手術治療，且醫院倫理會對本次調研已經批準，患者能夠配合手術及檢查，并簽署了知情同意書。

排除標準：患者有嚴重感染性疾病，凝血功能障礙以及手術禁忌證患者，并排除處于妊娠期的患者、精神障礙的患者。

1.2 方法 對所有患者均進行冰凍切片和石蠟切片檢查。對患者開展手術治療，并在手術治療期間的病變部位進行標本采集，及時送檢，實施病理組織檢查。在取材上，步驟如下。①固定組織材料，不能太厚太大，如果過厚則會增加冷凍時間，太大則難以切完整。②取出組織，將其放入冷凍臺上冷凍。③將冷凍好的組織塊夾緊切片機持承器上，將組織修平。④調整好需要厚度，原則上為細胞密集的薄切，如果纖維多細胞稀，可稍微進行厚切。⑤制作冰凍切片，需要絕對細心，做好調節，取載玻片，并且將其貼附上去。⑥根據不同組織進行溫度設定，對于甲狀腺腫瘤患者可以在-15～-20 ℃。同時注意保持切片刀干凈等，如果有殘余包埋劑黏附在刀上會破壞甚至撕裂切片而導致無法完整切出。其次，對于多塊組織進行冰凍切片時，需進行編號依次切片，防止混亂。在放置冰凍組織前，需要進行組織走勢和形狀的放置。在切片時如果冰凍過度，也需要在溫室內停留片刻再進行切片[4]。

采用快速冰凍片對樣本進行分析診斷，對患者采用3片左右的樣本，將樣本防放置在冰凍切片中，冰凍3 min左右，通過專業技術處理后對樣本進行分析診斷；切片厚度約為5 μm，在快速固定液中進行固定并實施HE染色，為防止貼片脫落，應當貼附在載玻片上。隨后使用溫水反藍后實施脫水固定。

在石蠟切片上需將冰凍切片剩余組織制作成石蠟切片，通過甲醛進行固定，通過乙醇開展脫水，隨后將組織放入乙醇和三氯甲烷的混懸液中。切片厚度為5 μm，隨后開展脫蠟、染色，并在顯微鏡下進行觀察。

結果由兩名以上醫師進行共同診斷。

1.3 評價標準 本次試驗需要開展診斷準確率的分析，此外在結果中分為兩種檢查診斷一致，誤診、診斷結果相反以及冰凍切片無法得出準確結果需要借助石蠟切片共同判斷。

1.4 統計學方法 使用SPSS24.0軟件分析處理數據，計量資料采用（）表示，兩兩比較采用獨立樣本t檢驗；計數資料采用n（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

從檢查上看，石蠟切片腫瘤患者為90例，非腫瘤患者有18例。在腫瘤患者中，有45例為良性，45例為惡性。惡性患者中包括甲狀腺乳頭癌，甲狀腺髓樣癌及甲狀腺濾泡狀癌。從冰凍切片上看，有86例患者的診斷結果與石蠟組相同，即診斷準確率為96.30%。冰凍切片不能夠確診，需要等待石蠟切片確診的有4例，另1例為誤診。見表1、表2。

表1 兩組患者診斷符合率對比

表2 惡性腫瘤患者的病理類型對比

此外，對比兩種診斷方式的用時，冰凍切片用時為（23.22±3.76）min，石蠟切片用時為（26.78±5.44）min，差異較大，具有統計學意義（P＜0.05）。

3 討 論

甲狀腺癌也被稱為甲狀腺惡性腫瘤，該疾病的發生與地區性別等因素相關。甲狀腺癌十分常見，包括4種主要類型[5]。預后較好惡性度相對較低的是乳頭狀癌，且女性患者的發病人數更多，在任何年齡均可發現，以青壯年群體更為多見。從臨床癥狀上看，常在體檢的時候通過甲狀腺觸診和頸部超聲檢查，能夠發現甲狀腺小腫塊，典型癥狀為甲狀腺內有腫塊，質地硬而固定。晚期會有聲音嘶啞、呼吸困難等情況。從診斷情況上看，可以結合甲狀腺腫塊、頸部淋巴結腫大，有壓迫為主，且如果甲狀腺腫塊迅速增加，應當重點觀察[6]。在疾病的治療上，以手術綜合治療為主，術后也要開展內分泌治療。具體方案需結合腫瘤病理類型，病變嚴重程度及患者全身情況作出判斷。如患者的甲狀腺腫瘤較小且無壓迫癥狀不需要采取手術治療，一般通過觀察、定期復查等可以有效控制，如果腫瘤較大或不能排除惡性，通常要采用手術辦法進行治療[7]。

臨床上早診斷、早治療能夠提升患者的生存率，在甲狀腺癌的診斷上，包括病理診斷和彩色多普勒超聲診斷，病理診斷中能夠為甲狀腺癌的發病機制，發病過程，及機體形態結構等提供依據[8]。手術治療前需采取切除的方式獲得病變組織，待進行固定染色后，通過顯微鏡下觀察病變組織，結合鏡下組織結構以及細胞病變特征來做出判斷。

手術過程中常用的方法是冰凍切片，通過這一方式為手術切除范圍和手術方式的確認提供支持，冰凍切片的準確率與手術質量有密切關系[9]。但冰凍切片的取材存在局限性，在制作切片上，如果取材有問題，效果不是很理想。特別是針對乳頭狀癌及毛玻璃狀結節，容易被忽略造成誤診。由此要不斷優化檢查策略，進一步降低誤診率。

其他診斷方案還包括石蠟切片，但是其診斷時間相對較長，在手術過程中通過冰凍切片診斷的方式時間較短，可以更快為手術治療方案的確認提供支持[10]。當患者術前被確認為惡性腫瘤時，經手術將腫瘤組織切除，可直接將切除邊緣送檢。根據冰凍切片的結果來確認是否切除徹底。除本次研究外，筆者也調查了其他學者的研究[11]，通過試驗證實冰凍切片的準確率相對較高，在選擇標本的時候應選擇游離組織或者有癌變傾向的組織。冰片切片如果厚度不合理，也會影響到診斷結果。在制作冰凍切片的時候，應該多做凸顯組織質地染色，結果由兩名以上醫師進行判讀，確保結果的準確性，當診斷存在疑議時，以石蠟切片結果出來后再進行手術，防止對患者造成其他傷害[12]。

對于甲狀腺疾病，無論是良性還是惡性，都會威脅到患者健康，早治療也是任何一項疾病的治療原則，甲狀腺患者的臨床表現有相似性，診斷難度較大，在目前的方案上有很多。快速冰凍法相比傳統石蠟切片法能夠更加快速有效地對患者的病情進行分析，提高確診率，對治療能夠提高較大的參考價值[13]。與此同時，臨床醫師要和病理師加強合作交流，結合患者病史、實驗室結果進行治療方案的確定，防止制片質量不高、失誤等情況。如果無法從組織中判斷，熟練辨認特征結構，要從浸潤情況上入手分析，觀察細胞核的分裂現象[14]。此外，要指導快速冰凍切塊的使用操作過程、注意事項，從而確保治療療效。

病理檢查作為甲狀腺疾病的金標準，術后石蠟切片也是常用的病理學檢查方式，但是在實際操作中具有制作時間長，會延誤病情的治療，因此石蠟切片病學診斷難以對手術過程進行及時指導。部分患者出現術前誤診會導致手術方案制訂偏差，這也會影響到最終的治療效果，患者需要通過二次手術進行治療，不僅增加了對患者的創傷，也由此增大了經濟負擔，由此我們也要提出對患者來說更簡單快捷的病理學診斷方式[15]。術中冰凍切片方式則屬于新方法，能夠在手術臺上切取患者的病灶組織，并將其放到冷凍機里，在-20 ℃的環境下冷凍成塊，隨后進行切片[16]。

本研究結果顯示，術后石蠟切片和冰凍切片各具自身優勢，冰凍切片的操作簡單能夠縮短診斷時間，石蠟切片則需要一系列過程，包括脫水、包埋、切片、染色等，有時候需24 h。從冰凍切片上看，有86例患者的診斷結果與石蠟組相同，即診斷準確率為96.30%。能夠說明冰凍切片法對甲狀腺疾病的診斷效果良好，診斷率高，可以將其作為重要的診斷方式進行臨床應用。

此外，在術中進行取材及操作人員的技術，對結果的影響十分重要，由此我們可以從以下幾點進行改進。①要提升取材的質量，在面對甲狀腺疾病患者的時候，需要選擇有癌變傾向以及無血色的病變組織，要進行多剖面觀察，選擇適合的位置，并且對于存在包裹的病灶在取材時，需要選擇包膜部位交接組織[17]。②規范操作，加強對醫師的培訓，重點針對冰凍切片的操作流程進行考核，在冰凍切片組織時，要注意厚度，減少刀痕，防止對染色效果的影響，在切片時還要保持合適的速度，動作輕柔清晰，染色過程要進行緩慢的沖洗，防止對膠質的影響[18]。在染色中還可能出現掉色的情況，需要將切片廢棄，重新切片進行相關操作。快速冰凍切片用于手術中病理診斷病理，醫師在收到標本之后的15 min之內做出判斷，并告訴手術醫師如何做出更有效的治療決策，病理診斷的正確直接關系到手術臺上手術醫師對患者的處理[19]。由此可見，冰凍切片病理診斷，對于手術治療有絕對的指導意義，要求正確、迅速、可靠。但是由于要在較短的時間內作出決斷，其難度相當高，而切片的制作質量不如石蠟切片，故存在一定的誤診率和延遲診斷率[20]。

綜上所述，采用冰凍切片方式能夠更快地得出診斷結果，為治療提供科學的依據，其診斷準確率較高，但仍然存在一些局限性，需要在石蠟切片下進一步確認治療方案。冰凍切片方式用于甲狀腺疾病的診斷具有重要意義。